羅湖病(bing)毒(du)（TiLV）核酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑盒(he)

產品(pin)特(te)點：
◇高(gao)特(te)異(yi)性：與(yu)其他(ta)病(bing)毒(du)無交(jiao)叉反(fan)應(ying)，無非(fei)特(te)異(yi)性擴增；
◇高(gao)靈敏度：檢測靈(ling)敏(min)度可(ke)達10~100拷貝；
◇操作(zuo)簡(jian)便(bian)：該系(xi)列所有試(shi)劑均采(cai)用(yong)相同(tong)的(de)體(ti)系(xi)和(he)條(tiao)件(jian)，可(ke)同(tong)時(shi)進(jin)行多(duo)個檢測(ce)；
◇高(gao)通量(liang)：多(duo)種雙(shuang)重PCR檢測以及(ji)三重PCR檢測試劑盒(he)。

訂(ding)購(gou)信(xin)息：
 產品(pin)名(ming)稱：羅湖病(bing)毒(du)（TiLV）核酸檢測(ce)試劑盒(he)
規格：50T
編號(hao)：BH-P96845
分類：熒光PCR法
儲(chu)存條(tiao)件(jian)：-20℃避光保存(cun)，避免反(fan)復(fu)凍(dong)融。
運(yun)輸(shu)：低溫、避光，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨上門(men)。

準備物品(pin)：
清(qing)理(li)液（A）                                   毫升(sheng)
染色液(ye)（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋液（C）                                   毫升(sheng)
溶解液（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說(shuo)明書                                   1份(fen)
使用(yong)及效果：
PCR反(fan)應(ying)特(te)點
(1) 特(te)異(yi)性強(qiang)
PCR反(fan)應(ying)的(de)特(te)異(yi)性決(jue)定(ding)因素(su)為(wei)：
①引物與(yu)模板DNA特(te)異(yi)正(zheng)確的(de)結合(he)；
②堿基(ji)配(pei)對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性；
④靶基(ji)因(yin)的(de)特(te)異(yi)性與(yu)保守(shou)性。
其中引物與(yu)模板的(de)正(zheng)確結合(he)是關鍵。引物與(yu)模板的(de)結合(he)及引物鏈(lian)的(de)延伸(shen)是遵循堿(jian)基(ji)配(pei)對(dui)原(yuan)則的(de)。聚合(he)酶合(he)成(cheng)反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性及(ji)Taq DNA聚合(he)酶耐高(gao)溫性，使(shi)反(fan)應(ying)中模板與(yu)引物的(de)結合(he)(復(fu)性(xing))可(ke)以在(zai)較高(gao)的(de)溫度下進(jin)行，結合(he)的(de)特(te)異(yi)性大(da)大增加(jia)，被擴增的(de)靶基(ji)因(yin)片段也就能(neng)保持(chi)很高(gao)的(de)正(zheng)確度。再通過(guo)選擇特(te)異(yi)性和(he)保(bao)守(shou)性高(gao)的(de)靶基(ji)因(yin)區(qu)，其(qi)特(te)異(yi)性程度就更高(gao)。
(2) 靈敏度高(gao)
PCR產物的(de)生成(cheng)量(liang)是以指(zhi)數方式增加(jia)的(de)，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始待(dai)測模板擴增到(dao)微克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從100萬個細(xi)胞中檢(jian)出(chu)壹(yi)個靶細(xi)胞；在(zai)病(bing)毒(du)的(de)檢測(ce)中，PCR的(de)靈敏(min)度可(ke)達3個RFU(空(kong)斑形(xing)成(cheng)單(dan)位(wei))；在(zai)細(xi)菌學中(zhong)zui小檢(jian)出(chu)率為(wei)3個細(xi)菌。
(3) 簡便(bian)、快速
PCR反(fan)應(ying)用(yong)耐高(gao)溫的(de)Taq DNA聚合(he)酶，壹次(ci)性(xing)地將(jiang)反(fan)應(ying)液加(jia)好(hao)後，即(ji)在(zai)DNA擴增液(ye)和(he)水(shui)浴鍋上進(jin)行變性(xing)-退火-延伸反(fan)應(ying)，壹般在(zai)2～4 小時(shi)完(wan)成(cheng)擴增反(fan)應(ying)。擴增產(chan)物壹般用(yong)電泳(yong)分析，不壹(yi)定(ding)要(yao)用(yong)同位(wei)素(su)，無(wu)放射性汙(wu)染、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對標(biao)本(ben)的(de)純(chun)度要(yao)求低
不需要(yao)分離(li)病(bing)毒(du)或細(xi)菌及(ji)培養(yang)細(xi)胞，DNA 粗(cu)制(zhi)品(pin)及(ji)總RNA均可(ke)作(zuo)為(wei)擴增模板。可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)臨(lin)床(chuang)標(biao)本(ben)如(ru)血(xue)液(ye)、體(ti)腔液、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發、細(xi)胞、活PCR技(ji)術概論(lun)。

