TE-1人食管(guan)癌細胞

公司產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研研究使用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液，用 PBS 清洗細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液終止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈澱細胞用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液，用 PBS 清洗細胞壹次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養(yang)液終

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將細胞凍存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保存(cun)。使(shi)用程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹：

二(er)、細胞培養(yang)操作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心3 min，棄去(qu)上清液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所有(you)細胞懸液加入(ru)含(han)適(shi)量培養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細胞懸液加入(ru)10 cm皿中，加入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液並檢(jian)查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細胞情況而定），然後在(zai)顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞消化情況，若細胞大部分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回操作臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將細胞懸液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進行(xing)細胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞及(ji)細胞培養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心4 min，棄去(qu)上清液，用PBS清洗壹遍，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細胞計數。

b、根據(ju)細胞數量加入(ru)無(wu)血清細胞凍存(cun)液，使細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的產(chan)品：

木(mu)瓜蛋白酶(含(han)100mL酶解緩沖(chong)液) 10mL 大鼠(shu)/離子轉(zhuan)運(yun)ATP酶β1肽(tai)(ATP1β1)ELISA試劑盒(he) Lp- Alpha  大鼠(shu)脂蛋白α 96T

NKAP： NFKB激(ji)活(huo)蛋白抗(kang)體 NK-92細胞，人惡性非霍奇金淋巴(ba)瘤患(huan)者(zhe)的(de)自(zi)然(ran)殺(sha)傷細胞 人肝癌細胞系,Hep-3B細胞 CL-0184PANC-1(人胰(yi)腺(xian)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

VCL Others Human 人(ren) VCL / Vinculin 人(ren)細胞裂解液 (陽性對照(zhao)) 大鼠(shu)/離子轉(zhuan)運(yun)ATP酶α1肽(tai)(ATP1α1)ELISA試劑盒(he) TFR/CD71(Human transferrin receptor)  人(ren)轉(zhuan)鐵蛋白受體(ti) 96T

NLE1： NLE1蛋白抗(kang)體 晶狀體(ti)上皮(pi)細胞Many types of cells包裝：5 × 105次(ci)方(1ml)

BEL-7402人(ren)肝癌細胞 BEL-7402 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS 大鼠(shu)母(mu)系(xi)胚(pei)胎亮(liang)酸(suan)拉(la)鏈蛋白激(ji)酶(MELK)ELISA試劑盒(he) EL(Mouse Endothelial lipase)  小(xiao)鼠(shu)內(nei)皮(pi)脂肪(fang)酶 96T

CRT(人(ren)神(shen)經(jing)膠(jiao)質(zhi)瘤細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 腸(chang)靜(jing)脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞Many types of cells包裝：5 × 105次(ci)方(1ml) 雞孕(yun)酮(PROG)ELISA試劑盒(he) Estrogen receptor beta 雌(ci)激(ji)素(su)受體(ti)(多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

KLHL8： Kelch樣(yang)蛋白8抗(kang)體 CL-0437SF763(人(ren)腦(nao)瘤細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

EFNA3 Protein Human 重組人(ren) Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian)) 雞孕(yun)激(ji)素(su)/孕(yun)酮(PROG)ELISA試劑盒(he) ER-Alpha/Beta 雌(ci)激(ji)素(su)受體(ti) 0.5mg

KCNQ2： 離(li)子通道(dao)蛋白家族KCNQ2抗(kang)體(ti) PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲細胞裂解液 (陽性對照(zhao))

人(ren)晶狀體(ti)上皮(pi)細胞培養(yang)基(ji) 100mL 雞乙(yi)酰乙(yi)酸(suan)檢測(ACAC)ELISA 試劑盒(he) Recombinant EGFP protein 重組增(zeng)強(qiang)型綠(lv)色熒(ying)光(guang) 100ug

TE-1人(ren)食(shi)管(guan)癌細胞SFRP1： 分(fen)泌型卷曲相關(guan)蛋白1抗(kang)體 HL-60細胞，早幼粒(li)急(ji)性白血(xue)病細胞系 人T細胞淋巴(ba)瘤,Hurt-78細胞 小鼠(shu)誘導性多潛能幹細胞;PUMC-mips-C2

HA Others H1N1 甲(jia)型流(liu)感(gan) H1N1 (A/England/195/2009) 血凝(ning)素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照(zhao)) 大鼠(shu)E選擇(ze)素(su)(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒(he) VE(Human Vitamin E) E 人(ren) 96T

SORBS2： 精(jing)酸(suan)結(jie)合(he)蛋白2抗(kang)體 中(zhong)國倉鼠(shu)卵巢細胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr

CM-H091人(ren)大隱靜(jing)脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞培養(yang)基(ji)100mL 大鼠(shu)E選擇(ze)素(su)(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒(he) VA(Human Vitamin A)  人(ren) 96T

SLC30A3： 溶(rong)質(zhi)載(zai)體(ti)鋅(xin)轉(zhuan)運(yun)3抗(kang)體(ti) CTSA Others Human 人 Cathepsin-A / CTSA 人細胞裂解液 (陽性對照(zhao))

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明書，了解細胞相關(guan)信(xin)息，如細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血(xue)清比例、所(suo)需 細胞因(yin)子等，確(que)保細胞培養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條件不(bu)壹(yi)致而(er)導致(zhi)細胞出現問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分(fen)細胞由於(yu)溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈碰亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞可以(yi)消化，懸浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細胞，並接(jie)種到新的(de)培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞後前(qian) 3 天各拍幾張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便於(yu)和我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩(wen)定的情況，請及(ji)時(shi)和我們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細胞 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便我們(men)的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不(bu)能再用來(lai)培養(yang)細胞，請換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書細胞培 養(yang)條件新配(pei)制的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞。     收(shou)到細胞後第壹(yi)次(ci)傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。