肉毒桿(gan)菌毒素E核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）

訂購(gou)信(xin)息(xi)：
 產品名(ming)稱：肉毒桿(gan)菌毒素E核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）
規格：50T
編號(hao)：BH-P96460
分類(lei)：熒光PCR法
儲(chu)存(cun)條件(jian)：-20℃避光保存(cun)，避免(mian)反復凍(dong)融。
運(yun)輸(shu)：低(di)溫、避光，快(kuai)遞(di)免(mian)費(fei)送貨上(shang)門(men)。
產品特點(dian)：
◇高(gao)特異性：與其(qi)他病(bing)毒無交叉(cha)反應(ying)，無非特異性擴(kuo)增(zeng)；
◇高(gao)靈(ling)敏(min)度(du)：檢測靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所(suo)有試劑(ji)均(jun)采用(yong)相(xiang)同(tong)的(de)體(ti)系和條件，可(ke)同(tong)時進(jin)行(xing)多(duo)個(ge)檢測；
◇高(gao)通量(liang)：多(duo)種雙重(zhong)PCR檢測以(yi)及三重PCR檢測試(shi)劑(ji)盒(he)。

準備(bei)物品：
清(qing)理(li)液（A）                                   毫升(sheng)
染色(se)液（t B）                                   微(wei)升(sheng)
稀釋(shi)液（C）                                   毫升(sheng)
溶解(jie)液（tD）                                   毫升(sheng)
產品說(shuo)明(ming)書                                   1份
使(shi)用(yong)及效(xiao)果(guo)：
PCR反應(ying)特點(dian)
(1) 特異性強
PCR反應(ying)的特異性決定(ding)因(yin)素(su)為：
①引物(wu)與模板(ban)DNA特異正確(que)的(de)結合；
②堿基(ji)配對(dui)原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚合酶合(he)成反應(ying)的忠(zhong)實(shi)性；
④靶基(ji)因的特異性與保守性。
其中(zhong)引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正(zheng)確(que)結(jie)合是關鍵(jian)。引(yin)物與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合(he)及引物(wu)鏈(lian)的延(yan)伸(shen)是遵(zun)循(xun)堿基(ji)配對(dui)原(yuan)則(ze)的。聚合酶合(he)成反應(ying)的忠(zhong)實(shi)性及Taq DNA聚合酶耐(nai)高(gao)溫性，使(shi)反應(ying)中(zhong)模板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的結(jie)合(he)(復性)可(ke)以在(zai)較高(gao)的溫(wen)度(du)下(xia)進(jin)行(xing)，結(jie)合(he)的(de)特異性大大(da)增(zeng)加(jia)，被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基(ji)因片(pian)段也就(jiu)能(neng)保持很(hen)高(gao)的正(zheng)確(que)度(du)。再通過(guo)選擇(ze)特異性和保守性高(gao)的靶(ba)基(ji)因區，其特異性程度(du)就(jiu)更高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)
PCR產物(wu)的生(sheng)成量(liang)是以指(zhi)數方式增(zeng)加(jia)的(de)，能(neng)將皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量級的起(qi)始待(dai)測模板(ban)擴(kuo)增(zeng)到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細胞(bao)中(zhong)檢出壹(yi)個(ge)靶(ba)細胞(bao)；在病(bing)毒的檢測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達3個(ge)RFU(空(kong)斑(ban)形(xing)成單(dan)位(wei))；在細菌學(xue)中(zhong)zui小檢出率(lv)為3個(ge)細菌。
(3) 簡便、快(kuai)速
PCR反應(ying)用耐高(gao)溫的(de)Taq DNA聚合酶，壹(yi)次性地將反應(ying)液加(jia)好(hao)後，即在(zai)DNA擴(kuo)增(zeng)液和(he)水(shui)浴鍋(guo)上(shang)進(jin)行(xing)變(bian)性-退火(huo)-延(yan)伸(shen)反應(ying)，壹(yi)般在(zai)2～4 小時完成擴(kuo)增(zeng)反應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)壹(yi)般用(yong)電(dian)泳分析，不壹(yi)定(ding)要(yao)用(yong)同(tong)位(wei)素，無放射(she)性汙(wu)染、易推(tui)廣。
(4) 對(dui)標本的(de)純度(du)要求(qiu)低
不需(xu)要(yao)分離(li)病(bing)毒或細菌及培(pei)養(yang)細胞(bao)，DNA 粗制(zhi)品及總RNA均(jun)可(ke)作為擴(kuo)增(zeng)模板(ban)。可(ke)直(zhi)接(jie)用臨(lin)床標本(ben)如血(xue)液、體(ti)腔液、洗(xi)嗽(sou)液、毛(mao)發、細胞(bao)、活PCR技(ji)術(shu)概(gai)論(lun)。
中(zhong)國倉(cang)鼠(shu)肺細胞(bao);V79知母(mu)皂(zao)苷BII（）Timosaponin BIIHPLC≥98%，

