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登革(ge)病(bing)毒(du)核酸分型檢(jian)測試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光PCR法(fa))公司相關產品(pin)IFNA4 Protein Human 重(zhong)組 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biao)簽)()效(xiao)價(jia)測定Enoxaparin NCI-H226(肺鱗癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞(bao))()含(han)量(liang)測定Trimebutine male
訂購信息(xi):
產品(pin)名(ming)稱(cheng):登革(ge)病(bing)毒(du)核酸分型檢(jian)測試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光PCR法(fa))
規格:50T
編號:BH-P96502
分類(lei):熒(ying)光PCR法(fa)
儲存(cun)條件(jian):-20℃避光保存,避免反(fan)復凍融(rong)。
運(yun)輸(shu):低溫、避光,快遞(di)免(mian)費送貨(huo)上門。
產品(pin)特點(dian):
◇高(gao)特異性(xing):與(yu)其(qi)他病(bing)毒(du)無交叉反(fan)應,無(wu)非特異性(xing)擴(kuo)增(zeng);
◇高(gao)靈敏(min)度:檢(jian)測靈(ling)敏度可達(da)10~100拷(kao)貝;
◇操(cao)作簡(jian)便(bian):該系列所有(you)試(shi)劑均(jun)采用(yong)相同的體(ti)系和(he)條件(jian),可同時(shi)進(jin)行多(duo)個(ge)檢(jian)測;
◇高(gao)通量(liang):多(duo)種(zhong)雙重PCR檢測以(yi)及三(san)重(zhong)PCR檢測試(shi)劑盒(he)。

準備(bei)物品(pin):
清(qing)理液(A) 毫升
染色(se)液(ye)(t B) 微(wei)升
稀(xi)釋液(ye)(C) 毫升
溶解液(ye)(tD) 毫升
產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu) 1份(fen)
使用(yong)及效(xiao)果:
PCR反(fan)應特點(dian)
(1) 特異性(xing)強
PCR反(fan)應的(de)特異性(xing)決(jue)定因素(su)為:
①引(yin)物與(yu)模板DNA特異正確的(de)結(jie)合;
②堿基(ji)配(pei)對原則;
③Taq DNA聚合酶(mei)合成(cheng)反(fan)應的(de)忠實性(xing);
④靶基(ji)因的(de)特異性(xing)與(yu)保守(shou)性(xing)。
其(qi)中引(yin)物與(yu)模板的正確結(jie)合是(shi)關鍵(jian)。引(yin)物與(yu)模板的結(jie)合及引(yin)物鏈(lian)的(de)延伸(shen)是(shi)遵循(xun)堿基(ji)配(pei)對原則的。聚合酶(mei)合成(cheng)反(fan)應的(de)忠實性(xing)及Taq DNA聚合酶(mei)耐(nai)高(gao)溫性(xing),使(shi)反(fan)應中(zhong)模板與(yu)引(yin)物的結(jie)合(復性(xing))可以在較(jiao)高(gao)的溫(wen)度下(xia)進(jin)行,結(jie)合的(de)特異性(xing)大(da)大(da)增(zeng)加(jia),被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶基(ji)因片(pian)段(duan)也(ye)就(jiu)能(neng)保持很(hen)高(gao)的正確度。再(zai)通過選擇(ze)特異性(xing)和(he)保守(shou)性(xing)高(gao)的靶基(ji)因區(qu),其(qi)特異性(xing)程度就(jiu)更(geng)高(gao)。
(2) 靈敏(min)度高(gao)
PCR產物的生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以指數(shu)方(fang)式(shi)增(zeng)加(jia)的(de),能(neng)將皮克(pg=10-12g)量級的(de)起(qi)始待(dai)測模板擴(kuo)增(zeng)到(dao)微(wei)克(ug=10-6g)水平(ping)。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細(xi)胞(bao)中(zhong)檢(jian)出(chu)壹(yi)個(ge)靶細(xi)胞(bao);在病(bing)毒(du)的檢測中(zhong),PCR的靈(ling)敏度可達(da)3個(ge)RFU(空(kong)斑形(xing)成(cheng)單位);在細菌學(xue)中zui小(xiao)檢出(chu)率為3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡便(bian)、快速(su)
PCR反(fan)應用(yong)耐(nai)高(gao)溫的(de)Taq DNA聚合酶(mei),壹(yi)次性(xing)地(di)將反(fan)應液(ye)加好(hao)後(hou),即在DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和(he)水(shui)浴(yu)鍋(guo)上進(jin)行變(bian)性(xing)-退(tui)火(huo)-延伸(shen)反(fan)應,壹(yi)般在2~4 小(xiao)時(shi)完(wan)成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反(fan)應。擴(kuo)增(zeng)產(chan)物壹般用(yong)電泳(yong)分析,不(bu)壹定要用(yong)同位素,無(wu)放(fang)射性(xing)汙(wu)染(ran)、易(yi)推廣。
(4) 對標(biao)本(ben)的純度要(yao)求(qiu)低
不(bu)需要(yao)分離(li)病(bing)毒(du)或細菌及培(pei)養(yang)細胞(bao),DNA 粗(cu)制(zhi)品(pin)及總(zong)RNA均可作為擴(kuo)增(zeng)模板。可直(zhi)接用(yong)臨床標(biao)本(ben)如血液(ye)、體(ti)腔液、洗嗽(sou)液、毛(mao)發、細胞(bao)、活(huo)PCR技術(shu)概論。
