新布(bu)尼亞(ya)病毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（熒(ying)光(guang)PCR法）

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 產品名(ming)稱：新布(bu)尼亞(ya)病毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（熒(ying)光(guang)PCR法）
規(gui)格(ge)：50T
編(bian)號：BH-P96537
分(fen)類：熒(ying)光(guang)PCR法
儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)：-20℃避(bi)光保存(cun)，避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸：低溫(wen)、避光(guang)，快(kuai)遞(di)免(mian)費(fei)送貨(huo)上門。

準(zhun)備(bei)物(wu)品：
清(qing)理液(ye)（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色液（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解液（tD）                                   毫(hao)升
產品說(shuo)明(ming)書(shu)                                   1份(fen)
使(shi)用(yong)及效(xiao)果(guo)：
產品特(te)點：
◇高(gao)特異性(xing)：與其他(ta)病毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應，無(wu)非特異(yi)性(xing)擴增(zeng)；
◇高(gao)靈敏(min)度：檢(jian)測靈(ling)敏(min)度可(ke)達10~100拷(kao)貝；
◇操作(zuo)簡(jian)便(bian)：該系列(lie)所(suo)有試劑均采用相同的(de)體系和條(tiao)件(jian)，可(ke)同時進行多(duo)個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高(gao)通量(liang)：多(duo)種雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以及三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測試劑盒。

PCR反應特(te)點
(1) 特(te)異性(xing)強
PCR反應的(de)特異(yi)性(xing)決定(ding)因(yin)素(su)為：
①引(yin)物(wu)與模板(ban)DNA特(te)異正(zheng)確(que)的(de)結(jie)合；
②堿(jian)基配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合酶合成(cheng)反應的(de)忠實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基因(yin)的(de)特異(yi)性(xing)與保守性(xing)。
其中(zhong)引(yin)物(wu)與模板(ban)的(de)正(zheng)確(que)結(jie)合是關鍵。引(yin)物(wu)與模板(ban)的(de)結(jie)合及引(yin)物(wu)鏈(lian)的(de)延伸(shen)是遵循(xun)堿基配對(dui)原(yuan)則的(de)。聚合酶合成(cheng)反應的(de)忠實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶耐高溫(wen)性(xing)，使(shi)反應中(zhong)模板(ban)與引(yin)物(wu)的(de)結(jie)合(復(fu)性(xing))可(ke)以在較高(gao)的(de)溫(wen)度下(xia)進行，結(jie)合的(de)特異(yi)性(xing)大(da)大(da)增(zeng)加(jia)，被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶基因(yin)片(pian)段也就能(neng)保(bao)持很高的(de)正(zheng)確(que)度(du)。再(zai)通過選(xuan)擇特異(yi)性(xing)和保(bao)守性(xing)高的(de)靶基因(yin)區(qu)，其特(te)異(yi)性(xing)程(cheng)度(du)就更高。
(2) 靈(ling)敏(min)度高(gao)
PCR產物(wu)的(de)生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以指數方式(shi)增(zeng)加(jia)的(de)，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的(de)起(qi)始待(dai)測(ce)模板(ban)擴增(zeng)到微克(ug=10-6g)水平。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細胞(bao)中(zhong)檢出(chu)壹個靶細胞(bao)；在(zai)病毒(du)的(de)檢測(ce)中，PCR的(de)靈敏(min)度可(ke)達3個(ge)RFU(空(kong)斑形(xing)成(cheng)單位)；在(zai)細菌(jun)學(xue)中zui小(xiao)檢出(chu)率為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便(bian)、快(kuai)速
PCR反應用(yong)耐高溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合酶，壹次(ci)性(xing)地(di)將(jiang)反應液(ye)加(jia)好(hao)後，即在DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和水浴(yu)鍋(guo)上進行變性(xing)-退(tui)火-延(yan)伸反應，壹般(ban)在2～4 小(xiao)時完成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反應。擴(kuo)增(zeng)產物(wu)壹般(ban)用電(dian)泳分析，不壹定(ding)要用(yong)同位素(su)，無(wu)放(fang)射(she)性(xing)汙染、易推(tui)廣。
(4) 對(dui)標(biao)本的(de)純度(du)要求(qiu)低
不(bu)需要分離病(bing)毒或(huo)細菌(jun)及(ji)培養細胞(bao)，DNA 粗(cu)制品(pin)及總(zong)RNA均(jun)可作為擴增(zeng)模板(ban)。可直接用臨床(chuang)標(biao)本如(ru)血(xue)液、體腔(qiang)液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛發(fa)、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概論。

