酶(mei)ELISA試劑盒(he)樣本(ben)處理(li)及要求：

1. 血(xue)清：室溫血(xue)液自(zi)然凝固10-20分鐘(zhong)，離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。
仔(zai)細(xi)收集上(shang)清，保存(cun)過程(cheng)中如(ru)出現(xian)沈澱(dian)，應再(zai)次離(li)心。

2. 血(xue)漿：應(ying)根據(ju)標本(ben)的要求選(xuan)擇(ze)EDTA或(huo)檸檬酸鈉作(zuo)為抗(kang)凝劑(ji)，混合(he)10-20分鐘(zhong)後(hou)，離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清，保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應該(gai)再次離(li)心。

3. 尿(niao)液：用無(wu)菌管(guan)收集，離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清，保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應再(zai)次離(li)心。胸(xiong)腹水(shui)、腦(nao)脊液參照實(shi)行。

4. 細胞培(pei)養(yang)上(shang)清：檢測分泌(mi)性(xing)的(de)成(cheng)份時，用無(wu)菌管(guan)收集。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清。檢測細胞內的(de)成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀(xi)釋細胞懸液(ye)，細(xi)胞濃度(du)達(da)到100萬/ml左(zuo)右(you)。通(tong)過(guo)反復凍(dong)融，以(yi)使細胞破壞並放(fang)出(chu)細胞內成(cheng)份。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清。保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應再(zai)次離(li)心。

5. 組(zu)織標本(ben)：切割(ge)標本(ben)後，稱取重量。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS，PH7.4。用液氮迅(xun)速(su)冷凍(dong)保存(cun)備用。標本(ben)融化(hua)後(hou)仍然保持(chi)2-8℃的溫度(du)。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS（PH7.4），用手工或(huo)勻漿(jiang)器(qi)將標本(ben)勻漿(jiang)充分(fen)。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收集上(shang)清。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹(yi)份待檢測，其余冷凍(dong)備用。

6. 標本(ben)采集後盡早進行(xing)提(ti)取，提(ti)取按相(xiang)關文獻進行(xing)，提(ti)取後應盡快進行(xing)實(shi)驗。若不(bu)能(neng)馬上(shang)進行(xing)試驗，可將(jiang)標本(ben)放於(yu)-20℃保存(cun)，但(dan)應避免(mian)反復凍(dong)融.

7. 不(bu)能(neng)檢測含NaN3的(de)樣(yang)品(pin)，因NaN3抑(yi)制辣(la)根過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性(xing)。

酶(mei)ELISA試劑盒(he)樣品(pin)收集:

1. 血(xue)清：全血(xue)樣品(pin)於室溫放(fang)置2小時或(huo)4℃過夜(ye)後於(yu)1000×g離(li)心20分(fen)鐘，取上(shang)清即(ji)可檢測，收集血(xue)液的(de)試管(guan)應為壹(yi)次性的(de)無(wu)熱原，無(wu)內毒(du)素(su)試管(guan)。

2. 血(xue)漿：抗(kang)凝劑(ji)使用EDTA-Na2，樣品(pin)采集後30分鐘內於(yu)1000×g離(li)心15分(fen)鐘，取上(shang)清即(ji)可檢測。避免(mian)使用溶血(xue)，高(gao)血(xue)脂樣品(pin)。

3. 組(zu)織勻漿(jiang)：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組(zu)織，去(qu)除殘(can)留(liu)血(xue)液（勻(yun)漿中(zhong)裂解的(de)紅(hong)細胞會影(ying)響(xiang)測量結果(guo)），稱重後將碎。將剪(jian)碎的組(zu)織與(yu)對應(ying)體(ti)積的PBS（壹(yi)般按1:9的(de)重(zhong)量體(ti)積比，比如1g的組(zu)織樣品(pin)對應(ying)9mL的(de)PBS，具(ju)體(ti)體(ti)積可根據(ju)實(shi)驗需(xu)要適當調(tiao)整，並做好記錄。在PBS中(zhong)加(jia)入(ru)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制劑(ji)）加(jia)入(ru)玻(bo)璃勻(yun)漿器(qi)中，於(yu)冰上(shang)充分(fen)研(yan)磨(mo)。為了進壹(yi)步(bu)裂解組(zu)織細胞，可以(yi)對勻(yun)漿(jiang)液進行(xing)超聲(sheng)破碎，或(huo)反復凍(dong)融。zui後將(jiang)勻漿(jiang)液於5000×g離(li)心5~10分(fen)鐘，取上(shang)清檢測。

4. 細胞培(pei)養(yang)上(shang)清：取細胞培(pei)養(yang)上(shang)清於(yu)1000×g離(li)心20分(fen)鐘，除去(qu)雜質及(ji)細(xi)胞碎片(pian)。取上(shang)清檢測。

5. 其它生物(wu)樣品(pin)：1000×g離(li)心20分(fen)鐘，取上(shang)清即(ji)可檢測

6. 樣品(pin)應清澈(che)透(tou)明，懸浮(fu)物(wu)應(ying)離(li)心去(qu)除。

7. 樣品(pin)收集後若在1周(zhou)內進行(xing)檢測的可保存(cun)於4℃，若不(bu)能(neng)及時檢測，請按壹(yi)次使用量分裝(zhuang)，凍(dong)存(cun)於-20℃(1個月內檢測)，或(huo)-80℃（6個月內檢測），避免(mian)反復凍(dong)融。