登(deng)革熱病(bing)毒(du)3型(xing)（DFV-III）核(he)酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

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 產品名(ming)稱(cheng)：登(deng)革熱病(bing)毒(du)3型(xing)(DFV-III)核酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)
規(gui)格：50T
編(bian)號(hao)：BH-P96923
分類(lei)：熒(ying)光PCR法
儲存條件：-20℃避光保(bao)存，避免反(fan)復凍融。
運(yun)輸：低(di)溫、避光，快(kuai)遞免費(fei)送(song)貨(huo)上(shang)門。
產品特點(dian)：
◇高特異(yi)性(xing)：與其他病(bing)毒(du)無交叉(cha)反(fan)應，無非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增；
◇高靈(ling)敏度(du)：檢(jian)測(ce)靈敏度(du)可(ke)達(da)10~100拷貝；
◇操作(zuo)簡(jian)便(bian)：該(gai)系(xi)列(lie)所(suo)有試劑(ji)均(jun)采(cai)用相(xiang)同(tong)的(de)體(ti)系(xi)和(he)條件，可(ke)同(tong)時進(jin)行多(duo)個檢(jian)測(ce)；
◇高通(tong)量(liang)：多(duo)種(zhong)雙重PCR檢(jian)測(ce)以及三重PCR檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)。

準(zhun)備物(wu)品：
清(qing)理液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染色(se)液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解(jie)液（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產品說明書(shu)                                   1份
使用及(ji)效(xiao)果(guo)：
PCR反(fan)應特點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強
PCR反(fan)應的(de)特異(yi)性(xing)決定(ding)因(yin)素(su)為：
①引物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特異(yi)正(zheng)確(que)的(de)結(jie)合(he)；
②堿(jian)基配(pei)對原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應的(de)忠實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基因(yin)的(de)特異(yi)性(xing)與保(bao)守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正(zheng)確(que)結(jie)合(he)是(shi)關(guan)鍵(jian)。引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合(he)及引(yin)物(wu)鏈(lian)的(de)延伸是(shi)遵(zun)循(xun)堿(jian)基配(pei)對原(yuan)則(ze)的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應的(de)忠實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐高溫性(xing)，使反(fan)應中(zhong)模板(ban)與引物(wu)的(de)結(jie)合(he)(復性(xing))可以(yi)在較高(gao)的(de)溫度(du)下(xia)進(jin)行，結(jie)合(he)的(de)特異(yi)性(xing)大大(da)增(zeng)加(jia)，被擴(kuo)增的(de)靶(ba)基因(yin)片段(duan)也就(jiu)能(neng)保(bao)持(chi)很(hen)高的(de)正(zheng)確(que)度(du)。再(zai)通(tong)過(guo)選(xuan)擇特異(yi)性(xing)和保(bao)守(shou)性(xing)高的(de)靶(ba)基因(yin)區，其特異(yi)性(xing)程度(du)就(jiu)更(geng)高。
(2) 靈敏度(du)高(gao)
PCR產物(wu)的(de)生成量(liang)是(shi)以指數方式增加(jia)的(de)，能(neng)將皮克(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起始待(dai)測(ce)模板(ban)擴(kuo)增到(dao)微克(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)從100萬(wan)個細(xi)胞(bao)中(zhong)檢(jian)出(chu)壹(yi)個靶(ba)細(xi)胞(bao)；在病(bing)毒(du)的(de)檢(jian)測(ce)中(zhong)，PCR的(de)靈敏度(du)可(ke)達(da)3個RFU(空斑(ban)形成單位)；在細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢(jian)出(chu)率(lv)為3個細(xi)菌(jun)。
(3) 簡便(bian)、快(kuai)速(su)
PCR反(fan)應用耐(nai)高(gao)溫的(de)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹次性(xing)地(di)將(jiang)反(fan)應液(ye)加(jia)好後(hou)，即在DNA擴(kuo)增液(ye)和水浴鍋(guo)上進(jin)行變(bian)性(xing)-退(tui)火(huo)-延伸(shen)反(fan)應，壹(yi)般(ban)在2～4 小時完成擴(kuo)增反(fan)應。擴(kuo)增產(chan)物(wu)壹(yi)般(ban)用電(dian)泳(yong)分(fen)析(xi)，不(bu)壹(yi)定(ding)要用同(tong)位(wei)素(su)，無放射性(xing)汙(wu)染(ran)、易(yi)推廣。
(4) 對標(biao)本(ben)的(de)純度(du)要求(qiu)低(di)
不(bu)需(xu)要分離(li)病(bing)毒(du)或細(xi)菌(jun)及(ji)培養細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制(zhi)品及(ji)總RNA均(jun)可(ke)作(zuo)為擴(kuo)增模板(ban)。可直接(jie)用臨(lin)床標本如血(xue)液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技術概論。
HEC-1-A(內(nei)膜(mo)腺癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 獼(mi)猴(hou)皮膚細(xi)胞(bao);MMS71酸二氫(qing)鉀(jia)（）Potassium Dihydrogen Phosphate比色法含(han)量(liang)測定(ding)

髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao);D341Med長春胺（）Vincamine含(han)量(liang)測定(ding)

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) （）Imidapril HPLC法含(han)量(liang)測定(ding)

MGC-803 胃(wei)癌細(xi)胞(bao)1酸（）Piperaquine phosphate含(han)量(liang)測定(ding)

NCI-H1395肺腺癌細(xi)胞(bao) Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS（）Cisapride Monohydrate含(han)量(liang)測定(ding)
HA Others H1N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan) H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) N-甲(jia)酰(xian)-DL-0.98Nalpha-Formyl-DL-tryptophan

CL-0396NCI-H226(肺鱗(lin)癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2L-叔丁酯(zhi)>98%,BRL-Tyrosine tert-butyl ester

CFR Others Human  CFR / CFR-alpha 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) O-芐基-L-0.98O-Benzyl-L-tyrosine

脈絡叢上皮細(xi)胞(bao)RNAHCPEpiC miRNA5 μgN-乙酰(xian)-L-賴(lai)氨酸/N6-三氟乙酰(xian)基-L-賴(lai)氨酸>98%,BRN-6-Trifluoroacetyl-L-lysine

6T-CEM細(xi)胞(bao)，T細(xi)胞(bao)白血(xue)病(bing) 巨細(xi)胞(bao)性(xing)肺癌(ai)細(xi)胞(bao),801-D細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao)O-芐基-L->98%,BRO-Benzyl-L-serine
登(deng)革熱病(bing)毒(du)3型(xing)(DFV-III)核酸檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)心臟微血(xue)管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)物(wu)HCMECL3-溴-1,10-鄰(lin)二氮(dan)雜菲(fei)(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)3-Bromo-1,10-phenanthroline

TIMD4 Others Human  TIMD4 / TIM4 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 5-氯-1,10-菲(fei)咯啉(>98.0%(T))>98.0%(T)5-Chloro-1,10-phenanthroline

BHK 敘(xu)利亞(ya)倉(cang)鼠腎細(xi)胞(bao)2-氯-1,10-鄰(lin)二氮(dan)雜菲(fei)(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2-Chloro-1,10-phenanthroline

CL-0158MGC80-3(胃(wei)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×24,7-二甲(jia)基-1,10-鄰(lin)二氮(dan)雜菲(fei)(>98.0%(T))>98.0%(T)4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline

mCF, 小鼠心臟成纖(xian)維細(xi)胞(bao)3-O-β-D-葡萄糖(tang)( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(tang)(1→2)]- a-L-阿拉(la)伯(bo)糖(tang) 常春藤配(pei)基- 28-O-鼠李糖(tang)(1→4)葡萄糖(tang)(1→6)葡萄糖(tang)苷HPLC≥98%，V
檢(jian)測(ce)步驟(zhou)：
壹、 試劑(ji)的(de)準(zhun)備
從試劑(ji)盒(he)中(zhong)取出(chu)熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰上(shang)融化並振(zhen)蕩(dang)混勻後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設(she)所(suo)需要的(de)PCR反(fan)應管(guan)管數為N(N=樣(yang)本數+1管陰性(xing)對照+1管陽(yang)性(xing)對照)，每個測(ce)試(shi)反(fan)應體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如下(xia)表：
試劑(ji) 每個反(fan)應加(jia)入(ru)的(de)量(liang) N個反(fan)應加(jia)入(ru)的(de)量(liang)
熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好各(ge)試(shi)劑(ji)的(de)使用量(liang)，加(jia)入(ru)壹(yi)適當體(ti)積潔凈(jing)離(li)心管中(zhong)，充分(fen)混勻，10000rpm離心(xin)10s，向設(she)定的(de)N個PCR反(fan)應管(guan)中(zhong)分別(bie)加(jia)入(ru)15μL熒(ying)光PCR反(fan)應液(ye)，向每管中(zhong)加(jia)入(ru)處理後(hou)樣(yang)品或陰性(xing)對照(NTC)和陽(yang)性(xing)對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離(li)心10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應條件
將各(ge)反(fan)應管(guan)放入(ru)定(ding)量(liang)PCR儀器(qi)的(de)反(fan)應槽內(nei)。
循(xun)環條件:
1循(xun)環 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性(xing) 1循(xun)環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時收集(ji)熒(ying)光信號(hao)。報告基團：設(she)置(zhi)為FAM。淬滅基團：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參比熒(ying)光。