ZR-75-30人(ren)乳腺癌(ai)細胞

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用、不得(de)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長至覆蓋培(pei)養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然後按 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶傳代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中培(pei)養；

2、細(xi)胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培(pei)養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加入(ru)培(pei)養液終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放置(zhi)於凍(dong)存管中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降溫盒可直(zhi)接放入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品介(jie)紹：

二(er)、細(xi)胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以下(xia)細胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步驟以隨貨產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸液的凍存(cun)管在 37℃水浴中迅(xun)速搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻。然後將所(suo)有細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查細胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如果(guo)細胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸潤所(suo)有細(xi)胞，將培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱中消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而(er)定(ding)），然後在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞消化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞大部分變圓(yuan)並脫落(luo)，迅速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻後裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸液按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中，置於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細(xi)胞凍存：待細胞生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進(jin)行細胞凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及細(xi)胞培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞計(ji)數。

b、根據(ju)細胞數量加入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞凍存液，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存管凍存1mL細(xi)胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍存管放入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管位置以(yi)便(bian)下(xia)次拿取(qu)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出售的產(chan)品(pin)：

A172 人(ren)膠(jiao)質母(mu)細胞瘤細胞 大鼠瘤病毒(du)16(HPV-16)ELISA試(shi)劑(ji)盒 DPD  大鼠脫氧酚(fen)/脫(tuo)氧啉(lin) 96T

Os05g0477200 protein： 水稻白葉(ye)枯(ku)病(bing)菌(jun)Os05g0477200蛋(dan)白抗體(ti) MG-63細胞，骨肉瘤細胞 人(ren)鼻(bi)咽(yan)癌細(xi)胞,CNE細胞 CL-0248ZR-75-30(人(ren)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶×2

F3 Others Human 人(ren) Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠硫(liu)氧化(hua)還原蛋(dan)白(x)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PY  大鼠交(jiao)聯(lian)物 96T

OSTM1： 骨硬化(hua)病(bing)相關跨(kua)膜(mo)蛋(dan)白1抗體(ti) 肺泡(pao)上(shang)皮(pi)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

MCF-7-EGFP-puro(慢病(bing)毒(du)構(gou)建(jian)穩定株(zhu))人(ren)癌(ai)細胞 MCF-7-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human breast cancer cells 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin 大鼠硫(liu)氧化(hua)還原蛋(dan)白(x)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 NF-KapB p65(Mouse nuclear factor-KapB p65)  小(xiao)鼠核因子(zi)κB亞(ya)基p65親和(he)肽(tai) 96T

Kisspeptin： 轉移抑(yi)制(zhi)基因抗體(ti) 人(ren)肺(fei)巨(ju)細胞癌低(di)轉移細(xi)胞株(zhu);PG-LH7

HEL(人(ren)紅(hong)白細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 肝實(shi)質(zhi)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 雞弓(gong)形(xing)蟲(chong)循環抗原(TCA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 /KLH 與(yu)血(xue)藍(lan)蛋(dan)白偶聯(lian)物 5mg

KLH： 血(xue)藍(lan)蛋(dan)白抗體(ti) CL-0388NCI-H157(人(ren)非(fei)小細胞肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

EFNA3 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) Ephrin-A3 / EFNA3 蛋(dan)白 (His & Fc 標簽(qian)) 雞鈣調(tiao)0酸(suan)酶(CaN)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 reMOG 1-125 重(zhong)組(zu)髓鞘少樹突膠(jiao)質細胞糖蛋(dan)白1-125 500ug

KCNG2： 心(xin)臟(zang)離(li)子(zi)通道(dao)蛋白亞(ya)基2抗體(ti) EPD2 Others Human 人(ren) PDase 2 / EPD2 (aa 29-460) 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

ZR-75-30人(ren)乳腺癌(ai)細胞L-O2 人(ren)正(zheng)常(chang)胎(tai)肝細(xi)胞 大鼠CD320分子(zi)(CD320)ELISA試(shi)劑(ji)盒 A Beta1-42(Human amyloid beta peptide 1-42)  人(ren)β澱(dian)粉樣蛋(dan)白1-42 96T

SLC34A2： 0酸(suan)協(xie)同(tong)轉運蛋白抗體(ti) HB細胞，人(ren)口(kou)腔癌(ai)細胞 人(ren)臍靜(jing)脈(mai)血(xue)管內(nei)皮(pi)細(xi)胞,HUVEC(原代(dai))細(xi)胞 大鼠嗜(shi)堿(jian)性粒(li)細胞性白血病細胞;RBL-1

MST1R Others Human 人(ren) MST1R / CD136 人(ren)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠CD30配體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Human chemerin  人(ren)chemerin 96T

SORBS2： 精(jing)酸(suan)結(jie)合(he)蛋白2抗體(ti) 大鼠骨骼(ge)肌(ji)成(cheng)肌(ji)細(xi)胞;L6

CM-H019人(ren)前(qian)列腺上(shang)皮(pi)細胞培(pei)養基(ji)100mL 大鼠CD30分子(zi)(CD30)ELISA試(shi)劑(ji)盒 F XII (Human coagulation factor XII )  人(ren)Ⅻ 96T

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後首先(xian)觀察(cha)細胞瓶是否(fou)完好(hao)，培(pei)養液是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若有(you)上述現象 發(fa)生(sheng)請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明書(shu)，了解(jie)細(xi)胞相關信(xin)息，如細胞形態、所(suo)用培(pei)養基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞培(pei)養條(tiao)件壹(yi)致，若由於培(pei)養條(tiao)件不壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞出現問(wen)題，責任由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸問(wen)題，部分細胞由於溫度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並接種到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養箱中進(jin)行培(pei)養。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件的培(pei)養基(ji)用(yong)於細(xi)胞培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞後前 3 天(tian)各拍幾張細胞照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司技術部溝通 交(jiao)流。由於運輸的原因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會出現不穩定的情(qing)況，請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系，告知(zhi)細胞 的具體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來培(pei)養細(xi)胞，請換用按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞培(pei) 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的培(pei)養基(ji)來培(pei)養細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。