TM3小鼠(shu)睪丸間(jian)質細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅供科(ke)研研究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷！

壹(yi)、商品(pin)介紹(shao)：

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回縮變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落，然後將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按 1:2 比例(li)進行(xing)分瓶(ping)傳代，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養箱(xiang)中培養；

2、細胞凍存：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞回縮變圓後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使之脫落，然後將(jiang)懸液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管中；

4）先將(jiang)細胞凍存管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中進行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使用(yong)程序(xu)

降溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培養操作

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培養凍存處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主。將含有1 mL細胞懸液(ye)的凍存管在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍，加4 mL培養基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有細胞懸液(ye)加入(ru)含適量(liang)培養基的(de)培養瓶(ping)中培養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基，培養過夜）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢查(zha)細胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培養上清，用(yong)不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞，將培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而(er)定(ding)），然後在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大部分變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後加2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培養液(ye)後吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸液(ye)按1:2比例(li)分到新(xin)的(de)含8 mL培養基的(de)新(xin)皿中或者瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中培養。 3) 細胞凍存：待細胞生(sheng)長狀態良(liang)好時，可進行(xing)細(xi)胞凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細(xi)胞及細胞培養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞凍存液(ye)，使細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細胞懸液(ye)，註意凍存管做好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存管位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。

三、培養註意事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞後首(shou)先觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是(shi)否完好，培養液(ye)是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾濁等現象，若(ruo)有上述(shu)現象 發生(sheng)請(qing)及時和我們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞相關(guan)信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形態、所用(yong)培養基、血清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞因(yin)子(zi)等，確(que)保(bao)細(xi)胞培養條件壹致，若由(you)於(yu)培養條件不壹致而導(dao)致細胞出現問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分細胞由(you)於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成碎片，是(shi)正(zheng)常現象。觀(guan)察(cha)好細胞狀態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細胞直接混(hun)勻(yun)收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培養基重(zhong)懸 細胞，並接種(zhong)到(dao)新的培養瓶(ping)或培養皿中，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相同(tong)條件的培養基用(yong)於(yu)細胞培養。

6. 建議客(ke)戶收到細(xi)胞後前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態，便於(yu)和我司(si)技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流。由(you)於(yu)運輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞會(hui)出現不穩(wen)定的(de)情(qing)況，請(qing)及時和我們聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體情(qing)況，以(yi)便我們的技術(shu)人員跟蹤回訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細胞僅供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的(de)培養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不(bu)能再用(yong)來培養細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照說明書(shu)細(xi)胞培 養條件新配(pei)制的培養基來培養細胞。     收到細(xi)胞後第壹次(ci)傳代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售(shou)的(de)產品：

IL13 Protein Cynomolgus 重(zhong)組食(shi)蟹猴 IL13 / ALRH 蛋(dan)白(bai) 大鼠末(mo)端(duan)補體復合物(wu)C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒(he) CA(Mouse carbonic anhydrase)  小鼠(shu)酶 96T

Orexin A： 增(zeng)食(shi)欲(yu)素A/欲(yu)激素A抗體 GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿(gan)狀病毒-昆蟲細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

(含10mL酶解(jie)緩(huan)沖(chong)液(ye)) 1mL 大鼠末(mo)端(duan)補體復合物(wu)C5b-9(C5b-9)ELISA試劑盒(he) P53(Human p53/tumor protein)  人P53 96T

Orexin A： 增(zeng)食(shi)欲(yu)素A/欲(yu)激素A抗體 NK-92MI細胞，人惡(e)性(xing)非(fei)霍奇金(jin)淋巴(ba)瘤患(huan)者的自然殺(sha)傷細(xi)胞 表達(da)HBV病毒(du)的人肝細胞,HepG2.2.15細胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜(shi)堿性(xing)細胞白(bai)血病(bing)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2

IL1RAPL1 Others Mouse 小(xiao)鼠 IL-1R8 / IL1RAPL1 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠末(mo)端(duan)補體復合體C5b-9(C5b-9)ELISA試劑盒(he) Human Cyclin-D3  人細胞周期3 96T

人小腦(nao)顆粒細胞裂解(jie)物(wu)HCGCL 雞(ji)胰島(dao)素(Insulin)ELISA試劑盒(he) Fibrinogen from bovine plasma 纖(xian)維蛋(dan)白(bai)原 1mg

KIF1A： 微(wei)管驅動蛋白(bai)家(jia)族成員(yuan)1A抗體 人細胞;Hela S3 [HeLaS3]

D283 Med(人腦(nao)髓母細胞瘤細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 腸粘膜上(shang)皮細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105次(ci)方(1ml) 雞(ji)腺嘌呤二核(he)苷(gan)酸(suan)0酸(NADPH)ELISA 試劑盒(he) factor VIII第八因(yin)子(zi)相關(guan)抗原 0.5mg

KCNE1： 離(li)子(zi)通(tong)道蛋白(bai)家(jia)族成員(yuan)1抗體 CL-0429Romas(人淋巴瘤(liu)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2

EFNB2 Protein Human 重(zhong)組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白(bai) (His & Fc 標(biao)簽) 雞(ji)血小(xiao)板因(yin)子(zi)4(PF-4/CXCL4)ELISA 試(shi)劑盒(he) FASN/Fatty Acid Synthase 1 脂肪(fang)酸(suan)合成(cheng)酶 0.5mg

TM3小(xiao)鼠睪丸間(jian)質細(xi)胞SUPT16H： 染色體特異(yi)性(xing)轉錄(lu)延(yan)伸因(yin)子(zi)抗(kang)體 KCT2 Others Human 人 KCT2 / C5orf15 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

KMB17 人胚(pei)肺成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞 大鼠Endoglin蛋(dan)白(bai)(ENG)ELISA試劑盒(he) SE(Human staphylococcus aureus enterotoxins)  人金(jin)葡菌(jun)腸毒(du)素 96T

KIAA1598： 閱(yue)讀(du)障礙相關(guan)蛋白(bai)Shootin抗體 A431細胞，表皮癌(ai)細(xi)胞系 人T淋巴細(xi)胞系,H9細(xi)胞 tTA基因(yin)修(xiu)飾的(de)小(xiao)鼠(shu)畸(ji)胎(tai)瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3

HA Others H1N1 甲(jia)型流感 H1N1 (A/England/195/2009) HA 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠E1A結(jie)合蛋(dan)白(bai)P300(EP300)ELISA試劑盒(he) CNX(Human calnexin)  人鈣聯蛋白(bai) 96T

Separase： 外(wai)紡(fang)錘體極樣蛋(dan)白(bai)1抗體 中國倉鼠卵(luan)巢細(xi)胞(亞(ya)系克(ke)隆(long));CHO-HCV-NS4B