進(jin)口ELISA試劑(ji)盒(he)是(shi)壹(yi)種敏(min)感(gan)性(xing)高(gao)、特(te)異性強、重復(fu)性(xing)好(hao)的ELISA試劑(ji)盒(he),其(qi)試劑(ji)安(an)穩、易(yi)保留、操作(zuo)簡(jian)練(lian)、作用區分(fen)客觀(guan)等要(yao)素(su),適宜(yi)於大(da)規模(mo)篩查實驗(yan)又(you)能夠用(yong)於少數標(biao)本(ben)的檢(jian)查,能夠做定(ding)性實驗(yan)也能夠做定(ding)量分析。
試劑(ji)盒(he)采(cai)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)壹步(bu)夾(jia)心法(fa)酶(mei)聯免疫吸(xi)附試驗(yan)(ELISA)。往預(yu)先(xian)包被人心(xin)型(xing)脂(zhi)肪酸(suan)結(jie)合蛋白(h-FABP)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)的包(bao)被(bei)微(wei)孔(kong)中(zhong),依次(ci)加(jia)入(ru)標(biao)本(ben)、標(biao)準品、HRP標(biao)記(ji)的檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti),經過溫育並*洗滌(di)。用(yong)底(di)物TMB顯(xian)色,TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)的催(cui)化(hua)下轉化(hua)成藍(lan)色,並在(zai)酸(suan)的作(zuo)用(yong)下轉化(hua)成*終的黃(huang)色。顏色的深(shen)淺(qian)和(he)樣品中(zhong)的人(ren)心(xin)型(xing)脂(zhi)肪酸(suan)結(jie)合蛋白(h-FABP)呈正相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長下測(ce)定吸(xi)光度(du)(OD值(zhi)),計算樣(yang)品濃(nong)度(du)。
1、樣(yang)品離(li)心不*,反(fan)應(ying)孔(kong)內發生(sheng)凝(ning)血(xue)或(huo)殘留(liu)細胞(bao)成分,應(ying)充分(fen)離(li)心,3000rpm6分鐘(zhong)以上(shang)。
2、加(jia)樣(yang)時(shi)交叉汙(wu)染,加(jia)標(biao)本(ben)時盡量避(bi)免交叉汙(wu)染,如(ru)盛標(biao)本(ben)的試管周圍常有血(xue)痂(jia),易(yi)脫落,應(ying)遠(yuan)離(li)酶(mei)標(biao)板(ban)。
3、手工洗(xi)板(ban)造(zao)成的交叉汙(wu)染,手工洗(xi)板(ban)時(shi)前(qian)3次註洗液(ye)後(hou)應(ying)立(li)即(ji)棄(qi)去(qu),後(hou)幾次再(zai)設(she)定(ding)浸泡(pao)時間,可減少交叉汙(wu)染。
4、洗(xi)板(ban)機(ji)加(jia)液(ye)頭(tou)堵塞導致加(jia)液(ye)不(bu)滿或(huo)吸(xi)液(ye)殘留(liu)量較(jiao)大(da),造成花板(ban)、跳孔(kong),疏(shu)通(tong)加液(ye)頭(tou),使洗板(ban)時(shi)每(mei)孔(kong)均註滿洗液(ye),吸(xi)液(ye)時(shi)殘留(liu)量要(yao)小(xiao)。
5、拍(pai)板(ban)時(shi)交叉汙(wu)染,洗(xi)板(ban)完(wan)畢(bi)拍(pai)板(ban)時(shi)用(yong)合適的吸(xi)水(shui)紙巾(jin),不(bu)要(yao)把(ba)無關(guan)物(wu)質拍(pai)進(jin)板(ban)孔(kong),並盡量不(bu)要(yao)在(zai)同位(wei)置拍,以免交叉汙(wu)染。