SAOS-2人(ren)成骨肉(rou)瘤細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入 5ml 培養(yang)

液終止消(xiao)化，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然後按 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶傳代(dai)，最後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中培養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入培養(yang)液終

止消(xiao)化，輕(qing)輕吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮中進(jin)行長期保存(cun)。使用(yong)程序

降溫盒可(ke)直(zhi)接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書(shu)為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴中迅速(su)搖晃解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加入含(han)適(shi)量培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液加入10 cm皿(min)中，加入約8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶置於37℃培養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基終止消(xiao)化。輕(qing)輕打勻(yun)後裝入無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液按1:2比例(li)分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的(de)新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集細胞(bao)及細胞(bao)培養(yang)液，裝入無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻，每支(zhi)凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管做好標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌儲存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位置以(yi)便(bian)下次(ci)拿取。

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)首先觀察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好，培養(yang)液是(shi)否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解細(xi)胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確保(bao)細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由於培養(yang)條(tiao)件不壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部分細胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎形成碎片，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置於 37℃培養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞(bao)直(zhi)接混勻收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿中，置於培養(yang)箱中進(jin)行培養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相同(tong)條(tiao)件的(de)培養(yang)基用(yong)於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到細胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我(wo)司(si)技術部溝通 交流。由於運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩(wen)定的(de)情況(kuang)，請(qing)及時和我(wo)們(men)聯系(xi)，告知細胞(bao) 的(de)具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們(men)的(de)技術人員跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不能再(zai)用來(lai)培養(yang)細胞(bao)，請(qing)換用按照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制(zhi)的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。

公司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品：

FaDu人咽(yan)鱗癌細(xi)胞(bao) FaDu human pharyngeal squamous cell carcinoma MEM(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠Ⅸ(F9)ELISA試劑(ji)盒(he) Hpt/HP  大鼠結合(he)珠蛋白(bai)/觸(chu)珠蛋白(bai) 96T

CDCA1： 細胞(bao)分裂周期相關(guan)蛋白(bai)1抗體 IL1RAPL1 Others Human 人(ren) IL1R8 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

CM-H027人淋(lin)巴(ba)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)培養(yang)基100mL 大(da)鼠Ⅷ相關(guan)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Human H-ras  人H-ras 96T

NFAM1： NFAM1抗體 敘利(li)亞(ya)倉鼠腎細(xi)胞(bao);BHK-21

人人(ren)(HEK-a) ( 5×105 ) 小鼠成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)(EGFP標(biao)記) Mouse 大鼠Ⅷ相關(guan)抗原(FⅧ-Ag)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Alpha1-AGP  大鼠α1酸性(xing)糖蛋白(bai) 96T

JWA： JWA蛋白(bai)抗體 人(ren)類原巨(ju)核細胞(bao)型白(bai)血病(bing)細胞(bao);UT-7

801-D (人巨(ju)細(xi)胞(bao)性(xing)肺(fei)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞(bao);145-2C11 牛(niu)乙酰乙酸檢測(ce)(ACAC)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) PIBF(progesterone induced blocking factor) 孕激素(su)誘(you)導阻(zu)斷(duan)因(yin)子(zi)(抗原) 0.5mg

Junctophilin 3： 連接蛋白(bai)JPH3抗體 SP2/0, 小鼠骨髓(sui)瘤細胞(bao)

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白(bai) (Fc 標簽(qian)) 牛乙酰羧(suo)化酶(mei)(ACC)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PIWIL1(piwi-like 1) piwi 樣1蛋白(bai)(抗原) 0.5mg

JAMC： 連接粘附分子C抗體 EPHB1 Others Human 人(ren) EphB1 / EPHT2 (aa 565-984) 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

SAOS-2人成(cheng)骨肉(rou)瘤細胞(bao)RNF165： 環(huan)指蛋白(bai)165抗體 BACE1 Others Human 人(ren) BACE1 / ASP2 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

周邊(bian)細(xi)胞(bao)培養(yang)基PM 大(da)鼠V-Myc骨髓(sui)細胞(bao)瘤病毒(du)癌(ai)基(ji)因同(tong)源(yuan)物(wu)(MYC)ELISA試劑(ji)盒(he) Ifi205(Human interferon activated gene 205)  人幹擾(rao)素(su)活(huo)化基(ji)因205 96T

RNF186： 環(huan)指蛋白(bai)186抗體 A-431(人(ren)表皮癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2

EB病毒(du)轉(zhuan)化的(de)人B淋巴(ba)細胞(bao);KMY0920 人(ren)皮膚(fu)肥大(da)細(xi)胞(bao)培養(yang)基 100mL 大(da)鼠V-Jun肉(rou)瘤病毒(du)癌(ai)基(ji)因同(tong)源(yuan)物(wu)(JUN)ELISA試劑(ji)盒(he) H2-K1(Human Histocompatibility 2-K1-K region)  人組織相容(rong)性2-K1-K 區 96T

RYBP： 雕亡(wang)相關(guan)蛋白(bai)1抗體 CL-0221SVEC4-10(小鼠淋巴(ba)結內皮(pi)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2