乙型腦(nao)炎(yan)病(bing)毒核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒（熒(ying)光PCR法）

訂(ding)購(gou)信息(xi)：
 產品(pin)名稱(cheng)：乙型腦(nao)炎(yan)病(bing)毒核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒(熒(ying)光PCR法)
規格：50T
編號(hao)：BH-P96581
分類(lei)：熒(ying)光PCR法
儲存(cun)條件：-20℃避光保存，避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
運輸(shu)：低(di)溫、避(bi)光，快(kuai)遞(di)免(mian)費(fei)送貨上(shang)門。
產品(pin)特(te)點：
◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing)：與(yu)其(qi)他(ta)病(bing)毒(du)無交叉反(fan)應，無非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增；
◇高(gao)靈(ling)敏(min)度：檢(jian)測靈(ling)敏(min)度可(ke)達10~100拷貝(bei)；
◇操作簡(jian)便(bian)：該系(xi)列(lie)所有試劑均(jun)采用(yong)相同的體系和(he)條件，可同時進(jin)行(xing)多(duo)個檢(jian)測；
◇高(gao)通量(liang)：多種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測試劑盒。

準(zhun)備物品(pin)：
清(qing)理液(ye)（A）                                   毫升(sheng)
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫升(sheng)
溶解(jie)液(ye)（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說明(ming)書(shu)                                   1份
使用(yong)及(ji)效(xiao)果(guo)：
PCR反(fan)應特(te)點
(1) 特(te)異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反(fan)應的特(te)異(yi)性(xing)決(jue)定因素為(wei)：
①引(yin)物與(yu)模板DNA特(te)異(yi)正(zheng)確的結(jie)合；
②堿基配對原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合成(cheng)反(fan)應的忠(zhong)實性；
④靶基(ji)因的特(te)異(yi)性(xing)與(yu)保守性。
其(qi)中(zhong)引(yin)物與(yu)模板的正(zheng)確結(jie)合是(shi)關(guan)鍵。引(yin)物與(yu)模板的結(jie)合及(ji)引(yin)物鏈的延伸是(shi)遵(zun)循(xun)堿基配對原(yuan)則的。聚(ju)合(he)酶(mei)合成(cheng)反(fan)應的忠(zhong)實性及(ji)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐高(gao)溫性，使(shi)反(fan)應中(zhong)模板與(yu)引(yin)物的結(jie)合(復性)可以(yi)在較(jiao)高(gao)的溫(wen)度(du)下進(jin)行(xing)，結(jie)合的特(te)異(yi)性(xing)大大增加(jia)，被擴(kuo)增的靶(ba)基(ji)因片(pian)段(duan)也就能(neng)保(bao)持很高(gao)的正(zheng)確度。再通過選擇(ze)特(te)異(yi)性(xing)和保守性(xing)高(gao)的靶(ba)基(ji)因區(qu)，其(qi)特(te)異(yi)性(xing)程(cheng)度(du)就(jiu)更高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度高(gao)
PCR產物的生成量(liang)是以(yi)指數(shu)方式(shi)增加(jia)的，能(neng)將皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的起(qi)始(shi)待(dai)測模板擴(kuo)增到(dao)微克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能從100萬個細胞中(zhong)檢(jian)出(chu)壹(yi)個靶(ba)細胞；在(zai)病毒的檢(jian)測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏(min)度可(ke)達3個RFU(空(kong)斑(ban)形(xing)成單(dan)位(wei))；在細菌學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢(jian)出(chu)率為3個細菌。
(3) 簡便(bian)、快(kuai)速
PCR反(fan)應用(yong)耐高(gao)溫的Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹次性地(di)將反(fan)應液(ye)加(jia)好(hao)後(hou)，即在DNA擴(kuo)增液(ye)和水(shui)浴(yu)鍋上(shang)進(jin)行(xing)變性(xing)-退火-延伸反(fan)應，壹般(ban)在2～4 小(xiao)時完(wan)成擴(kuo)增反(fan)應。擴(kuo)增產物壹般(ban)用(yong)電泳(yong)分(fen)析(xi)，不壹(yi)定要用(yong)同位(wei)素，無放射(she)性汙(wu)染(ran)、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對標本(ben)的純(chun)度(du)要求低(di)
不需(xu)要分離病毒(du)或(huo)細菌及(ji)培(pei)養細胞，DNA 粗制(zhi)品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可作(zuo)為(wei)擴(kuo)增模板。可直(zhi)接用(yong)臨(lin)床標本(ben)如血液(ye)、體腔液(ye)、洗嗽(sou)液(ye)、毛(mao)發(fa)、細胞、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概(gai)論。
牛腎細胞;MDBK(BVDV-free)（）Methimazole含量(liang)測定

