CCD-1097Sk細胞

公司產(chan)品(pin)僅供科(ke)研研究使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細胞回縮變圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫落，然後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶傳代(dai)，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

壹、商品(pin)介紹：

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的(de)培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)，待細胞回縮變圓後(hou)加(jia)入培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫落，然後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放置於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存(cun)管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫盒(he)可直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以下細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條件下離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞密度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如果(guo)細胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸(jin)潤所有細胞，將培養(yang)瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而(er)定），然後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞消化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細胞生長(chang)狀態良好時(shi)，可進(jin)行細胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集細胞及(ji)細胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量加入無(wu)血清細胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

細胞單胺氧(yang)化(hua)酶(mei)A型（MAO－A）活(huo)性熒(ying)光定量檢(jian)測試(shi)劑盒

同位(wei)素蛋白(bai)結(jie)合(he)反(fan)應試劑盒

體液(ye)KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病(bing)毒定量PCR擴增檢(jian)測試(shi)劑盒

細胞MYC蛋白(bai)表達比(bi)色法定量檢(jian)測試(shi)劑盒

組織遊離氨基(ji)酸(suan)含量熒(ying)光定量檢(jian)測試(shi)劑盒

全組織免(mian)疫熒(ying)光顯微(wei)鏡(jing)基(ji)礎檢(jian)測試(shi)劑盒（無壹抗(kang)和二(er)抗(kang)）

組織ITK激酶活(huo)性定量檢(jian)測試(shi)劑盒（A/B/C）

植物細胞周期S期同步（SYNCHRONY）處(chu)理試劑(ji)盒

人腦(nao)血液(ye)補(bu)體蛋白(bai)C3免(mian)疫比(bi)濁(zhuo)法定量檢(jian)測試(shi)劑盒

組織乙酰(xian)酯酶活(huo)性熒(ying)光法定量檢(jian)測試(shi)劑盒

精(jing)液(ye)組(zu)分(fen)氧(yang)化(hua)應激活(huo)性氧（ROS）魯米諾化(hua)學(xue)發光法

體外非(fei)細胞系(xi)統(tong)細胞色素(su)P450亞酶2D6（DEXTROMETHORPHAN） 活(huo)性高效液(ye)相色譜(pu)法（HPLC）定量檢(jian)測試(shi)劑盒

鈣ATP酶SERCA蛋白(bai)表達西(xi)方雜(za)交分(fen)析試(shi)劑盒

組織基質(zhi)金(jin)屬抑(yi)制(zhi)劑1（TIMP-1）活(huo)性比(bi)色法定量檢(jian)測試(shi)劑盒

膠原消化(hua)試(shi)劑(ji)盒(he)

載(zai)脂(zhi)蛋白(bai)E2受體抗(kang)體

鈣網(wang)蛋白(bai)重(zhong)組(zu)兔單(dan)克隆抗(kang)體

巰基(ji)氧化(hua)酶(mei)1抗(kang)體

IZUMO2蛋白(bai)抗(kang)體

細胞分裂(lie)周期蛋白(bai)6抗(kang)體

X染色體開(kai)放閱(yue)讀框26抗(kang)體

跨(kua)膜蛋白(bai)204抗(kang)體

CCD-1097Sk細胞APC標(biao)記(ji)人(ren)CD62E/CD62P單克隆抗(kang)體

鋅(xin)指蛋白(bai)765抗(kang)體

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到細胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞瓶是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀細胞說明(ming)書(shu)，了解(jie)細胞相關信息，如細胞形態、所(suo)用(yong)培養(yang)基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需 細胞因子等，確(que)保細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶表面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細胞狀態。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分(fen)細胞由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及(ji)劇烈碰(peng)亡破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直接混勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接種到新(xin)的(de)培養(yang)瓶或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到細胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細胞照片(pian)，記錄細胞狀態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的原因，個(ge)別敏感細胞會出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情(qing)況，請(qing)及(ji)時和我(wo)們聯系(xi)，告知(zhi)細胞 的具(ju)體情(qing)況，以(yi)便我們的技(ji)術人(ren)員跟蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅供科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養(yang)細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照(zhao)說明(ming)書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞。     收到(dao)細胞後第壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個10cm 皿。