SW620+GFP人(ren)結直腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)+GFP

公司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化，再輕輕(qing)吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進(jin)行(xing)分瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於凍存管中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存管放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中進(jin)行(xing)長期保存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存處理(li)僅供(gong)參(can)考，具體操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消化液浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化。輕輕打勻後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶為例；a、收集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存管做(zuo)好(hao)標識。將凍存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌儲(chu)存。記(ji)錄凍存管位(wei)置以便(bian)下次拿取(qu)。

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問題，部分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及劇(ju)烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎形成(cheng)碎片，是(shi)正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我司(si)技術部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的情況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體情況，以便(bian)我們(men)的(de)技術人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再用來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司(si)正在(zai)出售(shou)的(de)產(chan)品：

NG2： 黑色素(su)瘤(liu)軟(ruan)骨(gu)素蛋白(bai)多(duo)糖4抗體(ti) 大(da)鼠肝細(xi)胞(bao)瘤(liu);H4-II-E-C3

SK-CO-1(人(ren)結直腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 LoVo(人(ren)結腸癌(ai)細(xi)胞(bao)) 大(da)鼠松弛(chi)肽/松弛(chi)素(RLN)ELISA試劑(ji)盒 HGF(Human hepatocyte growth factor)  人肝細(xi)胞(bao)生長因(yin)子 96T

NDST1： NDST1蛋白(bai)抗體(ti) EB病(bing)毒轉(zhuan)化的人B淋巴(ba)細(xi)胞(bao)(傣(dai)族);KM9405

IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重(zhong)組野(ye)豬(zhu) IL10 / Ierleukin-10 蛋白(bai) 大(da)鼠死亡(wang)誘導(dao)終(zhong)結因子(zi)1(DIDO1)ELISA試劑(ji)盒 M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor)  小鼠巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)集(ji)落刺(ci)激(ji)因(yin)子(zi) 96T

NAB2： EGR1結合蛋白(bai)2抗體(ti) MDK Others Human 人(ren) Midkine / MDK 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

IFIT3： 幹(gan)擾素(su)誘導(dao)的(de)三角(jiao)形(xing)四肽(tai)重(zhong)復蛋白(bai)3抗體(ti) 人(ren)骨(gu)肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞(bao);HOS

RWPE1(人前列(lie)腺上(shang)皮細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人(ren) SMR3B 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 人(ren)β葡萄(tao)糖酸(suan)苷酶(βGD)ELISA 試劑(ji)盒 Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多(duo)囊腎蛋白(bai)1抗原(yuan) 0.5mg

IFIT5： 幹(gan)擾素(su)誘導(dao)的(de)三角(jiao)形(xing)四肽(tai)重(zhong)復蛋白(bai)5抗體(ti) 原(yuan)代滑膜(mo)皮(pi)細(xi)胞(bao)特制基礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)Many types of cells包(bao)裝：500/250/100

CXCL9 Protein Mouse 重(zhong)組小(xiao)鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白(bai) 人β葡(pu)糖(tang)苷(gan)酶(β-glucosidase)ELISA 試劑(ji)盒 Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多(duo)囊腎蛋白(bai)2抗體(ti) FUT8 Others Hamster 倉(cang)鼠 FUT8 (aa 68-575) 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

人(ren)子(zi)宮(gong)內膜(mo)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人(ren)β內酰胺酶抑制(zhi)劑(ji)(BLI)ELISA 試劑(ji)盒 phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 0酸(suan)化蛋白(bai)激(ji)酶B抗原(yuan)(絲(si)酸(suan)0酸(suan)化位點：473) 0.5mg

SW620+GFP人(ren)結直腸(chang)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)+GFPIL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠表皮生長因(yin)子(EGF)ELISA 試劑(ji)盒 SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2)  人血(xue)清/糖(tang)皮(pi)質激(ji)素(su)調(tiao)節(jie)激(ji)酶2 96T

RNF122： 環指(zhi)蛋白(bai)122抗體(ti) 615小(xiao)鼠T細(xi)胞(bao)性(xing)白(bai)血(xue)病(bing)瘤(liu)株(zhu);L7712

CL-0271D283 Med(人腦髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠表面活性(xing)物(wu)質(zhi)關(guan)聯(lian)蛋白(bai)J(SPJ)ELISA試劑(ji)盒 MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6)  人原活(huo)化蛋白(bai)激(ji)酶激(ji)酶6 96T

RRAGC： RAS相關GTP結合蛋白(bai)C抗體(ti) FN1 Others Human 人(ren) Fibronectin / Fibronectin Fragme 2 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

人(ren)心(xin)臟(zang)成(cheng)纖維細(xi)胞(bao)cDNAHCF cDNA 大(da)鼠表面活性(xing)物(wu)質(zhi)關(guan)聯(lian)蛋白(bai)D(SPD)ELISA試劑(ji)盒 PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase)  人吡哆(duo)醛/吡哆(duo)醇維生素B60酸(suan)酶 96T