CCD-13Lu細胞

公司產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不得用於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

壹、商品介(jie)紹：

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放置(zhi)於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細胞凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進(jin)行長(chang)期保(bao)存。使用程(cheng)序

降(jiang)溫(wen)盒可直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養凍(dong)存處理僅(jin)供參(can)考，具體(ti)操作步驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說明(ming)書為主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基(ji)混合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養基(ji)的培養瓶(ping)中培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去培養上清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤(run)所有細胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置於37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在顯微鏡下(xia)觀(guan)察細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細胞大(da)部(bu)分變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補加1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分到新(xin)的含8 mL培養基(ji)的新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細胞及(ji)細胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計(ji)數。

b、根據細胞數量加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍(dong)存管(guan)做好標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在出(chu)售的產品：

組織單胺氧(yang)化(hua)酶(mei)A型（MAO－A）活性(xing)熒光定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

凝(ning)膠遷(qian)移(yi)電(dian)泳分析(xi)試(shi)劑(ji)盒(he)

KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病毒(du)標準(zhun)曲(qu)線(xian)定量PCR擴(kuo)增檢測試劑(ji)盒(he)

細胞MYC蛋白(bai)表(biao)達熒光定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

血(xue)液(ye)遊(you)離氨(an)基酸含(han)量(liang)熒光定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

全組織免疫熒光顯微(wei)鏡(jing)間接檢測(ce)試劑(ji)盒(he)（含熒光二(er)抗(kang)）

細胞JAK3激(ji)酶(mei)活性(xing)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（A/B/C）

植(zhi)物(wu)細胞周(zhou)期S後期同步（SYNCHRONY）處理試(shi)劑(ji)盒(he)

通(tong)用細胞/組織載(zai)玻片制備(bei)試劑(ji)盒(he)

血(xue)液(ye)乙(yi)酰(xian)酯酶(mei)活性(xing)熒光法(fa)定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞氧(yang)化(hua)應(ying)激(ji)活(huo)性氧(yang)（ROS）光澤精(jing)化(hua)學(xue)發(fa)光法(fa)

細胞色(se)素P450亞酶(mei)3A4（TESTOSTERONE）活性(xing)高效液(ye)相色譜(pu)法(fa)（HPLC）定量(liang)檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

鈣(gai)ATP酶(mei)SERCA蛋白(bai)免疫共(gong)沈(chen)澱分析(xi)試(shi)劑(ji)盒(he)

體(ti)液基(ji)質(zhi)金(jin)屬抑(yi)制(zhi)劑(ji)1（TIMP-1）活性(xing)比色(se)法(fa)定量檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

幹細胞成(cheng)脂(zhi)分化(hua)潛力(li)定(ding)性(xing)染色試(shi)劑(ji)盒(he)

載(zai)脂蛋白(bai)E3抗體(ti)

鈣(gai)穩態(tai)內(nei)質網(wang)蛋白抗體(ti)

巰基(ji)氧(yang)化(hua)酶(mei)2抗體(ti)

IZUMO4蛋白(bai)抗(kang)體(ti)

細胞分裂周(zhou)期蛋白(bai)7抗體(ti)

X染色體(ti)開放閱(yue)讀(du)框31抗體(ti)

跨膜(mo)蛋白(bai)208抗體(ti)

CCD-13Lu細胞APC標(biao)記(ji)人CD64單克隆(long)抗(kang)體(ti)

鋅指蛋(dan)白(bai)766抗體(ti)

三、培養註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先觀察細胞瓶(ping)是否完(wan)好，培(pei)養液(ye)是否有漏液(ye)、渾濁等現(xian)象，若有上述(shu)現(xian)象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和(he)我們(men)聯系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說明(ming)書，了解細胞相關信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態(tai)、所用培養基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子等，確(que)保(bao)細胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客戶自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸問(wen)題(ti)，部分細胞由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈碰(peng)亡破(po)碎形成碎片，是正(zheng)常現(xian)象。觀察好(hao)細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞直接混勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並接(jie)種到新(xin)的培養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行培養。

5. 請(qing)客戶用相同條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶收到細胞後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照(zhao)片，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於和(he)我司技術(shu)部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運輸的原因(yin)，個別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出(chu)現(xian)不穩定(ding)的情(qing)況，請及(ji)時和(he)我們(men)聯系(xi)，告知(zhi)細胞 的具體(ti)情(qing)況，以便我們(men)的技術人員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書細胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制的培養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。