口蹄疫(yi)病毒(du)核酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑盒（熒光PCR法(fa)）

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 產(chan)品名稱(cheng)：口蹄疫(yi)病毒(du)核酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑盒（熒光PCR法(fa)）
規(gui)格(ge)：50T
編號(hao)：BH-P96645
分(fen)類(lei)：熒光PCR法(fa)
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：-20℃避光保(bao)存，避免反復(fu)凍(dong)融。
運輸(shu)：低(di)溫(wen)、避光，快(kuai)遞(di)免費(fei)送貨(huo)上門(men)。
產(chan)品特(te)點(dian)：
◇高(gao)特異(yi)性(xing)：與(yu)其他病毒(du)無交叉(cha)反應(ying)，無(wu)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增；
◇高(gao)靈敏度：檢(jian)測(ce)靈敏度可達10~100拷貝(bei)；
◇操作(zuo)簡(jian)便(bian)：該(gai)系列所有(you)試劑(ji)均采(cai)用(yong)相(xiang)同的(de)體系和(he)條件，可同時(shi)進(jin)行多個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高(gao)通量(liang)：多種雙重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)以及(ji)三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)試劑盒。

準(zhun)備物品：
清理(li)液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升(sheng)
稀釋液（C）                                   毫升
溶解(jie)液（tD）                                   毫升
產(chan)品說(shuo)明書(shu)                                   1份
使用(yong)及(ji)效果：
PCR反應(ying)特(te)點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反應(ying)的(de)特(te)異性決(jue)定(ding)因(yin)素為：
①引物與(yu)模板DNA特異(yi)正(zheng)確(que)的(de)結(jie)合(he)；
②堿基(ji)配(pei)對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性；
④靶(ba)基因(yin)的(de)特(te)異(yi)性與(yu)保(bao)守性。
其中引(yin)物與(yu)模板的正(zheng)確(que)結(jie)合(he)是(shi)關鍵(jian)。引物與(yu)模板的結(jie)合(he)及(ji)引(yin)物鏈(lian)的延(yan)伸(shen)是(shi)遵循堿(jian)基(ji)配對(dui)原則(ze)的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠(zhong)實性及(ji)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐(nai)高(gao)溫(wen)性，使反應(ying)中模板與(yu)引(yin)物的(de)結(jie)合(he)(復(fu)性(xing))可以在較高(gao)的溫(wen)度下(xia)進(jin)行，結(jie)合(he)的特(te)異性大大增加，被(bei)擴增的靶(ba)基因(yin)片(pian)段(duan)也就(jiu)能保(bao)持(chi)很(hen)高(gao)的正(zheng)確(que)度。再通過選(xuan)擇(ze)特異(yi)性(xing)和(he)保守性高(gao)的靶(ba)基因(yin)區(qu)，其特異性程(cheng)度就(jiu)更高(gao)。
(2) 靈敏度高(gao)
PCR產(chan)物的(de)生成(cheng)量(liang)是(shi)以指(zhi)數方(fang)式(shi)增加的(de)，能將(jiang)皮(pi)克(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始待(dai)測(ce)模板擴增到微(wei)克(ug=10-6g)水平(ping)。能從(cong)100萬個(ge)細(xi)胞(bao)中檢(jian)出壹(yi)個(ge)靶(ba)細胞(bao)；在病毒(du)的檢(jian)測(ce)中，PCR的靈(ling)敏度可達3個(ge)RFU(空(kong)斑(ban)形(xing)成(cheng)單(dan)位)；在細菌學(xue)中zui小(xiao)檢(jian)出率(lv)為3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快(kuai)速
PCR反應(ying)用(yong)耐(nai)高(gao)溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹(yi)次性(xing)地(di)將(jiang)反應(ying)液加好後(hou)，即在DNA擴增液和(he)水浴鍋上進(jin)行變(bian)性-退(tui)火(huo)-延伸(shen)反應(ying)，壹(yi)般在2～4 小(xiao)時(shi)完(wan)成(cheng)擴(kuo)增反應(ying)。擴(kuo)增產(chan)物壹(yi)般用(yong)電(dian)泳分(fen)析(xi)，不壹(yi)定(ding)要(yao)用(yong)同位素，無(wu)放射性(xing)汙染、易(yi)推(tui)廣。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的(de)純(chun)度要(yao)求低
不需要(yao)分(fen)離(li)病毒(du)或(huo)細菌及(ji)培(pei)養細(xi)胞(bao)，DNA 粗制品及(ji)總(zong)RNA均可作為擴增模板。可直(zhi)接(jie)用(yong)臨(lin)床(chuang)標(biao)本(ben)如(ru)血(xue)液、體腔(qiang)液、洗(xi)嗽液、毛發、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技術概論。
小(xiao)耳豬(zhu)肺(fei)細(xi)胞(bao);SEP-L1女貞(zhen)苷(gan)（）LigustroflavoneHPLC≥98%，

