牛白血病病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑盒(he)（熒(ying)光(guang)PCR法）

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 產品名(ming)稱：牛白血病病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑盒(he)（熒(ying)光(guang)PCR法）
規格：50T
編號：BH-P96643
分類(lei)：熒(ying)光(guang)PCR法
儲(chu)存(cun)條件：-20℃避光(guang)保存(cun)，避(bi)免(mian)反復凍融(rong)。
運(yun)輸：低(di)溫、避(bi)光(guang)，快遞免費送(song)貨上(shang)門(men)。

準備(bei)物(wu)品：
清(qing)理液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染(ran)色液(ye)（t B）                                   微升
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產品說(shuo)明(ming)書                                   1份
使用(yong)及(ji)效果：
產品特點(dian)：
◇高(gao)特異性：與其(qi)他病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應(ying)，無(wu)非(fei)特異性擴增(zeng)；
◇高(gao)靈(ling)敏(min)度：檢測靈(ling)敏(min)度可達10~100拷(kao)貝；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便：該系(xi)列所(suo)有(you)試劑均(jun)采用(yong)相(xiang)同(tong)的體(ti)系和條件，可(ke)同(tong)時進行多個(ge)檢測；
◇高(gao)通量(liang)：多種雙重(zhong)PCR檢測以(yi)及三重(zhong)PCR檢測試(shi)劑盒(he)。

PCR反應(ying)特點(dian)
(1) 特異性強
PCR反應(ying)的特異性決定因(yin)素為：
①引物與模(mo)板DNA特異正(zheng)確的結(jie)合(he)；
②堿基配對原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚合酶合成(cheng)反應(ying)的忠(zhong)實(shi)性；
④靶基因(yin)的特異性與保(bao)守性。
其(qi)中引(yin)物與模(mo)板的(de)正(zheng)確結(jie)合(he)是(shi)關鍵(jian)。引(yin)物與模(mo)板的(de)結(jie)合(he)及引物鏈(lian)的(de)延(yan)伸是(shi)遵循(xun)堿(jian)基配對原(yuan)則(ze)的。聚合(he)酶合成(cheng)反應(ying)的忠(zhong)實(shi)性及Taq DNA聚合酶耐高(gao)溫性，使反應(ying)中模(mo)板與引(yin)物(wu)的結(jie)合(he)(復性)可以(yi)在(zai)較(jiao)高(gao)的溫度下進行，結(jie)合(he)的特異性大大增(zeng)加，被擴增(zeng)的靶(ba)基因(yin)片段也(ye)就(jiu)能保持很高(gao)的正(zheng)確度。再通過(guo)選(xuan)擇特異性和保守性高(gao)的靶(ba)基因(yin)區，其(qi)特異性程度就(jiu)更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度高(gao)
PCR產物的生(sheng)成(cheng)量(liang)是(shi)以(yi)指(zhi)數方式(shi)增(zeng)加的(de)，能將皮克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始待測模(mo)板擴(kuo)增(zeng)到微克(ke)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(ge)細(xi)胞中檢出壹個(ge)靶(ba)細(xi)胞；在(zai)病(bing)毒(du)的檢測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏(min)度可達3個(ge)RFU(空斑(ban)形(xing)成單位(wei))；在(zai)細(xi)菌學中zui小(xiao)檢出率為3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便、快速(su)
PCR反應(ying)用(yong)耐(nai)高(gao)溫的(de)Taq DNA聚合酶，壹次(ci)性地將反應(ying)液(ye)加好後(hou)，即(ji)在(zai)DNA擴增(zeng)液(ye)和水浴(yu)鍋上(shang)進行變性-退(tui)火(huo)-延伸反應(ying)，壹般在(zai)2～4 小(xiao)時完成擴增(zeng)反應(ying)。擴增(zeng)產物(wu)壹般用(yong)電(dian)泳(yong)分析(xi)，不壹定要(yao)用(yong)同(tong)位(wei)素，無(wu)放(fang)射性汙(wu)染(ran)、易推廣。
(4) 對標本的(de)純(chun)度要(yao)求(qiu)低
不需要(yao)分(fen)離病毒(du)或細(xi)菌及培養細(xi)胞，DNA 粗制品及(ji)總(zong)RNA均(jun)可(ke)作(zuo)為擴(kuo)增(zeng)模(mo)板。可(ke)直(zhi)接用(yong)臨(lin)床(chuang)標本如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗嗽(sou)液(ye)、毛發(fa)、細(xi)胞、活PCR技(ji)術(shu)概(gai)論(lun)。