H1299細胞(bao)，肺腺(xian)癌(ai)細胞(bao) SV40轉(zhuan)化的(de)非(fei)洲(zhou)綠猴(hou)腎(shen)細胞(bao),COS-7細胞(bao) CM-M058小鼠(shu)膀胱上(shang)皮(pi)細胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji)100mL2',3'-二(er)脫氧(yang)鳥(niao)苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine>97%,進(jin)分

SH-SY5Y(神經母細胞(bao)瘤細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2知母(mu)皂(zao)苷E()Anemarsaponin EHPLC≥98%，

NHEK-c 正常表(biao)皮(pi)角(jiao)質(zhi)形(xing)成細胞(bao)(NHEK)，混合 500,000cells 原(yuan)代(dai)心(xin)肌細胞(bao)特制(zhi)無血(xue)清(qing)添加(jia)劑(ji)Many types of cells　1ml植(zhi)酸()Phytic acidUV≥98%，

豬源細胞(bao)重樓皂(zao)苷I（）Polyphyllin IHPLC≥98%，
中(zhong)國倉(cang)鼠(shu)卵巢(chao)細胞(bao);CHO輔(fu)酶Q9>99%CoenzymeQ9

F3 Others Human  Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 輔(fu)酶Q9()>99%,CoenzymeQ9

A172 膠質(zhi)母(mu)細胞(bao)瘤細胞(bao)利可(ke)君(jun)（）含(han)量(liang)測定(ding)Leucoson

MCF-7-EGFP-puro(慢病(bing)毒構(gou)建(jian)穩定(ding)株(zhu))癌(ai)細胞(bao) MCF-7-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human breast cancer cells 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin（）含量(liang)測定(ding)Lamivudine

RSPO1 Protein Human 重組(zu) R-Spondin 1 / RSPO1 蛋(dan)白（）HPLC法含(han)量測定(ding)Torasemide
肉毒桿(gan)菌毒素E核(he)酸檢測試(shi)劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）A9 小鼠(shu)皮(pi)下(xia)結締(di)組織(zhi)細胞(bao)鹽培(pei)養(yang)基(ji)shēng huà shì jì容量(liang)：100克

CL-0222SV-HUC-1(膀胱上(shang)皮(pi)永(yong)生(sheng)化細胞(bao))5×106cells/瓶×22-溴(xiu)代酰安(an) 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8

mOPC, 小鼠(shu)少突(tu)膠質(zhi)前(qian)體(ti)細胞(bao)扶化鋁鉀，英(ying)文名(ming)或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級別：BR，97%，規格：100克

Sars結構(gou)蛋(dan)白表(biao)達(da)株;293 001A 腎(shen)實(shi)質(zhi)細胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL維生(sheng)素(su)D2shēng huà shì jì容量(liang)：保存(cun)：-20℃100毫克(ke)

腦(nao)血(xue)管周細胞(bao)總RNAHBVC NA94-98-42，4-二(er)甲(jia)基(ji)芐胺(an)2,4-Dimetxylbenzylamine
檢測步(bu)驟(zhou)：
壹(yi)、 試劑(ji)的(de)準備
從(cong)試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)取出熒(ying)光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上(shang)融化並(bing)振(zhen)蕩混勻後，10000rpm離心(xin)10s。
設所(suo)需(xu)要(yao)的PCR反應(ying)管管數為N(N=樣本數+1管陰(yin)性對(dui)照+1管陽(yang)性對(dui)照)，每個(ge)測試(shi)反應(ying)體(ti)系配制(zhi)如下(xia)表(biao)：
試劑(ji) 每個(ge)反應(ying)加入的(de)量(liang) N個(ge)反應(ying)加入的(de)量(liang)
熒光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好(hao)各(ge)試劑(ji)的(de)使(shi)用(yong)量(liang)，加(jia)入壹(yi)適當(dang)體(ti)積潔凈(jing)離心(xin)管中(zhong)，充分混勻，10000rpm離心(xin)10s，向設定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管中(zhong)分別(bie)加(jia)入15μL熒光PCR反應(ying)液，向(xiang)每管中(zhong)加入處(chu)理(li)後樣品或(huo)陰性對(dui)照(NTC)和陽(yang)性對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心(xin)10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條件
將各(ge)反應(ying)管放入定(ding)量(liang)PCR儀(yi)器(qi)的反應(ying)槽(cao)內(nei)。
循(xun)環條(tiao)件:
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸(shen)時收集(ji)熒光信(xin)號(hao)。報(bao)告(gao)基(ji)團：設置(zhi)為FAM。淬(cui)滅基(ji)團：NONE，請勿選擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒光。