鯉(li)浮(fu)腫(zhong)病毒(du)（CEV）核酸檢測試劑(ji)盒

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 產品(pin)名(ming)稱：鯉(li)浮(fu)腫(zhong)病毒(du)（CEV）核(he)酸檢測試劑(ji)盒
規格(ge)：50T
編號：BH-P96839
分(fen)類：熒(ying)光(guang)PCR法
儲存(cun)條件：-20℃避(bi)光保存(cun)，避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
運輸(shu)：低溫(wen)、避(bi)光，快遞免(mian)費(fei)送貨(huo)上門(men)。
產品(pin)特點：
◇高(gao)特(te)異性(xing)：與(yu)其他病(bing)毒(du)無交叉(cha)反應(ying)，無非(fei)特(te)異性(xing)擴增；
◇高(gao)靈敏度：檢測靈(ling)敏度可達10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便：該(gai)系列所有試劑(ji)均(jun)采(cai)用(yong)相(xiang)同的(de)體(ti)系和(he)條件，可同(tong)時進行(xing)多(duo)個(ge)檢測；
◇高(gao)通量：多(duo)種雙重(zhong)PCR檢測以及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢測試劑(ji)盒。

準備(bei)物(wu)品(pin)：
清理液(ye)（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微升
稀(xi)釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升
產品(pin)說明書(shu)                                   1份
使用及(ji)效(xiao)果(guo)：
PCR反(fan)應(ying)特點
(1) 特異性(xing)強
PCR反(fan)應(ying)的(de)特異性(xing)決(jue)定因素為：
①引物(wu)與模(mo)板(ban)DNA特異正(zheng)確的結合(he)；
②堿(jian)基(ji)配對原則(ze)；
③Taq DNA聚合(he)酶合(he)成(cheng)反應的忠(zhong)實性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因的(de)特異性(xing)與(yu)保守性(xing)。
其中(zhong)引物(wu)與模板的正確結合(he)是(shi)關鍵(jian)。引(yin)物與(yu)模板的(de)結合(he)及(ji)引物(wu)鏈的(de)延(yan)伸是(shi)遵循(xun)堿(jian)基(ji)配對原則(ze)的。聚合(he)酶合(he)成(cheng)反應的忠(zhong)實性(xing)及(ji)Taq DNA聚合(he)酶耐高溫(wen)性(xing)，使(shi)反應中(zhong)模板(ban)與引物的結合(he)(復(fu)性(xing))可以在較(jiao)高的溫(wen)度(du)下進行(xing)，結(jie)合(he)的(de)特(te)異性(xing)大(da)大增加，被擴增的靶基(ji)因片(pian)段(duan)也就(jiu)能(neng)保持很(hen)高的正(zheng)確度。再通過選擇特(te)異性(xing)和(he)保守性(xing)高(gao)的靶基(ji)因區(qu)，其特異性(xing)程(cheng)度就更高(gao)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wu)的生(sheng)成(cheng)量是(shi)以指數(shu)方(fang)式增加(jia)的，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(pg=10-12g)量級(ji)的(de)起(qi)始待測模板擴增到微克(ke)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wan)個(ge)細(xi)胞(bao)中(zhong)檢出(chu)壹個(ge)靶(ba)細(xi)胞(bao)；在(zai)病毒的檢測中(zhong)，PCR的靈敏度可達3個(ge)RFU(空(kong)斑形成(cheng)單位)；在(zai)細(xi)菌(jun)學中(zhong)zui小(xiao)檢出(chu)率為3個(ge)細(xi)菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快速
PCR反應用(yong)耐高溫(wen)的(de)Taq DNA聚合(he)酶，壹次(ci)性(xing)地(di)將反應液(ye)加(jia)好後，即在DNA擴增液(ye)和(he)水浴(yu)鍋上進行(xing)變(bian)性(xing)-退火(huo)-延(yan)伸反應(ying)，壹般(ban)在2～4 小(xiao)時完成(cheng)擴增反應。擴增產物(wu)壹般(ban)用電泳分析(xi)，不(bu)壹(yi)定要(yao)用同(tong)位素，無放(fang)射性(xing)汙染(ran)、易推廣(guang)。
(4) 對標(biao)本的純度要(yao)求低(di)
不(bu)需要(yao)分(fen)離病(bing)毒(du)或(huo)細(xi)菌(jun)及(ji)培養(yang)細(xi)胞(bao)，DNA 粗制品(pin)及(ji)總RNA均(jun)可(ke)作(zuo)為擴增模板。可(ke)直(zhi)接用臨(lin)床(chuang)標(biao)本如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔(qiang)液(ye)、洗嗽液(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技術概論(lun)。
LAYN Others Rat 大(da)鼠(shu) Layilin / LAYN 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 擬(ni)參皂苷F11()Pseudoginsenoside F11HPLC≥98%，

