西尼(ni)羅病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)（熒光PCR法(fa)）

產(chan)品(pin)特(te)點(dian)：
◇高特(te)異(yi)性(xing)：與其他病(bing)毒(du)無交(jiao)叉(cha)反應(ying)，無非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增；
◇高靈(ling)敏(min)度：檢測靈(ling)敏(min)度可(ke)達(da)10~100拷貝(bei)；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)：該系列(lie)所(suo)有(you)試劑(ji)均采(cai)用(yong)相(xiang)同的(de)體系和(he)條件(jian)，可(ke)同時(shi)進行(xing)多個(ge)檢測(ce)；
◇高通(tong)量(liang)：多種雙(shuang)重PCR檢測(ce)以及(ji)三(san)重PCR檢測(ce)試劑(ji)盒(he)。

訂(ding)購(gou)信(xin)息：
 產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：西尼(ni)羅病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）
規格(ge)：50T
編(bian)號：BH-P96627
分(fen)類：熒光PCR法
儲(chu)存條(tiao)件：-20℃避光保(bao)存，避(bi)免反復凍融。
運輸：低(di)溫、避(bi)光，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上門(men)。

準(zhun)備(bei)物品(pin)：
清理液(ye)（A）                                   毫升
染色(se)液(ye)（t B）                                   微升
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫升
溶(rong)解液(ye)（tD）                                   毫升
產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)                                   1份(fen)
使用(yong)及(ji)效果(guo)：
PCR反應(ying)特點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反應(ying)的(de)特異(yi)性(xing)決(jue)定因(yin)素為(wei)：
①引物(wu)與(yu)模(mo)板DNA特異(yi)正(zheng)確(que)的(de)結合；
②堿基(ji)配對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶合成反應(ying)的(de)忠(zhong)實(shi)性；
④靶(ba)基(ji)因(yin)的(de)特異(yi)性(xing)與保(bao)守(shou)性。
其中引物(wu)與(yu)模(mo)板的(de)正(zheng)確(que)結合是關鍵(jian)。引物(wu)與(yu)模(mo)板的(de)結合及引物(wu)鏈(lian)的(de)延伸(shen)是(shi)遵循堿基(ji)配對(dui)原則(ze)的(de)。聚(ju)合酶合成反應(ying)的(de)忠(zhong)實(shi)性及Taq DNA聚(ju)合酶耐(nai)高(gao)溫性(xing)，使反應(ying)中模(mo)板與引物(wu)的(de)結合(復性(xing))可(ke)以在較高(gao)的(de)溫度(du)下(xia)進行(xing)，結合的(de)特異(yi)性(xing)大大增加(jia)，被擴(kuo)增的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)片段也(ye)就能(neng)保(bao)持很(hen)高的(de)正(zheng)確(que)度。再通(tong)過(guo)選(xuan)擇特(te)異(yi)性(xing)和(he)保(bao)守(shou)性高(gao)的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)區，其特(te)異(yi)性(xing)程度就更(geng)高。
(2) 靈(ling)敏(min)度高
PCR產(chan)物(wu)的(de)生成(cheng)量(liang)是以指數(shu)方式增加(jia)的(de)，能將(jiang)皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的(de)起始(shi)待(dai)測模(mo)板擴(kuo)增到微克(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細胞(bao)中檢出壹個(ge)靶(ba)細(xi)胞；在病(bing)毒(du)的(de)檢測(ce)中，PCR的(de)靈(ling)敏(min)度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形成單(dan)位)；在細菌(jun)學(xue)中zui小(xiao)檢(jian)出率(lv)為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便(bian)、快速
PCR反應(ying)用(yong)耐(nai)高(gao)溫的(de)Taq DNA聚(ju)合酶，壹次(ci)性(xing)地(di)將反應(ying)液(ye)加(jia)好(hao)後(hou)，即在DNA擴(kuo)增液(ye)和(he)水浴鍋(guo)上(shang)進行(xing)變性(xing)-退火-延伸(shen)反應(ying)，壹般在2～4 小(xiao)時(shi)完(wan)成擴(kuo)增反應(ying)。擴(kuo)增產(chan)物(wu)壹般用(yong)電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)，不(bu)壹定要用(yong)同(tong)位素，無放(fang)射(she)性汙染(ran)、易(yi)推(tui)廣。
(4) 對(dui)標本(ben)的(de)純度要求(qiu)低
不(bu)需要分(fen)離病(bing)毒(du)或(huo)細(xi)菌(jun)及培養(yang)細(xi)胞，DNA 粗制品(pin)及(ji)總RNA均可(ke)作(zuo)為擴(kuo)增模(mo)板。可(ke)直接(jie)用(yong)臨(lin)床標本(ben)如(ru)血液(ye)、體腔液(ye)、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發、細(xi)胞、活(huo)PCR技術(shu)概論。

