TC-1小(xiao)鼠(shu)肺上皮細(xi)胞

公(gong)司產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹：

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養

液(ye)終止消化，再(zai)輕輕(qing)吹打細(xi)胞使(shi)之脫落，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比例進行分(fen)瓶傳(chuan)代，最後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱中培養；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入培養液(ye)終

止消化，輕(qing)輕吹打細(xi)胞使(shi)之脫落，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞，並放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將細(xi)胞凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中進行長期(qi)保存。使(shi)用程序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二、細(xi)胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨貨產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基混(hun)合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養基後吹勻。然後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入含適(shi)量(liang)培養基的培養瓶中培養過(guo)夜（或將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿中，加入約(yue)8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培養瓶置(zhi)於37℃培(pei)養箱中消化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然後在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並脫落，迅速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕敲幾下(xia)培養瓶後加2-3ml培養基終止消化。輕(qing)輕打(da)勻後裝入無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後吹勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培養基的新皿(min)中或者瓶中，置(zhi)於培(pei)養箱中培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態良好(hao)時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養液(ye)，裝入無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數。

b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量加入無血清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲存。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取(qu)。

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培養液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱讀細(xi)胞說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培(pei)養基、血清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等，確保細(xi)胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由(you)於培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於溫(wen)度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成碎片(pian)，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精消毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培養基重懸(xuan) 細(xi)胞，並接種到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養箱中進行培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養基用於細(xi)胞培(pei)養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感細(xi)胞會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系，告知細(xi)胞 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪(fang)直至問題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培養細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新配制的培養基來(lai)培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公(gong)司正在出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

豬(zhu)腎傳(chuan)代細(xi)胞;IBRS-2 大(da)鼠(shu)/葡(pu)萄(tao)糖協(xie)同(tong)轉(zhuan)運蛋白(bai)2(SGLT2)ELISA試(shi)劑盒(he) HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha)  人(ren)低(di)氧(yang)誘(you)導(dao)因(yin)子1α 96T

NOB1： RNA結(jie)合(he)蛋白NOB1抗(kang)體(ti) 中國倉鼠(shu)卵(luan)巢細(xi)胞;CTLA4 Ig-24

人(ren)結(jie)腸(chang)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大(da)鼠(shu)淋(lin)巴成纖維細(xi)胞 Rattus 大(da)鼠(shu)/離(li)子轉(zhuan)運ATP酶β4肽(tai)(ATP1β4)ELISA試(shi)劑盒(he) MC Ab(Human melanocyte antibody)  人(ren)黑(hei)色素細(xi)胞抗(kang)體 人(ren)腎(shen)透明(ming)細(xi)胞癌(ai);Caki-1

IL34 Protein Mouse 重(zhong)組小(xiao)鼠(shu) IL-34 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian)) 大鼠(shu)/離(li)子轉(zhuan)運ATP酶β3肽(tai)(ATP1β3)ELISA試(shi)劑盒(he) HMGB-1(Mouse High mobility group protein B1)  小(xiao)鼠(shu)高(gao)遷移(yi)率族蛋(dan)白(bai)B1 96T

NR1H4： 膽(dan)汁酸(suan)受(shou)體(ti)抗(kang)體(ti) IGF2BP2 Others Human 人(ren) IGF2BP2 / IMP2 / p62 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

Kir4.1： 細(xi)胞內(nei)流(liu)通(tong)道(dao)蛋白(bai)Kir4.1抗(kang)體(ti) 人(ren)B淋(lin)巴細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞;RAMOS

NRK細(xi)胞，大(da)鼠(shu)腎(shen)小(xiao)管上(shang)皮(pi)細(xi)胞 PT-67(病(bing)毒轉(zhuan)染小(xiao)鼠(shu)細(xi)胞) 豬(zhu)腎細(xi)胞;PK(15) 雞(ji)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相(xiang)關(guan)雕(diao)亡(wang)誘(you)導(dao)配體(ti)3(AIL-R3)ELISA 試劑盒(he) ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮(pi)生(sheng)長(chang)因子受(shou)體(ti)3(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

KIRREL3： 樣(yang)蛋白(bai)3抗體(ti) SMYD3 Others Human 人(ren) SMYD3 / ZMYND1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

人(ren)脊(ji)髓星(xing)形(xing)膠質(zhi)細(xi)胞裂(lie)解(jie)物(wu)HA-sp L 雞(ji)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子α(TNF-α)ELISA試劑盒(he) ER-Alpha 雌激(ji)素受(shou)體(ti) 0.5mg

KLF7： KLF樣(yang)轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子7抗體(ti) 人(ren)細(xi)胞;Hela P10s-11F

TC-1小(xiao)鼠(shu)肺上皮細(xi)胞人(ren)癌(ai)細(xi)胞;MDA-MB-231 人(ren)視(shi)網膜色素上(shang)皮(pi)細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大鼠(shu)FMS樣(yang)酪酸(suan)激酶(mei)3(Flt3)ELISA 試(shi)劑盒(he) VB12(Human Vitamin B12)  人(ren)維(wei)生素B12 96T

Phospho-SGK1 (Ser78)： 0酸(suan)化糖(tang)皮(pi)質激素調節激酶1抗體(ti) CL-0069COS-7(非(fei)洲(zhou)綠猴SV40轉(zhuan)化的(de)腎細(xi)胞)5×106cells/瓶×2

GH3, 大(da)鼠(shu)垂(chui)體(ti)生(sheng)長(chang)激(ji)素腺(xian)瘤(liu) 大鼠(shu)FK506結(jie)合(he)蛋白12-雷(lei)帕黴素相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)1(FRAP1)ELISA試劑盒(he) VD3(Human Vitamin D3)  人(ren)維(wei)生3 96T

Phospho-SGK1 (Ser422)： 0酸(suan)化糖(tang)皮(pi)質激素調節激酶1抗體(ti) GPHA2 Others Human 人(ren) GPHA2 / Glycoprotein hormone alpha 2 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

KMB 人(ren)胚(pei)肺成纖維樣(yang)細(xi)胞 大(da)鼠(shu)E選擇素(SELE)ELISA試(shi)劑盒(he) VD2(Human Vitamin D2)  人(ren)維(wei)生2 96T