U87MG人腦星(xing)形(xing)膠(jiao)質母(mu)細(xi)胞(bao)瘤

公(gong)司(si)產品(pin)僅供(gong)科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷！

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培養(yang)瓶的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後按 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培養(yang)瓶的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮中進(jin)行(xing)長(chang)期保存(cun)。使用(yong)程序(xu)

降溫(wen)盒可直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說明書為主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃解凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然後將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中(zhong)，使消化(hua)液浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置(zhi)於37℃培養(yang)箱中消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然後在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中或(huo)者瓶中(zhong)，置於培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液氮灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明書，了解細(xi)胞(bao)相關(guan)信息，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若由(you)於培養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸問(wen)題(ti)，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片，是正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直接混勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的培養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新的培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培養(yang)箱中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同條件(jian)的培養(yang)基(ji)用於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技術部溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸的原因(yin)，個別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩定的情(qing)況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技術人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用的培養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能再用(yong)來培養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按(an)照說明書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制的培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在出(chu)售(shou)的產品(pin)：

OTUB1： 泛素特異(yi)性(xing)蛋(dan)白酶(mei)OTB1抗體 人細(xi)胞(bao);C-33A

PDGFC Protein Human 重組(zu)人 PDGF-C / SCDGF 蛋(dan)白 (His 標簽(qian)) 大鼠免疫(yi)球蛋(dan)白M(IgM)ELISA試劑(ji)盒 TR  大鼠受(shou)體(ti) 96T

OPA1： 視神(shen)經(jing)相關(guan)蛋(dan)白1抗體 PTGS2 Others Human 人 PTGS2 / COX2 / PGHS-2 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

22RV1 人前列(lie)腺癌細(xi)胞(bao) 大鼠免疫(yi)球蛋(dan)白M(IgM)ELISA 試劑(ji)盒 sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha)  小鼠橫(heng)紋(wen)肌(ji)輔肌(ji)動蛋(dan)白α 96T

OAZ1： 鳥酸脫(tuo)羧(suo)酶(mei)抗酶(mei)1抗體 RAW 264.7細(xi)胞(bao)，單核巨噬細(xi)胞(bao)白血(xue)病細(xi)胞(bao) 人肝細(xi)胞(bao),FL62891細(xi)胞(bao) CL-0216SMMC-7721(人肝癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

KLK7： 7抗體 MEP1A Others Mouse 小鼠 MEP1A 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

膠原I-3D凝(ning)膠(jiao)試(shi)劑(ji)盒C3DGK 雞熱(re)休(xiu)克蛋(dan)白70(HSP-70)ELISA 試劑(ji)盒 GST-Tag 重組(zu)-轉移酶(mei) 0.5mg

KLK9： 9抗體 人肺鱗(lin)癌細(xi)胞(bao);NCI-H520

EJ(人膀胱(guang)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 肺(fei)大靜(jing)脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml) 雞熱(re)休(xiu)克(ke)蛋(dan)白60(Hsp-60)ELISA 試劑(ji)盒 Gentamicin/OVA 慶(qing)大(da)偶(ou)聯(lian)雞(ji)卵白(bai)蛋(dan)白 2mg

KLK14： 14抗體 CL-0405NCI-H716(人結直腸(chang)腺癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

U87MG人腦星(xing)形(xing)膠(jiao)質母(mu)細(xi)胞(bao)瘤CM-H059人子(zi)宮頸(jing)上(shang)皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL 大鼠C反(fan)應(ying)蛋(dan)白(CRP)ELISA試劑(ji)盒 AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb)  人抗卵巢(chao)抗體 CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人神(shen)經(jing)束膜細(xi)胞(bao)HPC 大鼠C反(fan)應(ying)蛋(dan)白(CRP)ELISA 試劑(ji)盒 anti-CMV IgG(Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG)  人抗巨細(xi)胞(bao)病毒(du)抗體 BSC-1(猴腎(shen)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2

人胰腺癌細(xi)胞(bao);PANC-1 人角(jiao)膜內皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大鼠CXC趨化(hua)因子(zi)受(shou)體5(CXCR5)ELISA試劑(ji)盒 BFP(Human basic fetoprotein,BFP)  人堿性(xing)胎(tai)兒(er)蛋(dan)白 96T

SKALP： 彈(dan)性(xing)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑(ji)抗體 CL-0029B16(小鼠黑色素(su)瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

SK-N-SH, 人神(shen)經(jing)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) 大鼠CXC趨化(hua)因子(zi)受(shou)體4(CXCR4)ELISA試劑(ji)盒 anti-RV IgM(Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM)  人抗風(feng)疹病(bing)毒(du)IgM抗體 SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))