CM-H042肝(gan)內(nei)膽管上皮(pi)細(xi)胞(bao)*培(pei)養基(ji)100mL擬參皂苷RT5()Pseudoginsenoside RT5HPLC≥98%，

HCT116細(xi)胞(bao)，結(jie)直腸(chang)癌(ai)細(xi)胞(bao) 色素瘤細(xi)胞(bao),HME1細(xi)胞(bao) 胚(pei)肺二(er)倍(bei)體(ti)細(xi)胞(bao);KMB-17（）AllantoinHPLC≥98%，

GBC-SD(膽囊癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2檸(ning)檬苦(ku)素；吳茱萸內(nei)酯(,吳茱萸提(ti)取(qu))LimoninHPLC≥98%，,吳茱萸提(ti)取(qu)

BACE1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) BACE-1 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 檸(ning)檬苦(ku)素，黃柏內(nei)酯(zhi)(,橙皮(pi)提(ti)取(qu)) LimoninHPLC≥98%,,橙皮(pi)提(ti)取(qu)
LAYN Others Rat 大(da)鼠(shu) Layilin / LAYN 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 洋(yang)川芎(xiong)內(nei)酯I()HPLC≥98%,Senkyunolide I

成(cheng)骨(gu)細(xi)胞(bao)Many types of cells　5 × 105方(1ml)洋(yang)川芎(xiong)內(nei)酯H()HPLC≥98%,Senkyunolide H

HCC-9204細(xi)胞(bao)，肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao),HeLa細(xi)胞(bao) 角(jiao)膜上皮(pi)細(xi)胞(bao)cDNAHCEpiC cDNAINCB28060>98,ATP競爭(zheng)性(xing)的(de)c-MET抑制劑(ji)INCB-28060

非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞(bao);BS-C-1氨芬(fen)酸鈉(na)>99%Amfenac

CSF3R Others Human  CD114 / G-CSFR / GCSFR 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 桑皮(pi)苷A（）HPLC≥98%，Mulberroside A
鯉(li)浮(fu)腫(zhong)病毒(du)（CEV）核(he)酸檢測試劑(ji)盒小(xiao)鼠(shu)色素瘤瘤(liu)株;B16 小(xiao)鼠(shu)皮(pi)膚肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)*培(pei)養基(ji) 100mL福氏(shi)*佐劑(ji)shēng huà shì jì容(rong)量：1公(gong)斤

H9c2大(da)鼠(shu)心肌(ji)細(xi)胞(bao)(ATCC來源) Rattus2,2-二(er)氧(yang)基(ji)-2-本基(ji)本同 2,2-Dimqthoxy-2-phqnylccqtophqnonq 4620/4/8

EFNA4 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) EFNA4 / Ephrin-A4 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 造沸石shēng huà shì jì容(rong)量：RT25克

內皮(pi)細(xi)胞(bao)HLECshēng huà shì jì容(rong)量：RT1克

CDH17 Others Rat 大鼠(shu) Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 54827-17-73,3',5,5'-四(si)聯本胺3 3' 5 5'-TETRAmetxYLBENZIDINE FREE BASE
檢測步(bu)驟：
壹、 試劑(ji)的準備(bei)
從試劑(ji)盒中(zhong)取(qu)出(chu)熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融化(hua)並振蕩混勻後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設所需要(yao)的(de)PCR反應管管數(shu)為N(N=樣(yang)本數(shu)+1管陰性(xing)對照+1管陽性(xing)對照)，每(mei)個(ge)測(ce)試反(fan)應體系配制如(ru)下(xia)表：
試劑(ji) 每(mei)個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入的量 N個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入的量
熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好各試劑(ji)的使用(yong)量，加(jia)入壹適當體積(ji)潔(jie)凈離心(xin)管中(zhong)，充分混(hun)勻，10000rpm離心(xin)10s，向(xiang)設定的(de)N個(ge)PCR反(fan)應管中(zhong)分別(bie)加入15μL熒(ying)光(guang)PCR反應液(ye)，向(xiang)每(mei)管中(zhong)加入處理後樣(yang)品(pin)或(huo)陰性(xing)對照(NTC)和(he)陽性(xing)對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時離心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反應條件
將各反(fan)應(ying)管放(fang)入定量PCR儀器的反(fan)應(ying)槽(cao)內。
循(xun)環(huan)條件:
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性(xing) 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸時收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號。報(bao)告(gao)基(ji)團：設置為FAM。淬(cui)滅基(ji)團：NONE，請(qing)勿選擇ROX參(can)比(bi)熒(ying)光(guang)。