T98G 人(ren)膠(jiao)質(zhi)母細(xi)胞(bao)瘤(liu)

公司(si)產品僅供(gong)科研研究(jiu)使用、不得用於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶傳代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期(qi)保存(cun)。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養凍存處理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混合均勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培養基(ji)的培養瓶中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去培養上清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大部分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終止消(xiao)化。輕輕打勻後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含8 mL培養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可進行細(xi)胞(bao)凍存。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存。記錄凍存管(guan)位置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售(shou)的產品：

phospho-NHE3(Ser552)： 0酸化離子(zi)/氫(qing)離(li)子交(jiao)換蛋(dan)白3抗體(ti) P3X63Ag8.653細(xi)胞(bao)，骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 耐(nai)長(chang)春新堿(jian)結腸(chang)癌(ai)細(xi)胞(bao)系(xi),HCT-8/VCR細(xi)胞(bao) CM-H028人(ren)淋巴血管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(bao)培養基(ji)100mL

TDGF1 Others Rat 大鼠(shu) Cripto / TDGF1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)水(shui)通(tong)道(dao)蛋(dan)白2(AQP-2)ELISA試劑(ji)盒 MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta)  小(xiao)鼠(shu)巨噬(shi)細(xi)胞(bao)炎性蛋(dan)白3β 96T

NPTX2： 神(shen)經(jing)細(xi)胞(bao)穿(chuan)透(tou)素2抗體(ti) 口腔(qiang)角(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao)培養基(ji)OKM-prf

MLTC-1小(xiao)鼠(shu)間質(zhi)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) MLTC-1 mouse Leydig cell tumor RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)水(shui)通(tong)道(dao)蛋(dan)白2(AQP-2) ELISA 試劑(ji)盒 Human fractalkine/CX3CL1  人(ren)趨(qu)化因(yin)子(zi) 96T

Neprilysin 2： 腦(nao)啡肽(tai)酶(mei)2抗體(ti) REG3A Others Mouse 小鼠(shu) REG3A 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

CD48 Others Rat 大鼠(shu) CD48 / SLAMF2 / BCM1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 人(ren)β半乳(ru)糖(tang)苷(gan)酶(mei)(βGAL)ELISA 試劑(ji)盒 Parvalbumin 微白蛋(dan)白/細(xi)小(xiao)清(qing)蛋(dan)白抗原(yuan) 0.5mg

IFN-Alpha： 幹(gan)擾(rao)素α抗體(ti) 恒河(he)猴皮膚細(xi)胞(bao);RM-S1

EL4細(xi)胞(bao)，小(xiao)鼠(shu)淋巴瘤(liu)細(xi)胞(bao) 3T3-Swiss albino(胚(pei)胎成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)) 人(ren)肺轉化細(xi)胞(bao);AE1201 人(ren)β2整(zheng)合素(su)(iegrin β2/CD11+CD18)ELISA 試劑(ji)盒 Peptide YY 酪(lao)酪(lao)肽(tai)多(duo)肽(tai)(1-36) 0.5mg

IL-17F： 白(bai)介(jie)素-17F抗體(ti) ULBP1 Others Human 人(ren) ULBP1 / RAET1 / N2DL1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人(ren)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao);293 Cells, low passage 人(ren)β2微球蛋(dan)白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑(ji)盒 Rad51 Rad51抗原(yuan) 0.5mg

T98G 人(ren)膠(jiao)質(zhi)母細(xi)胞(bao)瘤(liu)人(ren)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao)(亞(ya)系(xi)克隆(long));FIP293 人(ren)腎(shen)管(guan)狀(zhuang)上皮細(xi)胞(bao)培養基(ji) 100mL 大鼠(shu)半乳(ru)糖(tang)-1-0酸尿(niao)苷(gan)酰轉移酶(mei)(GALT)ELISA試劑(ji)盒 AP(Human Aprotinin)  人(ren) 96T

RILPL2： Rab溶(rong)酶(mei)體(ti)相互作(zuo)用蛋(dan)白樣2抗體(ti) WM451, 人(ren)黑色(se)素(su)瘤(liu)細(xi)胞(bao)

rCF, 大鼠(shu)心臟(zang)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)半乳(ru)凝(ning)素(su)8(GAL8)ELISA試劑(ji)盒 Casp-12(Human Caspase 12)  人(ren)胱天(tian)蛋(dan)白酶(mei)12 96T

RITA： 12號染色(se)體(ti)開(kai)放(fang)閱讀(du)框(kuang)52抗體(ti) IL11RA Others Canine 狗(gou) IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

3T3?L1 小(xiao)鼠(shu)脂(zhi)肪(fang)細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)半乳(ru)凝(ning)素(su)4(GAL4)ELISA試劑(ji)盒 PKA(Human Protein kinase A)  人(ren)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)A 96T

三(san)、培養註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完好，培養液(ye)是(shi)否有(you)漏液(ye)、渾濁等(deng)現象(xiang)，若有(you)上述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時(shi)和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養基(ji)、血清(qing)比(bi)例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若由於培養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題，責任由 客(ke)戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部分細(xi)胞(bao)由(you)於溫度(du) 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到(dao)新的(de)培養瓶或培養皿中(zhong)，置於培養箱(xiang)中(zhong)進行培養。

5. 請客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件的(de)培養基(ji)用於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我司(si)技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於運(yun)輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請及時(shi)和我們(men)聯系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技術人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不能再(zai)用來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請換用按照說明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。