ZR-75-1人乳腺(xian)癌(ai)細(xi)胞

公司(si)產品僅(jin)供科研研(yan)究(jiu)使用、不得用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打細(xi)胞使之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例(li)進行分瓶(ping)傳(chuan)代，最後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細(xi)胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓後加(jia)入(ru)培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打細(xi)胞使之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉移(yi)至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並放置於(yu)凍存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞凍存(cun)管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)中進(jin)行長期保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直(zhi)接放入-80℃。

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅供參考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜）。第(di)二天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳代：如果細(xi)胞密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳代培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清，用不含鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情況(kuang)而定），然(ran)後在顯(xian)微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細胞大部(bu)分變圓並脫(tuo)落，迅速(su)拿回操作臺(tai)，輕敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀態良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根據細胞數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞凍存(cun)液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌儲存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以便下次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產品：

OIF： 骨(gu)誘(you)導(dao)因(yin)子(zi)抗(kang)體(ti) 中國(guo)倉鼠卵(luan)巢細胞(亞系(xi)克隆);CHO-HCV-NS2

人小氣管(guan)上(shang)皮(pi)細胞(HSAEpiC)(5×105 ) MN-s, 小鼠紋(wen)狀體(ti)神(shen)經元 Mouse 大鼠卵(luan)巢癌(ai)標(biao)誌(zhi)物(wu)CA125ELISA 試劑盒(he) Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199  人胃腸癌(ai)標(biao)誌(zhi)物(wu)CA199 96T

6-Oct： 八(ba)聚(ju)體(ti)結(jie)合(he)轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)6抗(kang)體(ti) 人肝癌(ai)細(xi)胞;SMMC-7721

RSPO1 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 大(da)鼠卵(luan)白蛋白(bai)(OVA)ELISA試劑盒(he) M30(Mouse Embryonic Stem MESPU30)  小(xiao)鼠胚(pei)胎幹細胞系(xi)MESPU30 96T

OLIG2： 少突膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞轉錄(lu)因(yin)子(zi)2抗(kang)體(ti) VEGFA Others Mouse 小(xiao)鼠 VEGFA / VEGF164 桿(gan)狀病毒-昆(kun)蟲細胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao))

IL17RA Others Rat 大(da)鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao)) 雞極低(di)密(mi)度脂(zhi)蛋(dan)白(VLDL) ELISA試(shi)劑盒(he) Lipocalin 2 脂(zhi)質(zhi)運(yun)載蛋(dan)白 0.5mg

KCC2： 神(shen)經細胞氯(lv)離子(zi)轉(zhuan)運(yun)蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) EB病(bing)毒轉(zhuan)化的(de)人B淋巴(ba)細(xi)胞(拉祜族(zu));KM9406

B95-8細(xi)胞，產EBV的(de)絨(rong)猴(hou)白細(xi)胞 A549(人肺腺(xian)癌(ai)細(xi)胞) 非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞;BS-C-1 雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA 試(shi)劑盒(he) Leptin 瘦(shou)素(su) 0.5mg

KRAS： 原(yuan)癌(ai)基(ji)因(yin)K-ras抗(kang)體(ti) CD8A Others Mouse 小(xiao)鼠 CD8a / Lyt2 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao))

BSS 雞環0酸(suan)腺(xian)苷(gan)(cAMP)ELISA 試(shi)劑盒(he) Metronidazole/BSA 偶聯(lian)血(xue)清白(bai)蛋白(bai) 1mg

ZR-75-1人乳腺(xian)癌(ai)細(xi)胞SHROOM1： SHROOM1蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) C127(小(xiao)鼠癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2

人骨(gu)肉(rou)瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] 大鼠肺血(xue)管(guan)平滑肌(ji)細胞培養(yang)基(ji) 100mL 大鼠CD3d分(fen)子(zi)(CD3d)ELISA試(shi)劑盒(he) C3c(Human Complement fragment 3c)  人補(bu)體(ti)片(pian)段(duan)3c 96T

Phospho-SirT1 (Ser27)： 0酸(suan)化沈(chen)默(mo)調(tiao)節蛋白1抗(kang)體(ti) T-111A木(mu)瓜蛋(dan)白(bai)酶(mei)(含10mL酶解(jie)緩沖(chong)液(ye))1mL

A-375 [A375], 人惡性黑(hei)素(su)瘤細胞株 大(da)鼠CD34分(fen)子(zi)(CD34)ELISA試(shi)劑盒(he) C7(Human Complement fragment 3c0  人補(bu)體(ti)7 96T

SHC2： SCK蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) CD274 Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴(hou) PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽(yang)性對照(zhao))

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否完好，培養(yang)液(ye)是(shi)否有漏液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細胞說明書(shu)，了解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息，如細胞形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞因(yin)子(zi)等，確保(bao)細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致而導(dao)致細胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責任由(you) 客戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度 變化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細(xi)胞，並接種(zhong)到(dao)新的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收到細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞狀態，便於和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至問題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸(shu)用的(de)培養(yang)基(ji) (灌液培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞，請換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞。     收到細(xi)胞後次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。