檢(jian)測步驟：
壹、 試(shi)劑的(de)準備(bei)
從(cong)試劑盒中取(qu)出熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化並振蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設所(suo)需要的(de)PCR反應管管數為N(N=樣(yang)本數+1管陰(yin)性(xing)對照+1管陽性(xing)對照)，每(mei)個測試反應體(ti)系配(pei)制如(ru)下(xia)表：
試(shi)劑 每(mei)個反應加(jia)入(ru)的(de)量(liang) N個(ge)反應加(jia)入(ru)的(de)量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混(hun)合物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好(hao)各試(shi)劑(ji)的(de)使(shi)用(yong)量(liang)，加(jia)入(ru)壹適當體積潔(jie)凈離心(xin)管中(zhong)，充(chong)分混(hun)勻(yun)，10000rpm離心(xin)10s，向設定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應管中(zhong)分(fen)別加(jia)入(ru)15μL熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)，向每(mei)管中(zhong)加(jia)入(ru)處理後(hou)樣(yang)品(pin)或(huo)陰(yin)性(xing)對照(NTC)和陽性(xing)對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反應條(tiao)件(jian)
將(jiang)各反應管放(fang)入定(ding)量(liang)PCR儀(yi)器(qi)的(de)反應槽內。
循(xun)環條(tiao)件(jian):
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變性(xing) 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延(yan)伸時收集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報告(gao)基團(tuan)：設置(zhi)為FAM。淬(cui)滅基團(tuan)：NONE，請勿(wu)選(xuan)擇ROX參(can)比熒(ying)光(guang)。

羊(yang)膜細胞(bao);WISH美西林/氮(dan)脒*Mecillinam>95%,BR

IL17RB Others Human  IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照) */安宮黃(huang)體素Medroxyprogesterone >98%,BR

CL-0343HA(羊(yang)膜細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2*()Medroxyprogesterone >98%,

P3-NS-1/1-Ag4.1細(xi)胞(bao)，骨(gu)髓瘤(liu)細(xi)胞(bao) T細(xi)胞(bao)白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao),6T-CEM細(xi)胞(bao) EB病(bing)毒轉化的(de)B細(xi)胞(bao);KM9402*/他(ta)巴唑(zuo)/2--1-甲(jia)基咪唑(zuo)Methimazole>98%,USP 32

幼蚊(wen)細胞(bao);C6/36*()Methimazole>98%,
IL18 Protein Cynomolgus 重(zhong)組(zu)食蟹(xie)猴(hou) IL-18 / IL-1F4 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽(qian))聚(ju)乙二(er)醇6000分(fen)子量(liang)5,000~7,000,分(fen)子生(sheng)物(wu)學級(ji)PEG 6000

NCTC 1469(小(xiao)鼠(shu)正(zheng)常(chang)肝細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 WEHI 22.1(B細(xi)胞(bao))吐(tu)溫(wen)20CPTween 20

CL-0305SF-295(XG惡(e)性(xing)膠質瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2曲拉通X-100>98%,分(fen)子生(sheng)物(wu)學級(ji)Triton X-100

PDGFRB Others Rat 大(da)鼠(shu) PDGFRB / PDGFR-1 細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照) D-葡萄(tao)糖(tang)醛(quan)酸(suan)>98%,進分D-Glucuronic acid

脈絡叢(cong)內皮(pi)細胞(bao)總(zong)RNAHCPEC NAL-別(bie)*>99%,BRL(+)-allo-Threonine
新布(bu)尼亞(ya)病毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒（熒(ying)光(guang)PCR法）晶(jing)狀(zhuang)體上皮(pi)細胞(bao) (HLEpiC)( 5×105 ) HUVEC-12, 臍(qi)靜(jing)脈血管內皮(pi)細胞(bao)系 Human13-乙(yi)基-17-羥基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左(zuo)*雜質B)美國進口(kou)13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B)

細(xi)胞(bao);C-33A17-去(qu)乙(yi)酰(xian)基諾孕(yun)酯美國進口(kou)17-Desacetyl Norgestimate

表(biao)皮(pi)色素(su)細胞(bao)-深(shen)色素(HEM)( 5×105 )左(zuo)西孟坦(tan)美國進口(kou)Levosimendan

rCF, 大(da)鼠(shu)心臟(zang)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)利(li)奈唑(zuo)酮-d3美國進口(kou)Linezolid-d3

T瘤(liu)轉基因(yin)細(xi)胞(bao);Jurkat D,E 大(da)鼠(shu)腎(shen)小(xiao)管平(ping)滑(hua)肌細胞(bao)*培養基 100mL12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrateHPLC≥98%，12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate