SVEC4-10小(xiao)鼠(shu)淋(lin)巴(ba)結(jie)血(xue)管上(shang)皮樣(yang)細(xi)胞(bao)

公(gong)司產品(pin)僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終止消化(hua)，再輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終

止消化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉移(yi)至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍存管中；

4）先將細(xi)胞(bao)凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使用程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速搖晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天換(huan)液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使消化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或者瓶中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存管做(zuo)好(hao)標識。將凍存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存管位置(zhi)以便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

公司正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

phospho-NFAT5 (Ser1197)： 0酸(suan)化(hua)活化(hua)T細(xi)胞(bao)核(he)因(yin)子(zi)5蛋(dan)白抗體(ti) CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

CM-H116人腦(nao)動(dong)脈(mai)血(xue)管平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)100mL 大鼠(shu)前(qian)列(lie)腺(xian)酸性0酸酶(mei)(PAP)ELISA試(shi)劑盒 BRCA-1(Human breast cancer susceptibility protein 1)  人癌(ai)易(yi)感蛋(dan)白1 96T

Lipocalin 2： 脂(zhi)質運(yun)載(zai)蛋(dan)白抗體(ti) 大鼠(shu)肝(gan)細(xi)胞(bao)瘤(liu);H-4-II-E

人少(shao)突膠(jiao)質前(qian)體(ti)細(xi)胞(bao)(HOPC)(貼(tie)壁生長(chang)) 人間(jian)充(chong)質幹細(xi)胞(bao)-肝(gan) AGS人胃(wei)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)前(qian)列(lie)腺(xian)酸性0酸酶(mei)(PAP)ELISA 試(shi)劑盒 PY(Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks)  小鼠(shu)交(jiao)聯(lian)物 96T

NF2： 2型神(shen)經(jing)纖維瘤(liu)抗體(ti) 中國倉(cang)鼠卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao)K1(亞系克隆(long));CHO-K1

U-87 MG(人神(shen)經(jing)膠(jiao)質瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)鼠樹突狀(zhuang)細(xi)胞(bao)肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞(bao);DCS 人1,25二羥(qiang)基(ji)維生3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA 試劑(ji)盒(he) HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋(zi)病(bing)病(bing)毒-1/人類(lei)免(mian)疫(yi)缺(que)陷病(bing)毒1型(抗(kang)原) 0.5mg

IL-4R： 白細(xi)胞(bao)介(jie)素4受體(ti)抗體(ti) 腸粘(zhan)膜(mo)上(shang)皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

EFNB2 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋(dan)白 人(HYD)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 HIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋(zi)病(bing)病(bing)毒-1/人類(lei)免(mian)疫(yi)缺(que)陷病(bing)毒1型(抗(kang)原) 0.5mg

IL-2R gamma： 白介素2受體(ti)γ鏈抗(kang)體(ti) MAPK1 Others Mouse 小鼠(shu) ERK2 / MAPK1 / MAPK2 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

人關(guan)節(jie)軟(ruan)骨(gu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人(Human)幽門螺(luo)旋桿(gan)菌抗體(ti)IgG(HP-IgG)ELISA試劑(ji)盒(he) Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein) 麻(ma)疹病(bing)毒紅(hong)血(xue)球(qiu)凝集素蛋(dan)白多肽 0.5mg

SVEC4-10小(xiao)鼠(shu)淋(lin)巴(ba)結(jie)血(xue)管上(shang)皮樣(yang)細(xi)胞(bao)卵(luan)巢(chao)上(shang)皮細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)OEpiCM-prf 大鼠(shu)β-位澱粉(fen)樣(yang)前(qian)體(ti)蛋(dan)白裂解(jie)酶(mei)1(βACE1)ELISA試(shi)劑盒 Tn-T(Human Troponin T)  人肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白T 96T

RNF157： 環(huan)指(zhi)蛋(dan)白157抗體(ti) 293A (人胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2

EB病(bing)毒轉化(hua)的(de)人B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao);KMYM 人真(zhen)皮微(wei)血(xue)管內(nei)皮細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)β位澱粉(fen)樣(yang)前(qian)體(ti)蛋(dan)白裂解(jie)酶(mei)1(BACE1)ELISA試(shi)劑盒 ES-Ab(Human anti-Endostatin antibody)  人血(xue)管內(nei)皮抑素抗體(ti) CL-0319B16-F10(小鼠(shu)皮膚(fu)黑色素瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

293T, SV40轉化(hua)的(de)人胚(pei)腎(shen)上(shang)皮細(xi)胞(bao)系(xi) 大(da)鼠β羥(qiang)(βOHB)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a)  人血(xue)管緊(jin)張素Ⅱ受體(ti)Ⅰa型 96T

RBPJK： Notch轉錄(lu)調控(kong)蛋(dan)白RBPJK抗體(ti) NA Others H7N9 甲(jia)型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神(shen)經(jing)酶(mei) (Neuraminidase / NA) 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若(ruo)由於培養(yang)條件不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任由 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可以消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收到細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我司技(ji)術部溝通 交(jiao)流。由於運(yun)輸(shu)的(de)原因，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術人員跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科研(yan)使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說明書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。