A-427細胞(bao)，肺(fei)癌細(xi)胞(bao) 小(xiao)鼠成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao),L929細胞(bao) CM-R103大鼠(shu)腦(nao)靜(jing)脈(mai)血(xue)管(guan)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞(bao)*培(pei)養基(ji)100mL夏(xia)佛塔(ta)苷(gan)（）SchaftosideHPLC≥98%，

RM-1(小(xiao)鼠前(qian)列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2二氫(qing)小(xiao)檗(bo)堿（）9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrobHPLC≥98%，

Gibco 10486025 EXPRESS FIVE SFM..昆蟲(chong)培(pei)養基(ji) 1000ml桔紅(hong)素;桔皮(pi)素()TangeretinHPLC≥98%，

支(zhi)氣管(guan)上皮(pi)細(xi)胞(bao)cDNAHBEpiC cDNA桔紅(hong)素;桔皮(pi)素TangeretinHPLC≥98%,BR
LYVE1 Others Mouse 小(xiao)鼠 LYVE1 / LYVE-1 細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 舒馬(ma)曲坦(tan)-d6琥珀(po)酸(suan)鹽美(mei)國進(jin)口Sumatriptan-d6 Succinate

大鼠(shu)肺(fei)大(da)靜(jing)脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞(bao)*培(pei)養基(ji) 100mL雙氯芬(fen)酸(suan)甲(jia)酯美(mei)國進(jin)口Diclofenac Methyl Ester

FRhK-4細胞(bao)，恒(heng)河(he)猴(hou)胚(pei)腎(shen)細胞(bao) EB-3 [EB3](樣Butt瘤細胞(bao)) CM-H026內皮(pi)細(xi)胞(bao)*培(pei)養基(ji)100mL雙氯芬(fen)酸(suan)酰胺(an)美(mei)國進(jin)口Diclofenac Amide

BTC Protein Human 重(zhong)組(zu) BTC / Betacellulin 蛋(dan)白(bai)芴(wu)甲(jia)氧(yang)羰(tang)基(ji)-美(mei)國進(jin)口Fmoc-Gabapentin

MKN45(胃癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 皮(pi)下(xia)脂肪(fang)細(xi)胞(bao)Many types of cells　5 × 105方(1ml)舒巴坦(tan)酸(suan)()≥98%,Sulbactam Acid
口蹄疫(yi)病毒(du)核酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑盒（熒光PCR法(fa)）U-2 OS細胞(bao)，骨(gu)肉瘤細胞(bao) 二倍(bei)體細胞(bao)系(xi),KMB-17細胞(bao) 小(xiao)鼠胚(pei)胎成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao);NIH/3T3膠(jiao)原(yuan)酶(mei)shēng huà shì jì容量(liang)：25克

小(xiao)鼠T瘤細胞(bao)(雞OVA基因(yin)修飾);E.G7-OVA2,3-環氧(yang)炳(bing)基-4-氧(yang)基(ji)本(ben)基(ji)迷(mi) 2,3-qPOXYPROPYL-4-MqTHOXYPHqNYL qtqr 11-94-1

FZD1 Others Mouse 小(xiao)鼠 FZD1 細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 透析(xi)袋(dai)3500shēng huà shì jì容量(liang)：1000u

脈(mai)絡叢成纖維(wei)細(xi)胞(bao)HCPF癸二酸(suan)二丁(ding)酯(zhi)shēng huà shì jì容量(liang)：500毫克

FES Others Human  FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿(gan)狀病毒(du)-昆蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對(dui)照) 2-脫氧(yang)鳥(niao)苷(gan)-5-1酸(suan)鈉鹽(+4℃)NA
檢(jian)測(ce)步驟：
壹(yi)、 試劑(ji)的(de)準(zhun)備
從試(shi)劑(ji)盒(he)中取出熒(ying)光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化(hua)並(bing)振蕩混(hun)勻後(hou)，10000rpm離心(xin)10s。
設所需(xu)要(yao)的(de)PCR反應(ying)管(guan)管(guan)數為N(N=樣本(ben)數+1管(guan)陰性(xing)對(dui)照+1管(guan)陽性(xing)對(dui)照)，每個(ge)測(ce)試反應(ying)體系配(pei)制如(ru)下(xia)表：
試劑(ji) 每個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入(ru)的量(liang) N個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入(ru)的量(liang)
熒光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好各試劑的使用(yong)量(liang)，加入(ru)壹(yi)適當(dang)體積潔(jie)凈離心(xin)管(guan)中，充分(fen)混(hun)勻，10000rpm離心(xin)10s，向設定(ding)的(de)N個(ge)PCR反應(ying)管(guan)中分(fen)別(bie)加入(ru)15μL熒光PCR反應(ying)液，向每管(guan)中加(jia)入(ru)處理(li)後樣品或(huo)陰性(xing)對(dui)照(NTC)和(he)陽性(xing)對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離心(xin)10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條(tiao)件(jian)
將(jiang)各反應(ying)管(guan)放入定(ding)量(liang)PCR儀(yi)器的反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei)。
循環(huan)條(tiao)件:
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收集(ji)熒(ying)光信(xin)號。報(bao)告基團：設置(zhi)為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選(xuan)擇(ze)ROX參比(bi)熒(ying)光。