血(xue)清的(de)使(shi)用與(yu)儲存(cun):正確(que)的(de)使(shi)用及(ji)保(bao)存(cun)血(xue)清,才能(neng)使(shi)血(xue)清發(fa)揮(hui)應有的作(zuo)用。
使用前(qian)處(chu)理:大部分血(xue)清在(zai)使(shi)用前(qian)必(bi)須滅(mie)活(huo)處(chu)理,即(ji)56℃30分鐘(zhong)。滅(mie)活(huo)的(de)目的是(shi)去(qu)除血(xue)清中(zhong)的(de)補(bu)體成(cheng)分,避(bi)免(mian)補(bu)體對(dui)細胞產(chan)生毒性(xing)作用。血(xue)清經過(guo)滅(mie)活(huo)也(ye)會損失(shi)壹些(xie)對細胞有利(li)的(de)成分,如生長因(yin)子,因(yin)此也(ye)有人提(ti)出(chu)血(xue)清不(bu)經滅(mie)活(huo)直接(jie)用於(yu)培養(yang),這樣做(zuo)的(de)前(qian)提(ti)是確(que)認(ren)血(xue)清中(zhong)不(bu)含(han)補體(ti)成(cheng)分。對(dui)於(yu)壹(yi)些(xie)品(pin)質高(gao)的(de)胎牛(niu)血(xue)清和新牛(niu)血(xue)清可以(yi)考(kao)慮(lv)不經滅(mie)活(huo)直接(jie)用於(yu)細胞培養(yang)。
儲存(cun)條(tiao)件:血(xue)清壹(yi)般(ban)儲存(cun)於(yu)-20℃,同(tong)時(shi)應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。購(gou)買(mai)大包(bao)裝(zhuang)的血(xue)清後(hou),首(shou)先(xian)要(yao)滅(mie)活(huo)處(chu)理,然(ran)後(hou)分裝(zhuang)成小(xiao)包(bao)裝(zhuang),儲存(cun)於(yu)-20℃,使(shi)用前(qian)融(rong)化。融(rong)化時最好(hao)現置於(yu)4℃。融(rong)化後的血(xue)清在(zai)4℃不(bu)宜(yi)長時(shi)間存(cun)放(fang),應盡(jin)快使用。
使用濃度:自從有了合成(cheng)培養(yang)基,血(xue)清就是(shi)作(zuo)為壹(yi)種(zhong)添(tian)加(jia)成(cheng)分與(yu)合成培養(yang)基混合(he)使(shi)用,使用濃度壹(yi)般為5-20%,常(chang)用是10%。過(guo)多(duo)血(xue)清容易使培養(yang)中的細胞發(fa)生(sheng)變(bian)化,特別(bie)是(shi)壹些(xie)二倍(bei)體(ti)的(de)無(wu)限(xian)細胞系(xi),迅速生(sheng)長之(zhi)後(hou)容易發生(sheng)惡性(xing)轉化。 采購(gou)血(xue)清時(shi),最好(hao)先(xian)從供(gong)應商處(chu)索取(qu)樣(yang)品(pin)進行(xing)試(shi)驗,選定壹批(pi)後就要(yao)保留足(zu)夠(gou)使用6個月至(zhi)1年的量,直至(zhi)用另(ling)壹(yi)批(pi)經過(guo)預(yu)先(xian)試驗的樣品(pin)代(dai)替。