UM-UC-3人膀(pang)胱(guang)移(yi)行(xing)細(xi)胞(bao)癌(ai)

公(gong)司產品僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使(shi)用、不得用於臨床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終(zhong)止消(xiao)化，再輕輕吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡下(xia)觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後加(jia)入(ru)培養液終(zhong)

止消(xiao)化，輕輕吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然(ran)後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將其移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用程序(xu)

降溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合均(jun)勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹(chui)勻(yun)。然後將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培養基的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入約(yue)8 mL培(pei)養基，培養過夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去培養上清(qing)，用不含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養瓶(ping)置於37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓並脫落，迅(xun)速拿回操(cao)作(zuo)臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化。輕輕打勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品：

F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)免(mian)疫(yi)球蛋白G(IgG)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MYS(Mouse Myosin)  小(xiao)鼠(shu)肌(ji)球蛋白 96T

OR5T1： 嗅(xiu)覺受體家(jia)族(zu)5亞(ya)基1抗體 骨骼肌(ji)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

MDCK-EGFP-puro(慢(man)病毒構(gou)建(jian)穩(wen)定(ding)株)狗腎上皮細(xi)胞(bao) MDCK-EGFP-puro (leiviral consuct stable sains of canine renal epithelial cells) EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin 大鼠(shu)免(mian)疫(yi)球蛋白G(IgG)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) cTn- I  大鼠(shu)心(xin)肌(ji)肌(ji)鈣蛋白Ⅰ 96T

Oct-3/Oct-4： 胚(pei)胎幹(gan)細(xi)胞(bao)關(guan)鍵(jian)蛋白抗體 P4HB Others Human 人 P4HB / ERBA2L 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao))

犬(quan)腎細(xi)胞(bao);MDCK(NBL-2) 大鼠(shu)免(mian)疫(yi)球蛋白E(IgE)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1)  人基質金屬(shu)蛋白酶(mei)組織抑(yi)制(zhi)因(yin)子(zi)1 96T

EFNB1 Protein Human 重(zhong)組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標(biao)簽(qian)) 雞(ji)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白40(HSP-40)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) human Serum albumin 人血清(qing)白蛋白 10mg

KCNA7： 電(dian)壓(ya)閥(fa)門(men)通(tong)道混(hun)合器(qi)相關(guan)亞(ya)家(jia)族成(cheng)員(yuan)7抗體 SIAE Others Human 人 sialate O-acetylesterase / SIAE 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao))

人角(jiao)膜成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 雞(ji)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋白20(HSP-20)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Beta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta) 人beta 亞(ya)基人絨(rong)毛膜抗原 0.5mg

Kir6.2： ATP敏(min)感性(xing)通道(dao)亞(ya)基kir6.2抗體 人羊(yang)膜間(jian)充質(zhi)基質細(xi)胞(bao) Sars蛋白表達株，293001A細(xi)胞(bao) NCI-H596 [H596](人肺(fei)癌細(xi)胞(bao))

BCAM Others Rat 大鼠(shu) BCAM 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 雞(ji)皮(pi)質(zhi)酮(tong)(CS)ELISA試劑(ji)盒(he) HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1) 高(gao)遷移(yi)率族蛋白-1(抗原) 0.5mg

UM-UC-3人膀(pang)胱(guang)移(yi)行(xing)細(xi)胞(bao)癌(ai)L6 大鼠(shu)成(cheng)肌(ji)細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)CXC趨(qu)化因(yin)子(zi)受(shou)體4(CXCR4)ELISA試劑(ji)盒(he) OT(Human oxytocin)  人催(cui)產素(su) 96T

phospho-STAT5a(Tyr694)： 0酸(suan)化信號轉導和轉錄(lu)激(ji)活(huo)因(yin)子(zi)5a抗體 H4細(xi)胞(bao)，人腦(nao)神(shen)經(jing)膠質瘤(liu)細(xi)胞(bao) 人大動(dong)脈(mai)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao),HASMC細(xi)胞(bao) 正(zheng)常(chang)大鼠(shu)腎(shen)細(xi)胞(bao)(EGF受(shou)體(ti)陽性(xing));NRK49F

FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)CXC趨(qu)化因(yin)子(zi)受(shou)體3(CXCR3)ELISA試劑(ji)盒(he) PAPP-A(Human pregnancy associated plasma protein A)  人相關(guan)血漿蛋白A 96T

phospho-SYT1(Thr202)： 0酸(suan)化突觸結(jie)合蛋白1抗體 二(er)氫(qing)還(hai)原酶(mei)缺陷型(xing)中國(guo)倉鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao);CHO/dhFr-

CM-H051人胎盤(pan)滋(zi)養層(ceng)細(xi)胞(bao)培(pei)養基100mL 大鼠(shu)CXC趨(qu)化因(yin)子(zi)受(shou)體3(CXCR3)ELISA 試劑(ji)盒(he) EMAb(Human Endometrium Antibody,EMAb )  人抗子(zi)宮內(nei)膜抗體 COMP Others Human 人 COMP 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照(zhao))

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完好，培(pei)養液是(shi)否有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上述現(xian)象 發生(sheng)請(qing)及時和我們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培養基、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養條件(jian)不壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責(ze)任由(you) 客戶自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯微鏡下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察好(hao)細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精消毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於 37℃培養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養瓶(ping)或培養皿(min)中，置於培養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客戶用相同條件(jian)的(de)培養基用於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於和我司(si)技術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不穩定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及時和我們聯系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以便(bian)我們的(de)技術(shu)人員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培養基 (灌(guan)液培(pei)養基) 不能(neng)再用來培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養條件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培養基來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。