SW620+luc人結直腸腺癌細胞+luc

公司(si)產品僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生長至(zhi)覆蓋培養瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱細(xi)胞用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後放入 37℃，5%CO2細胞

培養箱中培養；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長至(zhi)覆蓋培養瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放置於凍(dong)存(cun)管中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮中進(jin)行長期(qi)保存。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫盒可(ke)直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二(er)、細胞培養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下細胞培養凍(dong)存(cun)處理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體操作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨產品說明書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸液的凍(dong)存(cun)管在 37℃水(shui)浴中迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清液，加1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後將所(suo)有細胞懸液加入含(han)適(shi)量(liang)培養基的培養瓶中培養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液加入10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液並檢查細胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培養。

a、棄去(qu)培養上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使消(xiao)化(hua)液浸潤所(suo)有細胞，將培養瓶置於37℃培養箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情況(kuang)而(er)定），然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後裝入無(wu)菌(jun)離心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上(shang)清液，補加1-2 mL培養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞懸液按1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養基的新皿中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培養箱中培養。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細胞生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行細胞凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養液，裝入無(wu)菌(jun)離心管中，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細胞計(ji)數(shu)。

b、根據細(xi)胞數量(liang)加入無血清細胞凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液，註意凍(dong)存(cun)管做好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌(guan)儲存。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管位置以(yi)便(bian)下次(ci)拿取。

公(gong)司(si)正在(zai)出售(shou)的產品：

NETO1： 腦低(di)密(mi)度脂蛋白受(shou)體蛋白1抗體 EB病(bing)毒轉(zhuan)化的人B淋巴細(xi)胞;KM0501

IL10 Protein Feline 重(zhong)組貓(mao) IL10 / Ierleukin-10 蛋白 大鼠(shu)速激(ji)肽受(shou)體2(TACR2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 BMP-6  大鼠(shu)骨(gu)形(xing)成(cheng)蛋白6 96T

Neurexin 2： 軸突(tu)蛋白2抗體 PTPN2 Others Human 人(ren) PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao))

小鼠(shu)腸(chang)微(wei)血(xue)管(guan)細胞培養基 100mL 大鼠(shu)速激(ji)肽受(shou)體1(TACR1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IL-5(Mouse Interleukin 5)  小鼠(shu)白(bai)介(jie)素(su)5 96T

Nephrin： 腎小球(qiu)細胞粘附分(fen)子(zi)受(shou)體抗(kang)體 SAC-IIB2細(xi)胞，腹(fu)水(shui)瘤細(xi)胞 人結腸癌細胞,Colo320DM細胞 CM-H004人肺(fei)大靜(jing)脈內(nei)皮(pi)細胞培養基100mL

IFI6： 幹擾素(su)alpha誘(you)導(dao)蛋白6抗體 原代上(shang)皮(pi)細胞特制基(ji)礎培養基Many types of cells包裝：500/250/100ml

CXCL9 Protein Human 重(zhong)組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 人β細胞素(su)(BTC) ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PGRN (progranulin) 顆粒(li)蛋白前(qian)體抗(kang)原 0.5mg

IL-17E/IL-25： 白介(jie)素(su)-17E抗(kang)體 WARS Others Human 人(ren) WARS / pRS 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao))

人卵(luan)巢微(wei)血(xue)管(guan)內(nei)皮(pi)細胞培養基 100mL 人(ren)β神(shen)經(jing)生長因子(β-NGF)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PHB(Prohibitin) 抑(yi)制素(su)/抑(yi)制因(yin)子抗原 0.5mg

phospho-IRS-1(Ser307)： 0酸化(hua)胰(yi)島(dao)素(su)受(shou)體底(di)物(wu)p-IRS-1/2抗體 恒河(he)猴腎細(xi)胞;MMK3 人淋(lin)巴(ba)樣(yang)Butt淋(lin)巴瘤細(xi)胞，EB-3[EB3]細胞 TE-11(食管(guan)癌細胞)

SW620+luc人結直腸腺癌細胞+lucCL-0281HELF(人胚(pei)肺成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠(shu)表(biao)皮(pi)調節(jie)素(su)(EREG)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PFKP(Human phosphofructokinase-platelet)  人(ren)血小板型0酸果糖激酶(mei) 96T

RNF47： 環指(zhi)蛋白47抗體 FGF9 Others Human 人(ren) FGF9 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao))

人結膜(mo)成纖(xian)維細(xi)胞cDNAHConF cDNA 大鼠(shu)表(biao)皮(pi)生長因子受(shou)體2(Her2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase)  人(ren)尿苷二(er)0酸葡(pu)萄(tao)糖神經(jing)酰胺葡萄糖基轉(zhuan)移酶 96T

ROM1： 視網(wang)膜(mo)感光(guang)細(xi)胞外節(jie)膜(mo)蛋白1抗體 非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴腎細(xi)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

人幹細胞因子(zi)單克(ke)隆(long)抗體細(xi)胞株;AMS2(SCF3) 人(ren)子(zi)宮頸(jing)上(shang)皮(pi)細胞培養基 100mL 大鼠(shu)表(biao)皮(pi)生長因子受(shou)體2(EGFR2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase)  人(ren)雕亡(wang)相(xiang)關半胱酸肽(tai)酶4 96T

三、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是否(fou)完好(hao)，培養液是否(fou)有漏(lou)液、渾濁等現象(xiang)，若有上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生請及時和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱讀細胞說明書，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信息(xi)，如細胞形態(tai)、所(suo)用培養基、血(xue)清比例、所(suo)需 細(xi)胞因子(zi)等，確保細胞培養條(tiao)件壹(yi)致，若由於培養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而(er)導(dao)致細胞出現問(wen)題，責任由 客戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於溫度 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養基重(zhong)懸 細胞，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的培養瓶或(huo)培養皿中，置於培養箱中進(jin)行培養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培養基用(yong)於細(xi)胞培養。

6. 建議(yi)客戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀態(tai)，便(bian)於和(he)我司(si)技術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的原因，個別敏(min)感細(xi)胞會(hui)出現不(bu)穩(wen)定的情況，請及時和(he)我們(men)聯(lian)系，告知細(xi)胞 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的技術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至(zhi)問(wen)題解決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的培養基 (灌(guan)液培養基) 不(bu)能再用(yong)來(lai)培養細胞，請換用(yong)按照(zhao)說明書細(xi)胞培 養條(tiao)件新(xin)配制的培養基來(lai)培養細胞。     收到(dao)細(xi)胞後第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。