市(shi)面(mian)上(shang)銷(xiao)售的(de)ELISA試劑盒(he)種(zhong)類繁多，不(bu)同指(zhi)標的(de)檢(jian)測(ce)範圍及(ji)實驗方(fang)法(fa)不(bu)盡相同(tong)，甚至(zhi)相(xiang)同(tong)指(zhi)標不(bu)同(tong)廠家的(de)試劑盒(he)實驗方(fang)法(fa)都(dou)可(ke)能(neng)會(hui)不(bu)壹樣(yang)。但基本(ben)原理都是(shi)壹致(zhi)的(de)，是(shi)將可(ke)溶(rong)性(xing)的(de)抗原或(huo)抗體吸(xi)附(fu)到(C8H8)n等(deng)固相(xiang)載體上(shang)，進行免(mian)疫(yi)反應的(de)定(ding)性(xing)和定(ding)量(liang)方(fang)法(fa)。ELISA試劑盒(he)變(bian)質(zhi)是(shi)ELISA實驗中(zhong)比(bi)較常見的(de)問題，現(xian)總(zong)結(jie)影響(xiang)ELISA試劑盒(he)質(zhi)保因素(su)：
 1、方(fang)法(fa)學的(de)影(ying)響(xiang)
ELISA測定(ding)模式(shi)包括(kuo)以下幾(ji)種(zhong)：雙抗體夾心(xin)法(fa)、間接(jie)法、雙抗原夾心(xin)法(fa)、IgM抗體捕(bu)捉法(fa)、競(jing)爭抑(yi)制法，其中競爭抑(yi)制法(HBeAb,HBcAb等(deng)采用(yong))因受(shou)操作(zuo)時差(cha)所引起的(de)bu公平競(jing)爭等(deng)因素(su)的(de)影(ying)響(xiang)，結(jie)果重(zhong)復(fu)性(xing)較差(cha)，質(zhi)量較難控制。

 2、試劑因素(su)
不同(tong)批(pi)次的(de)ELISA試劑在(zai)制作過(guo)程(cheng)中(zhong)很難保證質(zhi)量全(quan)壹致(zhi)，即(ji)使(shi)是(shi)通(tong)過(guo)批(pi)批(pi)檢的(de)項(xiang)目其檢測結(jie)果也(ye)存(cun)在差(cha)異，因此必(bi)須(xu)選擇和訂(ding)購(gou)長批(pi)號的(de)試劑，並(bing)保證保存(cun)條件。嚴格執行(xing)這標準(zhun)可(ke)以(yi)避(bi)免(mian)因試劑批(pi)號改變(bian)而重新(xin)建(jian)立(li)質(zhi)控體系及重(zhong)新(xin)評估(gu)試劑的(de)復(fu)雜過(guo)程(cheng)，並(bing)且(qie)能(neng)夠(gou)保證結(jie)果的(de)穩(wen)定(ding)性(xing)；對於(yu)效期短(duan)、使(shi)用率低(di)的(de)試劑，應(ying)當小量分裝，每次使用(yong)則(ze)取(qu)分裝部分即可(ke)，避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)造(zao)成試劑的(de)失(shi)效(xiao)。

 3、樣(yang)本(ben)因素(su)
標本(ben)幹(gan)擾(rao)因素(su)包括(kuo)內源(yuan)性(xing)幹(gan)擾(rao)因素(su)和外(wai)源(yuan)性(xing)幹(gan)擾(rao)因素(su)，者(zhe)包括(kuo)類風(feng)濕(shi)因子(zi)、補(bu)體、異嗜性(xing)抗體、自身抗體等(deng)，後者(zhe)包括(kuo)標本(ben)溶血(xue)、標本(ben)被細菌汙(wu)染、標本(ben)貯存(cun)時間過(guo)長、標本(ben)凝固(gu)不全(quan)、冷凍標本(ben)的(de)反(fan)復(fu)凍融(rong)等(deng)。

 4、操作(zuo)因素(su)
ELISA操作(zuo)步驟(zhou)復(fu)雜，操(cao)作(zuo)不當(dang)將引(yin)起較大的(de)誤(wu)差(cha)。加樣(yang)、溫育(yu)、洗(xi)滌(di)、顯(xian)色、比(bi)色(se)。

 5、灰區(qu)的(de)設(she)置
通常(chang)情(qing)況下，ELISA定(ding)性(xing)實驗以(yi)“陽性"和“陰(yin)性"來報(bao)告結(jie)果，兩(liang)者(zhe)間有yi條分界(jie)線(xian)被稱(cheng)為(wei)“陽性判斷值(zhi)"(cut-off value，CO值(zhi))，這(zhe)是(shi)定(ding)性(xing)免(mian)疫(yi)測定(ding)結(jie)果報(bao)告的(de)依(yi)據(ju)。

 6、標本(ben)復查
ELISA手(shou)工檢(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)復(fu)雜，影(ying)響(xiang)因素(su)較多，即使室內(nei)質(zhi)控在(zai)控，也(ye)可(ke)能(neng)因孔間差(cha)異而造(zao)成結(jie)果的(de)差(cha)異，因此加大(da)復(fu)查力(li)度是(shi)保證結(jie)果準(zhun)確(que)性(xing)的(de)可(ke)靠(kao)方(fang)法(fa)，比(bi)如(ru)對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等(deng)項(xiang)目的(de)可(ke)疑、弱(ruo)陽性標本(ben)及少見(jian)模式(shi)的(de)檢(jian)測(ce)結(jie)果進行復(fu)查。

 7、常表示(shi)結(jie)果的(de)常(chang)用(yong)方(fang)法(fa)
      a.定(ding)性(xing)測(ce)定(ding)。
      b.半(ban)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding) 結(jie)果yi般(ban)以滴度表示(shi)。
      c.定(ding)量(liang)測(ce)定(ding) 即(ji)用(yong)已知量(liang)的(de)標準(zhun)品(pin)作壹系列稀(xi)釋(shi)後進行ELISA測(ce)定(ding)，繪(hui)制標準(zhun)曲(qu)線(xian)，結(jie)果以(yi)量(liang)或(huo)單位(wei)表示(shi)。