檢測步(bu)驟：
壹、 試劑的(de)準備(bei)
從試劑盒(he)中取(qu)出熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰上融(rong)化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻後(hou)，10000rpm離心10s。
設所(suo)需要(yao)的(de)PCR反應(ying)管管(guan)數為(wei)N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每(mei)個(ge)測試(shi)反應(ying)體(ti)系配制如(ru)下(xia)表：
試劑 每(mei)個(ge)反應(ying)加入(ru)的量(liang) N個(ge)反應(ying)加入(ru)的量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶混(hun)合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的(de)使用(yong)量(liang)，加入(ru)壹適當(dang)體(ti)積(ji)潔(jie)凈(jing)離心管中(zhong)，充(chong)分(fen)混(hun)勻，10000rpm離心10s，向(xiang)設定的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管中(zhong)分別(bie)加入15μL熒(ying)光(guang)PCR反應(ying)液(ye)，向(xiang)每(mei)管(guan)中(zhong)加入處(chu)理(li)後(hou)樣(yang)品或(huo)陰(yin)性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離(li)心(xin)10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條件
將各反應(ying)管放(fang)入定量(liang)PCR儀器的(de)反應(ying)槽內(nei)。
循環(huan)條件:
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變性 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增(zeng) 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸時收(shou)集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報告(gao)基團：設(she)置(zhi)為FAM。淬(cui)滅基團：NONE，請勿選(xuan)擇ROX參比(bi)熒(ying)光(guang)。

小(xiao)膠質(zhi)細(xi)胞總RNAHM NA七水(shui)(AR)Iron(II) sulfate, heptahydrateAR,>99%

CD68 Others Rat 大鼠(shu) CD68 / Macrosialin 細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對照) 1酸三鉀Potassium phosphate, tribasic>98%

上皮細(xi)胞*培養基 100mL鈣(gai)黃綠(lv)素二鈉鹽(yan)Calcein,  saltIND grade

COS-7細(xi)胞，SV40轉化(hua)的(de)非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞 293T/17 [HEK 293T/17] (胚腎細(xi)胞) 雜交(jiao)瘤(liu)(B類(lei));Z1510C6D10F4G6植酸鈉Phytic acid dodeca salt hydrate>98%,BR

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重(zhong)組(zu)斑(ban)馬魚(yu) EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白(bai) (His 標簽)菊粉;菊糖Inulin from chicory>90%,BR
Hela, 細(xi)胞系 小(xiao)鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞,3T3TK細(xi)胞 SPA-A1(肺腺癌細(xi)胞)泡蛙肽(tai)>95%,BRPhysalaemin

小(xiao)鼠(shu)單核(he)巨噬細(xi)胞白血病細(xi)胞;RAW 264.7 [RAW264.7PKI-tide>95%,BRPKI-tide

FGFR2 Others Human  FGFR2 / CD332 細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對照) 血小(xiao)板因(yin)子(zi)4>95%,BRPlatelet Factor 4 (58-70)(human)

小(xiao)鼠(shu)子(zi)細(xi)胞;U14Pneumadin，>95%,BRPneumadin (human)

IL18R1 Others Canine 狗(gou) IL18R1 細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對照) 1酸鋅四水(shui)(>98%,BR)>98%,BRZinc phosphate tetrahydrate
牛白血病病(bing)毒(du)核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑盒(he)（熒(ying)光(guang)PCR法）CD80 Others Human  B7-1 / CD80 細(xi)胞裂解液(ye) (陽性對照) TRICINE三羥(qiang)甲基甲基甘酸1克(ke)IND

肝細(xi)胞RNAHH miRNA5 μg1-十(shi)二流醇 1-Dodqccnqthiol 11-22-0

大鼠(shu)心(xin)肌(ji)細(xi)胞(RCM)(1×106)M-TGE肉湯shēng huà shì jì容量(liang)：500毫(hao)升(sheng)

荷蘭白花奶(nai)肺(fei)細(xi)胞;DCL1錄化(hua)-2-羥基-3-(基)基聚環(huan)氧纖維(wei)素，英文名或(huo)英文縮(suo)寫：Polyquaternium-10，級別(bie)：IND，規格：25克(ke)

T739小(xiao)鼠(shu)肺(fei)腺癌瘤株(zhu);LA795 小(xiao)鼠(shu)腎(shen)成纖維(wei)細(xi)胞*培養基 100mLAgar 250g/500g/1kg /5kg Japan