STC-1小鼠小腸內分泌(mi)細胞(bao)

公司產(chan)品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例進行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用 PBS 清洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期保(bao)存(cun)。使用程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理僅(jin)供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液的凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹(chui)勻。然後將(jiang)所有細胞懸液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二天換液並檢(jian)查細胞密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上清，用不含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸潤所有細胞，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情況而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若細(xi)胞大部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的新皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良好時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集細(xi)胞及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去上清液，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註意凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍存(cun)管(guan)位置以(yi)便下次(ci)拿(na)取。

三、培(pei)養(yang)註意事項 

1. 收到細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培(pei)養(yang)液是否(fou)有(you)漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我們(men)聯系。

2. 仔細閱讀(du)細胞說(shuo)明書，了(le)解細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培(pei)養(yang)基、血清比例(li)、所需 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致細胞出現問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形成(cheng)碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客戶收到細(xi)胞後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀態(tai)，便於和我司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出現不穩定(ding)的情況，請及(ji)時和我們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情況，以(yi)便我們(men)的(de)技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基) 不能(neng)再用(yong)來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明書細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制(zhi)的培(pei)養(yang)基來培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到細(xi)胞後第(di)壹(yi)次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公司正在(zai)出售的(de)產(chan)品(pin)：

人海(hai)馬(ma)趾神經(jing)細(xi)胞(bao)(HN-h)(1×106) 人間充質(zhi)幹(gan)細胞(bao)-脂(zhi)肪(fang) HGC-27人胃癌細胞 大鼠(shu)潛(qian)伏轉(zhuan)化(hua)生(sheng)長因子(zi)結(jie)合(he)蛋(dan)白1(LTBP1)ELISA試劑(ji)盒(he) SP-A  大鼠(shu)肺(fei)表(biao)面活性物(wu)質(zhi)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白A 96T

NADPH oxidase 4： NADPH氧(yang)化(hua)酶4抗體 豚(tun)鼠(shu)心(xin)肌(ji)細胞;GP-H1

IL17A Protein Mouse 重組(zu)小鼠 IL17 / IL17A 蛋(dan)白 大鼠前心(xin)肽(tai)(Pro-ANP)ELISA試劑(ji)盒(he) DPD(Mouse deoxypyridinoline)  小鼠脫(tuo)氧(yang)酚(fen)/脫(tuo)氧(yang)啉(lin) 96T

FAD24： 脂肪(fang)細胞分化因(yin)子24 0.2ml

Rhesus antibody Rh GNRPX/PLEKHJ1 鳥核苷(gan)酸結(jie)合(he)蛋(dan)白X抗體 FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿狀病毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

EFNB2 Protein Canine 重組(zu)狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋(dan)白 (Fc 標簽(qian)) 人11去氫(qing)血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA 試劑(ji)盒(he) HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus 8) 人類皰(pao)疹(zhen)病毒8抗(kang)原 0.5mg

IDE： 胰(yi)島素降(jiang)解(jie)酶(mei)抗(kang)體(ti) PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)

人骨骼肌(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 人11β羥基類固醇脫(tuo)氫(qing)酶(mei)(11β-HSD)ELISA試劑(ji)盒(he) HIF-1Alpha 缺(que)氧(yang)誘(you)導(dao)因子1α 多肽(tai) 0.5mg

IKK beta： KB抑制(zhi)蛋(dan)白激酶β抗體 人腦血(xue)管(guan)平滑(hua)肌細胞(bao) 人肺(fei)癌細胞，NCI-H1703[H1703]細胞(bao) Hepa 1-6(肝(gan)癌細胞)

BST1 Others Rat 大鼠(shu) CD157 / BST1 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照) 人1,5-脫(tuo)水(shui)葡萄糖醇(chun)/1,5-脫(tuo)水(shui)山梨(1,5-AG)ELISA 試劑(ji)盒(he) histone H3-like protein 組蛋(dan)白H3樣(yang)蛋(dan)白多肽(tai) 0.5mg

STC-1小鼠小腸內分泌(mi)細胞(bao)內皮細胞生(sheng)長添加(jia)物(wu)ECGS 大(da)鼠β-血小板球(qiu)蛋(dan)白(βTG)ELISA試劑(ji)盒(he) GBM(Human glomerular basement membrane antibogy)  人抗腎(shen)小球(qiu)基底膜(mo)抗(kang)體 5637(人膀(pang)胱癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2

EB病毒轉(zhuan)化的人B淋巴細胞(bao);KMYB 人椎間盤(pan)髓核細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠β細胞素(βTC)ELISA試劑(ji)盒(he) BMG/ Beta2-MG(Human Beta2-microglobulin)  人β2微(wei)球(qiu)蛋(dan)白 96T

RGMA： 反義(yi)導(dao)向分(fen)子(zi)RGMA抗體(ti) CL-0327Calu-6(人肺(fei)退行(xing)性癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

hDPSCs, 人前磨(mo)牙(ya)牙髓幹(gan)細胞(bao) 大(da)鼠(shu)β細胞素(BTC)ELISA試劑(ji)盒(he) ANX- V (Human Annexin V )  人膜聯蛋(dan)白Ⅴ 96T

Repulsive Guidance Molecule B： 反義(yi)導(dao)向分(fen)子(zi)RGMB抗體(ti) FRZB Others Human 人 FRZB / sFRP-3 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對照)