雜(za)交(jiao)瘤(liu)(B類(lei));Z1510A2G6A2F8環戊(wu)[fg]並四(si)苯-1,2-二(er)酮Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione
INSR Others Human Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Short Isoform ) 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 二(er)苯並[a,h]蒽(en)(>95.0%(GC))Dibenz[a,h]anthracene>95.0%(GC)
葡萄(tao)膜色(se)素(su)細胞(bao);UM二(er)苯並[b,def]芘(>98.0%(GC))Dibenzo[b,def]chrysene>98.0%(GC)
氣管(guan)上皮細(xi)胞(bao)(HTEpiC)(5×105 )1,2:8,9-二(er)苯並五(wu)苯1,2:8,9-Dibenzopentacene
CL-0295MV3(色(se)素(su)瘤細胞(bao))5×106cells/瓶×2二(er)苯並[g,p]稠二(er)萘(>98.0%(HPLC))Dibenzo[g,p]chrysene>98.0%(HPLC)
CL-0467WPMY-1(正常前列腺基(ji)質(zhi)永(yong)生(sheng)化(hua)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2十(shi)八(ba)烷()分析,≥99.5%(GC)Octadecane
CXCL16 Others Rat 大鼠(shu) CXCL16 / SR-PSOX 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 2-辛酮()分析,≥99.5%(GC)2-Octanone
大鼠(shu)虹膜(mo)色(se)素(su)上皮細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL蓓薩羅(luo)丁()>99%Bexarotene
U-373MG腦(nao)神(shen)經膠(jiao)質(zhi)瘤細(xi)胞(bao) U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS>99%,ARKetoprofen
IL1B Protein Rabbit 重組(zu)兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白(bai)()HPLC>98%,Ketoprofen
登革(ge)病(bing)毒(du)核酸分型檢(jian)測試(shi)劑盒(he)(熒(ying)光PCR法(fa))CDH15 Others Rat 大鼠(shu) Cadherin-15 / CDH15 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) N-氧基(ji)帕(pa)潘立酮美(mei)國(guo)進(jin)口Paliperidone N-Oxide
大鼠(shu)肝星(xing)形細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL帕(pa)潘立酮-d4美(mei)國(guo)進(jin)口Paliperidone-d4
6T-CEMT細胞(bao)白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao) The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳酸(suan)美(mei)國(guo)進(jin)口Ciprofloxacin lactate
FGFBP3 Protein Human 重組(zu) FGFBP3 蛋白(bai) (His 標(biao)簽)甲酰美(mei)國(guo)進(jin)口Formyl Ciprofloxacin
Beta-TC-6(小(xiao)鼠胰(yi)島素瘤(liu)胰(yi)島β細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)HLF6'-(二(er)乙(yi)氨基(ji))-1',2'-苯並熒(ying)烷(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)6'-(Diethylamino)-1',2'-benzofluoran
檢測步(bu)驟(zhou):
壹、 試(shi)劑的(de)準備(bei)
從試(shi)劑盒(he)中取出熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合物(Enzymes MIX),冰上融(rong)化並振(zhen)蕩混(hun)勻後(hou),10000rpm離心(xin)10s。
設所(suo)需(xu)要的PCR反(fan)應管(guan)管數(shu)為N(N=樣本(ben)數(shu)+1管陰性(xing)對(dui)照+1管陽(yang)性(xing)對(dui)照),每(mei)個(ge)測試(shi)反(fan)應體(ti)系配(pei)制(zhi)如下(xia)表(biao):
試(shi)劑 每(mei)個(ge)反(fan)應加(jia)入的量 N個(ge)反(fan)應加(jia)入的量
熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
(1) 計算(suan)好各(ge)試(shi)劑的(de)使用(yong)量,加入壹適當(dang)體(ti)積潔(jie)凈(jing)離心管(guan)中(zhong),充(chong)分混(hun)勻,10000rpm離心(xin)10s,向設定的N個(ge)PCR反(fan)應管(guan)中分別(bie)加(jia)入15μL熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye),向每(mei)管(guan)中(zhong)加(jia)入處(chu)理後(hou)樣(yang)品(pin)或陰性(xing)對(dui)照(NTC)和陽(yang)性(xing)對(dui)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shi)離(li)心(xin)10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條(tiao)件
將各(ge)反(fan)應管(guan)放入定量PCR儀(yi)器(qi)的反(fan)應槽(cao)內(nei)。
循環(huan)條件(jian):
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收(shou)集(ji)熒(ying)光信號。報(bao)告(gao)基(ji)團:設置(zhi)為FAM。淬滅(mie)基(ji)團:NONE,請(qing)勿選擇(ze)ROX參(can)比熒(ying)光。