豬(zhu)傳染(ran)性(xing)胃腸(chang)炎病毒核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

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 產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：豬(zhu)傳染(ran)性(xing)胃腸(chang)炎病毒核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)
規(gui)格(ge)：50T
編號(hao)：BH-P96634
分(fen)類(lei)：熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
儲(chu)存(cun)條件(jian)：-20℃避光(guang)保(bao)存(cun)，避免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸(shu)：低(di)溫(wen)、避光(guang)，快遞免費(fei)送貨(huo)上(shang)門(men)。

準(zhun)備(bei)物(wu)品：
清理液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染(ran)色(se)液(ye)（t B）                                   微升
稀(xi)釋液(ye)（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶(rong)解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書                                   1份(fen)
使(shi)用(yong)及效果：
產(chan)品(pin)特(te)點：
◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing)：與(yu)其他病毒無(wu)交(jiao)叉反(fan)應(ying)，無(wu)非(fei)特異(yi)性(xing)擴增；
◇高(gao)靈(ling)敏(min)度：檢(jian)測靈敏(min)度可(ke)達10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便：該系(xi)列(lie)所(suo)有試(shi)劑(ji)均(jun)采(cai)用(yong)相同(tong)的體(ti)系(xi)和(he)條件(jian)，可(ke)同(tong)時(shi)進行多(duo)個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高(gao)通(tong)量(liang)：多種(zhong)雙(shuang)重PCR檢(jian)測(ce)以及三(san)重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)。

PCR反(fan)應(ying)特(te)點
(1) 特(te)異(yi)性(xing)強
PCR反(fan)應(ying)的特(te)異(yi)性(xing)決定(ding)因(yin)素為(wei)：
①引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特(te)異(yi)正(zheng)確(que)的結合(he)；
②堿基配(pei)對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶基因(yin)的特(te)異(yi)性(xing)與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引物與(yu)模板(ban)的正(zheng)確(que)結合(he)是(shi)關鍵。引物(wu)與(yu)模板(ban)的結合(he)及引(yin)物(wu)鏈的延伸是(shi)遵循(xun)堿基配(pei)對(dui)原則(ze)的。聚(ju)合酶(mei)合(he)成反(fan)應(ying)的忠(zhong)實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐高溫(wen)性(xing)，使反(fan)應(ying)中(zhong)模板(ban)與(yu)引物(wu)的結合(he)(復性(xing))可(ke)以在較(jiao)高(gao)的溫(wen)度下進行，結合(he)的特(te)異(yi)性(xing)大大增加(jia)，被(bei)擴增的靶基因(yin)片(pian)段也就能保(bao)持(chi)很高(gao)的正(zheng)確(que)度。再通過選擇(ze)特(te)異(yi)性(xing)和(he)保(bao)守(shou)性(xing)高的靶基因(yin)區，其特(te)異(yi)性(xing)程度(du)就(jiu)更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度高(gao)
PCR產(chan)物(wu)的生(sheng)成量(liang)是(shi)以指數方式增加(jia)的，能(neng)將皮(pi)克(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的起(qi)始待(dai)測(ce)模板(ban)擴增到微克(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從100萬個(ge)細(xi)胞中(zhong)檢出壹個(ge)靶細(xi)胞；在(zai)病毒的檢(jian)測中(zhong)，PCR的靈(ling)敏(min)度可(ke)達3個(ge)RFU(空(kong)斑(ban)形成單(dan)位(wei))；在(zai)細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢(jian)出(chu)率(lv)為(wei)3個(ge)細(xi)菌(jun)。
(3) 簡(jian)便(bian)、快(kuai)速
PCR反(fan)應(ying)用(yong)耐高溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹(yi)次性(xing)地將(jiang)反(fan)應(ying)液(ye)加好(hao)後(hou)，即(ji)在(zai)DNA擴增液(ye)和(he)水(shui)浴鍋上(shang)進行變性(xing)-退(tui)火(huo)-延伸反(fan)應(ying)，壹(yi)般(ban)在2～4 小時(shi)完成擴增反(fan)應(ying)。擴增產(chan)物壹般(ban)用(yong)電泳分(fen)析(xi)，不壹定要(yao)用(yong)同(tong)位(wei)素，無放射(she)性(xing)汙染(ran)、易(yi)推廣。
(4) 對(dui)標(biao)本(ben)的純(chun)度要(yao)求(qiu)低(di)
不需要分(fen)離(li)病毒或(huo)細(xi)菌(jun)及(ji)培養細(xi)胞，DNA 粗(cu)制(zhi)品(pin)及(ji)總(zong)RNA均(jun)可(ke)作為(wei)擴增模(mo)板(ban)。可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)臨床(chuang)標(biao)本(ben)如血液(ye)、體(ti)腔(qiang)液(ye)、洗嗽(sou)液(ye)、毛發(fa)、細(xi)胞、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概論(lun)。