小(xiao)鼠(shu)肉瘤瘤(liu)株;S180 小(xiao)鼠(shu)表皮(pi)角(jiao)化細胞*培(pei)養基 100mL枸櫞酸(suan)氯米芬（）Clomiphene 含量(liang)測定

羊膜間(jian)充(chong)質(zhi)基質(zhi)細胞 Human甲磺酸(suan)雙(shuang)氫毒堿（）Dihydroergotoxine mesylate含量(liang)測定

TNFRSF25 Others Human  TNFRSF25 / DDR3 / APO3 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 6-醛基(ji)異(yi)麥(mai)冬(dong)黃烷(wan)酮A()6-Aldehydoisoophiopogonanone AHPLC≥98%,

前(qian)列腺(xian)上(shang)皮細胞HPEpiC（）Chlorprothixene檢(jian)查
CN3 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) Coactin 3 / CN3 細胞裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 刺芒柄花素(su)>98%,BRFormononetin

大鼠(shu)晶狀體上(shang)皮細胞*培(pei)養基 100mL大豆(dou)素,(）HPLC>98%,分析(xi)Daidzein

EB (NBL-4)牛胚氣管細胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培(pei)養基(GIBCO)+10%FBS巴(ba)馬(ma)汀(ting)氯化物壹水(shui)合(he)物(分析(xi))分析(xi)Palmatine chloride hydrate

IL36G Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠(shu) IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標簽(qian))BSA[=N,O-雙(shuang)(基(ji)矽(gui)基(ji))乙酰(xian)胺(an)](>75.0%(GC))>75.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide

NCI-H446(小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(細胞)BSTFA[=N,O-雙(shuang)(基(ji)矽(gui)基(ji))三氟(fu)代乙酰(xian)胺(an)](>95.0%(GC),用(yong)於氣相色(se)譜(pu))
乙型腦(nao)炎(yan)病(bing)毒核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒(熒(ying)光PCR法)NCI-H209 小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞O-去甲美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)O-Desmethyl Carvedilol

GH3, 大鼠(shu)垂體生長(chang)激素腺(xian)瘤4'-羥苯(ben)基(ji)美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)4'-Hydroxyphenyl Carvedilol

大鼠(shu)主動脈(mai)平滑肌細胞(S)-(-)-5'-芐(bian)氧(yang)基(ji)苯(ben)基(ji)美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)(S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol

惡性(xing)非(fei)霍奇(qi)金(jin)瘤患者(zhe)的自然(ran)殺傷(shang)細胞;NK-92 [NK92] 胰(yi)島(dao)β細胞*培(pei)養基 100mL(R)-(+)-O-去甲美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)(R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol

永生化細胞;CNLMG-B5537LC5-甲基胞(bao)嘧(mi)啶(ding) >98%,BR5-methylcytosine
檢(jian)測步(bu)驟：
壹、 試劑(ji)的準(zhun)備
從試(shi)劑盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融(rong)化並(bing)振蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離心10s。
設所需(xu)要的PCR反(fan)應管管數(shu)為(wei)N(N=樣本數(shu)+1管陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1管陽(yang)性(xing)對照(zhao))，每個測(ce)試反(fan)應體系配制(zhi)如下表：
試劑(ji) 每個反(fan)應加(jia)入的量(liang) N個反(fan)應加(jia)入的量(liang)
熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好(hao)各試劑的使(shi)用(yong)量(liang)，加(jia)入壹(yi)適(shi)當(dang)體積潔(jie)凈(jing)離(li)心管中(zhong)，充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，10000rpm離心10s，向設(she)定的N個PCR反(fan)應管中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)入15μL熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye)，向每(mei)管中(zhong)加(jia)入處(chu)理(li)後(hou)樣品(pin)或(huo)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和陽(yang)性對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離(li)心10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條件
將各反(fan)應管放(fang)入定量(liang)PCR儀(yi)器的反(fan)應槽內。
循環(huan)條件:
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shi)收集(ji)熒(ying)光信號(hao)。報告(gao)基(ji)團：設置(zhi)為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基(ji)團：NONE，請勿(wu)選(xuan)擇(ze)ROX參比(bi)熒(ying)光。