SU-DHL-2人(ren)B細胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細(xi)胞

公司產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨床診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入培養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後(hou)轉入液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒(he)可直接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以下(xia)細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處(chu)理僅供(gong)參考，具體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入含(han)適量(liang)培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液加入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二天(tian)換(huan)液並檢查細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況而定），然後(hou)在顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情況，若細胞大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅速拿回操(cao)作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕打勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細胞培養(yang)液，裝(zhuang)入無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量(liang)加入無血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

CL-0087H4(人(ren)腦神經膠質瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)髓(sui)鞘相關糖(tang)蛋白(MAG)ELISA試劑盒(he) IL-12/P70(Human Interleukin 12)  人(ren)白介素12 96T

NF-H： 高分子量(liang)神經絲蛋白抗體(ti) 大(da)鼠(shu)小腸隱窩上皮(pi)細(xi)胞;IEC-6

SC-1(小鼠胚(pei)胎細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 K562(慢性髓(sui)原白血病) 大(da)鼠(shu)髓(sui)鞘堿(jian)性(xing)蛋白抗體(ti)(MBP aibody)ELISA試劑盒(he) IL-11(Human Interleukin 11)  人(ren)白介素11 96T

NFKB p65： 細胞核因子/k基因結合核(he)因子抗體(ti) 人(ren)前列(lie)腺癌(ai)細(xi)胞(bao);DU 145 [DU145;DU-145]

CF Protein Human 重組人(ren) CF 蛋白 (His 標(biao)簽) 大(da)鼠(shu)髓(sui)鞘堿(jian)性(xing)蛋白(MBP)ELISA試劑盒(he) PA-IgG/M/A(Mouse platelet antibodies IgG/M/A)  小鼠抗(kang)血小板抗(kang)體 CTNNB1 Others Human 人(ren) beta-Catenin / CTNNB1 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照)

Phospho-IKK alpha(Ser180) + IKK beta(Ser181)： 0酸化KB抑制(zhi)蛋白激酶(mei)α/β抗體(ti) 人(ren)橫紋(wen)肌(ji)肉瘤細胞;A-204

RH-35(大(da)鼠(shu)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照) 人(ren)八聚體(ti)轉(zhuan)錄(lu)因子(OTF2B)ELISA 試劑盒(he) PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體(ti)抗原 0.5mg

Phospho-IKK alpha/beta (Ser176 + Ser180)： 0酸化KB抑制(zhi)蛋白激酶(mei)α/β抗體(ti) 主動(dong)脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CCL14 Protein Human 重組人(ren) CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biao)簽) 人(ren)八聚體(ti)轉(zhuan)錄(lu)因子(OTF2A)ELISA 試劑盒(he) Phospho-PAK4 (Ser99) peptide 0酸化(hua)p21激活激酶(mei)4多肽(tai)抗(kang)原 0.5mg

IFT46： 細胞纖(xian)毛內(nei)轉運(yun)同源蛋白46抗體(ti) SPHK1 Others Human 人(ren) SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液 (陽(yang)性對(dui)照)

SU-DHL-2人(ren)B細胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細(xi)胞RAB40A： RAS癌(ai)基(ji)因家族(zu)蛋白RAB40A抗體(ti) 小鼠誘(you)導性多(duo)潛能(neng)幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-A2

CL-0312293ET(人(ren)胚腎(shen)細(xi)胞(bao)(SV40T和EBNA1基因修飾(shi)細胞(bao)))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)補體(ti)蛋白4(C4)ELISA 試劑盒(he) BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki 人(ren)骨(gu)成型(xing)蛋白4 96T

RAB40C： RAS癌(ai)基(ji)因家族(zu)蛋白RAB40C抗體(ti) FZD5 Others Human 人(ren) Frizzled-5 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照)

人(ren)神經束(shu)膜細胞(bao)總RNAHPC NA 大(da)鼠(shu)補體(ti)蛋白3(C3)ELISA試劑盒(he) BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2)  人(ren)骨(gu)成型(xing)蛋白2 96T

Relaxin 3： 松(song)弛(chi)素3抗(kang)體(ti) 非洲(zhou)綠猴(hou)腎細胞(bao)系(xi)/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+

三、培養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完好(hao)，培養(yang)液是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現象(xiang)，若有上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞說(shuo)明書，了解細(xi)胞相(xiang)關信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血清(qing)比例(li)、所需(xu) 細胞因子等，確保細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而導致細胞(bao)出現問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表面，顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞由於溫(wen)度 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞，並(bing)接種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同條(tiao)件的(de)培養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的(de)原因，個別敏(min)感細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩(wen)定的(de)情況，請(qing)及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制(zhi)的(de)培養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。