檢(jian)測(ce)步(bu)驟：
壹(yi)、 試(shi)劑(ji)的準(zhun)備
從試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)取出熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混合(he)物(Enzymes MIX)，冰上(shang)融(rong)化並(bing)振(zhen)蕩(dang)混勻(yun)後，10000rpm離(li)心10s。
設(she)所(suo)需(xu)要的PCR反(fan)應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei)N(N=樣(yang)本(ben)數+1管(guan)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)+1管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))，每個測試(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)如下表(biao)：
試(shi)劑(ji) 每個反(fan)應(ying)加(jia)入的量(liang) N個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入的量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混合(he)物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好各(ge)試(shi)劑(ji)的使(shi)用(yong)量，加(jia)入壹適(shi)當體(ti)積潔凈(jing)離(li)心管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)混勻(yun)，10000rpm離(li)心10s，向(xiang)設定(ding)的N個(ge)PCR反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong)分(fen)別(bie)加入15μL熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(ye)，向(xiang)每管中(zhong)加入處理(li)後樣(yang)品(pin)或(huo)陰性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離(li)心10秒(miao)。
7.2 qPCR反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)
將(jiang)各(ge)反(fan)應(ying)管(guan)放入定量(liang)PCR儀(yi)器(qi)的反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei)。
循(xun)環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變性(xing) 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸時收(shou)集熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報(bao)告(gao)基團(tuan)：設置(zhi)為(wei)FAM。淬滅(mie)基團(tuan)：NONE，請(qing)勿選擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒(ying)光(guang)。

SV40轉化的非(fei)洲綠(lv)猴腎細(xi)胞;COS-71酸(suan)氫二(er)鈉七水(shui) phosphate, dibasic, heptahydrate>98%,BR

SW-13細(xi)胞，腎上(shang)腺(xian)皮(pi)質(zhi)腺(xian)癌細(xi)胞 色(se)素瘤,Bowes Melanoma細(xi)胞 肺癌(ai)細(xi)胞;A549 [A-549]dATP溶(rong)液(ye)(100 mM)dATP 100 mM solution>97%,BR

小鼠(shu)肝(gan)癌(ai)瘤株;H22癸(gui)酸(suan)鈉 decanoate>99%,進分(fen)

SPARC Others Human  SPARC / Osteonectin 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)(美侖電泳級(ji))Agarose美侖，電泳級(ji)

髓(sui)母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞;Daoy瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)(Sigma)AgaroseSigma原裝
HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) L-（）HPLC>98%,,還(hai)原型(xing)Glutathione (Reduced)

CL-0338G1(發(fa)綠(lv)色(se)熒(ying)光(guang)的小鼠(shu)胚胎幹細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2（氧(yang)化(hua)型(xing)）度(du)大於98%,BRGlutathione(Oxidized)

ESAM Others Mouse 小鼠(shu) ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) DL-異(yi)>99%,BRDL-Isoleucine

小鼠(shu)肺大動脈(mai)內(nei)皮(pi)細(xi)胞*培養基 100mLL--γ-芐(bian)酯0.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester

Eca-109食(shi)管(guan)癌(ai)細(xi)胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBSL-苯(ben)芐(bian)酯鹽酸鹽0.98L-Phenylalanine benzyl ester
豬(zhu)傳染(ran)性(xing)胃腸(chang)炎病毒核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)小腦(nao)顆(ke)粒細(xi)胞HCGC2-(2-羥苯基)苯(ben)並(bing)惡唑(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole

CD276 Others Human  CD276 / B7-H3 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 5,6-二(er)溴(xiu)-2,1,3-苯(ben)並(bing)噻二(er)唑(zuo)(>98.0%(GC))>98.0%(GC)5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole

L929 小鼠(shu)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞2-(2-羥苯基)苯(ben)並(bing)噻唑(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole

CM-H043肝(gan)實(shi)質細(xi)胞*培養基100mL1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)1-Aminopyrene

SK-MEL-1, 皮(pi)膚(fu)色(se)素瘤細(xi)胞2,5-二(er)溴(xiu)噻(sai)唑(>97.0%(GC))>97.0%(GC)2,5-Dibromothiazole