檢測步(bu)驟(zhou)：
壹、 試劑的(de)準備
從試劑盒(he)中取出(chu)熒(ying)光PCR反(fan)應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(Enzymes MIX)，冰上融化並振(zhen)蕩混勻後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設(she)所需要(yao)的(de)PCR反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei)N(N=樣本(ben)數+1管(guan)陰性對照+1管(guan)陽性對照)，每個測試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配制(zhi)如下表(biao)：
試劑 每個反(fan)應(ying)加入(ru)的(de)量(liang) N個反(fan)應(ying)加入(ru)的(de)量(liang)
熒光PCR反(fan)應(ying)液 14µL N×14µL
酶混合(he)物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算好(hao)各試(shi)劑的(de)使用(yong)量(liang)，加入(ru)壹適當(dang)體(ti)積潔凈(jing)離(li)心(xin)管(guan)中，充分混勻(yun)，10000rpm離(li)心(xin)10s，向設(she)定(ding)的(de)N個PCR反(fan)應(ying)管(guan)中分別加入(ru)15μL熒光PCR反(fan)應(ying)液，向(xiang)每管(guan)中加入處理(li)後樣品(pin)或陰性(xing)對照(zhao)(NTC)和(he)陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離(li)心(xin)10秒。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)
將(jiang)各(ge)反(fan)應(ying)管(guan)放入定(ding)量(liang)PCR儀(yi)器的(de)反(fan)應(ying)槽內(nei)。
循環(huan)條(tiao)件(jian):
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸時(shi)收集(ji)熒光信號(hao)。報告基(ji)團(tuan)：設(she)置為(wei)FAM。淬滅基(ji)團(tuan)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
KP-N-NS腎上腺(xian)神經(jing)母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞(腦轉(zhuan)移(yi)) KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS重水(shui),氧化氘(dao)(50G)Deuterium OxideD,99.9%

SF763細(xi)胞，腦瘤(liu)細(xi)胞 肺(fei)炎(yan)克(ke)雷(lei)伯菌 顱骨(gu)造骨細(xi)胞總RNAHCO NA重水(shui),氧化氘(dao)(100G)Deuterium OxideD,99.9%

RKO-AS45-1(結腸癌(ai)轉(zhuan)基(ji)因(yin)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2氘代(dai)硫酸(0.55 ml x 10)Sulfuric Acid-D2D,99.5%, acidity 90% IN D2O

FRhK-4(恒(heng)河(he)猴胚(pei)腎細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0307SW1116(結腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞)5×106cells/瓶×2 大耳(er)山羊(yang)腎細(xi)胞;LDG-2氘代(dai)硫酸(50g )Sulfuric Acid-D2D, 99%, acidity 96-98% IN D2O

主動(dong)脈(mai)平滑(hua)肌細(xi)胞Many types of cells(1ml)氘代(dai)硫酸(100g )Sulfuric Acid-D2D,99.5%, acidity 90% IN D2O
中國倉鼠(shu)卵巢細(xi)胞-二氫(qing)*還(hai)原(yuan)酶缺陷(xian)型(xing);CHO/dhFr- 喉表(biao)皮樣癌(ai)細(xi)胞，HEp-2細(xi)胞 SF-9細(xi)胞，昆(kun)蟲細(xi)胞系(xi)胰高(gao)血(xue)糖(tang)素(su)樣肽(tai)-2（1-34)，>95%,BRGLP-2 (1-34) (human)

胚(pei)肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞;CCC-HPF-1胰高(gao)血(xue)糖(tang)素(su)（1-29），牛，，豬>95%,BRGlucagon (1 - 29), bovine,human, porcine

HA Others H3N2 甲型(xing)流(liu)感(gan) H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血(xue)凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性對照) 胰高(gao)血(xue)糖(tang)素(su)（19-29），牛，，豬>95%,BRGlucagon (19 - 29), bovine,human, porcine

支氣管(guan)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)胰高(gao)血(xue)糖(tang)素(su)樣肽(tai)Ⅰ（7-36）酰胺(an)，>95%,BRGlucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human

ASGR2 Others Human  ASGR2 細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性對照) 升(sheng)麻(ma)素(su)（）HPLC≥98%，Cimifugin
羅湖病(bing)毒(du)（TiLV）核酸檢測(ce)試劑盒(he)胚(pei)肺(fei)二倍(bei)體(ti)細(xi)胞;KMB-17 甲狀(zhuang)腺(xian)濾泡(pao)上皮細(xi)胞*培養(yang)基(ji) 100mL聚酰胺(an)shēng huà shì jì容量(liang)：10毫升(sheng)

卵巢腺(xian)癌(ai)細(xi)胞;SK-OV-32,4,5-三錄(lu)本(ben)酚(fen) 2,4,5-Trichlorophqnol 92-92-4

APCS Others Human  Serum amyloid P compone / APCS / SAP 細(xi)胞裂(lie)解液 (陽性對照) 微量(liang)可(ke)調移(yi)液(ye)器P10shēng huà shì jì容量(liang)：保存(cun)：-20℃1克(ke)

兔脂肪間質(zhi)幹(gan)細(xi)胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells虎紅鈉鹽(yan)shēng huà shì jì容量(liang)：100克(ke)

BE(2)-M17細(xi)胞，神經(jing)母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞 寄生曲黴 293來源(yuan)病(bing)毒(du)包(bao)裝細(xi)胞;ΦA117-78-22-羧(suo)基(ji)醌ANTHRAinoneONE-2-CARBOXYLIC ACID