檢測(ce)步驟(zhou)：
壹、 試劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei)
從試劑(ji)盒(he)中取(qu)出熒光PCR反應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰(bing)上融化(hua)並(bing)振蕩混勻(yun)後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設所(suo)需要的(de)PCR反應(ying)管(guan)管(guan)數為N(N=樣(yang)本數(shu)+1管(guan)陰性對(dui)照+1管(guan)陽性對(dui)照)，每(mei)個(ge)測試反應(ying)體系配制(zhi)如下(xia)表：
試劑(ji) 每(mei)個(ge)反應(ying)加入(ru)的(de)量(liang) N個(ge)反應(ying)加入(ru)的(de)量(liang)
熒光PCR反應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好(hao)各試劑(ji)的(de)使用(yong)量(liang)，加入壹適(shi)當體積潔凈離心(xin)管(guan)中，充分(fen)混勻(yun)，10000rpm離心(xin)10s，向(xiang)設定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管(guan)中分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)15μL熒光PCR反應(ying)液(ye)，向(xiang)每(mei)管(guan)中加入(ru)處(chu)理後(hou)樣(yang)品或(huo)陰性對(dui)照(NTC)和(he)陽性(xing)對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離心(xin)10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條件(jian)
將各(ge)反應(ying)管(guan)放入定(ding)量(liang)PCR儀器(qi)的(de)反應(ying)槽內(nei)。
循環條(tiao)件(jian):
1循環 50℃ for 2 min
預(yu)變性(xing) 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收集(ji)熒光信(xin)號。報告基(ji)團：設置為(wei)FAM。淬(cui)滅基(ji)團：NONE，請勿(wu)選(xuan)擇ROX參(can)比(bi)熒光。
小(xiao)鼠成(cheng)纖維細胞;φ2（）CilostazolHPLC>98%,

TNFRSF17 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) (進分(fen))Cisplatin 進分(fen)Sigma P4394

SHG-44膠質瘤(liu)細(xi)胞 Human glioma cell line SHG-44 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSCisplatin >98.5%,細胞(bao)培養(yang)級(ji),BR

IMR-32細胞(bao)，神(shen)經母(mu)細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞 黃桿(gan)菌屬(shu) 腦血管(guan)平滑肌細胞(bao)RNAHBCSMC miRNA5 μg（）Cisplatin HPLC>98%,

RS1(大鼠皮(pi)膚成纖維樣(yang)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2克(ke)拉曲濱,克(ke)拉利(li)賓Cladribine>99.0%,USP34,BR,可(ke)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)
TNFSF8 Others Human  CD30 Ligand / TNFSF8 細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 己二(er)酸(suan)二(er)異(yi)癸(gui)酯Diisodecyl Adipate

小(xiao)鼠皮(pi)質神(shen)經元(yuan)MN-c壬二(er)酸(suan)雙(shuang)(2-乙基(ji)己基(ji))酯(>75.0%(GC))>75.0%(GC)Bis(2-ethylhexyl) Azelate

MSLN Others Human  MSLN / Mesothelin 細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 己二(er)酸(suan)二(er)異(yi)丙(bing)酯(zhi)(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Diisopropyl Adipate

大鼠胰(yi)腺(xian)上(shang)皮細胞*培養(yang)基(ji) 100mL己二(er)酸(suan)二(er)丁酯(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Dibutyl Adipate

BALL-1B細胞(bao)急(ji)性白血病(bing)細(xi)胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nei)含(han)2mM L-glutamine)+10%胎牛(niu)血清(qing)1-O-β-葡(pu)萄糖(tang)苷酸美(mei)國(guo)進口(kou)Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide
西尼(ni)羅病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）PTPN2 Others Mouse 小(xiao)鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) Anilinexy7nochloride阿尼(ni)林(lin)鹽(yan)0.25毫升CP

小(xiao)鼠誘(you)導(dao)性(xing)多潛(qian)能(neng)幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-C4本加(jia)醋芐(bian)酯(zhi) Bqnzyl Bqnzoctq;Bqnzyl bqnzqnq ccrboxylctq;Bqnzyl phqnyl forMctq 10-21-4

T-47D細胞(bao)，管(guan)癌細胞(bao) 食管(guan)癌細胞(bao),EC871214細胞(bao) 大鼠骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞;UMR-106葡(pu)聚(ju)糖(tang)凝(ning)膠 Sephade... Sephadex G-50 Coarse 9048-71-9 100G 分(fen)離試劑(ji)

小(xiao)鼠誘(you)導(dao)性(xing)多潛(qian)能(neng)幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-B11,4-二(er)乙(yi)磺(huang)酸(suan)倍半鈉鹽(yan)，英文(wen)名或(huo)英文(wen)縮寫：PIPES sesquiwo7ium salt，級(ji)別(bie)：AR，規格(ge)：100克(ke)

CDH2 Others Human  Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) MaltExtractAgar 500g原裝 BD 211220/Oxoid