亨德(de)拉病毒核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（熒(ying)光PCR法）

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 產(chan)品(pin)名稱：亨德(de)拉病毒核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（熒(ying)光PCR法）
規(gui)格(ge)：50T
編號：BH-P96691
分類：熒(ying)光PCR法
儲存條件：-20℃避光保(bao)存(cun)，避免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸：低(di)溫(wen)、避光，快遞(di)免費(fei)送貨上(shang)門(men)。
產(chan)品(pin)特(te)點：
◇高(gao)特(te)異性：與其(qi)他病毒無(wu)交叉(cha)反應，無(wu)非(fei)特(te)異性擴增(zeng)；
◇高(gao)靈敏(min)度：檢測(ce)靈敏(min)度可(ke)達(da)10~100拷貝(bei)；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)：該(gai)系列所有試(shi)劑(ji)均(jun)采用相同(tong)的體(ti)系和條件，可(ke)同(tong)時(shi)進(jin)行(xing)多個檢測(ce)；
◇高(gao)通量：多種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢測(ce)以及(ji)三重PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)。

準(zhun)備(bei)物(wu)品(pin)：
清(qing)理液（A）                                   毫升(sheng)
染(ran)色液（t B）                                   微(wei)升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液(ye)（C）                                   毫升(sheng)
溶解液（tD）                                   毫升(sheng)
產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書                                   1份(fen)
使(shi)用(yong)及(ji)效果：
PCR反應特(te)點
(1) 特(te)異性強(qiang)
PCR反應的特(te)異性決定(ding)因素為(wei)：
①引(yin)物(wu)與模(mo)板DNA特(te)異正(zheng)確(que)的結(jie)合；
②堿基(ji)配(pei)對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚合酶合成(cheng)反應的忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶基(ji)因(yin)的特(te)異性與保(bao)守(shou)性。
其中(zhong)引(yin)物(wu)與模(mo)板的正(zheng)確(que)結(jie)合(he)是(shi)關鍵(jian)。引(yin)物(wu)與模(mo)板的結(jie)合及(ji)引(yin)物(wu)鏈的延(yan)伸是(shi)遵循(xun)堿(jian)基(ji)配(pei)對(dui)原則(ze)的。聚合酶合成(cheng)反應的忠(zhong)實(shi)性(xing)及(ji)Taq DNA聚合酶耐高(gao)溫(wen)性，使(shi)反應中(zhong)模(mo)板與(yu)引(yin)物(wu)的結(jie)合(復性)可(ke)以在(zai)較(jiao)高(gao)的溫(wen)度下(xia)進行(xing)，結合(he)的特(te)異性大(da)大(da)增(zeng)加，被(bei)擴增(zeng)的靶(ba)基(ji)因(yin)片(pian)段也就(jiu)能保(bao)持(chi)很高(gao)的正(zheng)確(que)度。再通過選擇特(te)異性和保(bao)守(shou)性高(gao)的靶(ba)基(ji)因(yin)區(qu)，其(qi)特(te)異性程(cheng)度就(jiu)更(geng)高(gao)。
(2) 靈敏(min)度高(gao)
PCR產(chan)物(wu)的生成(cheng)量(liang)是(shi)以指(zhi)數(shu)方式(shi)增(zeng)加的，能將(jiang)皮(pi)克(pg=10-12g)量級(ji)的起(qi)始待(dai)測(ce)模(mo)板擴(kuo)增(zeng)到微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能從100萬(wan)個細胞(bao)中(zhong)檢(jian)出(chu)壹(yi)個靶細胞(bao)；在病毒的檢(jian)測(ce)中(zhong)，PCR的靈敏(min)度可(ke)達(da)3個RFU(空斑(ban)形(xing)成(cheng)單(dan)位(wei))；在細菌學中(zhong)zui小檢出率為(wei)3個細菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快速(su)
PCR反應用(yong)耐高(gao)溫(wen)的Taq DNA聚合酶，壹次(ci)性(xing)地(di)將(jiang)反應液(ye)加好(hao)後(hou)，即在DNA擴增(zeng)液(ye)和水(shui)浴鍋上(shang)進(jin)行變(bian)性(xing)-退火(huo)-延伸反應，壹(yi)般(ban)在2～4 小時(shi)完(wan)成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反應。擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)壹般(ban)用電(dian)泳分(fen)析，不(bu)壹定要(yao)用(yong)同(tong)位素(su)，無(wu)放(fang)射(she)性汙染(ran)、易(yi)推廣。
(4) 對(dui)標本(ben)的純(chun)度要求(qiu)低(di)
不需要分離病毒或(huo)細菌及(ji)培養(yang)細胞(bao)，DNA 粗制品(pin)及(ji)總RNA均可(ke)作(zuo)為(wei)擴增(zeng)模(mo)板。可(ke)直(zhi)接用臨床標(biao)本(ben)如血(xue)液(ye)、體腔液、洗(xi)嗽液、毛發、細胞(bao)、活PCR技(ji)術概(gai)論。
視(shi)網膜色素上(shang)皮(pi)細胞(bao)總RNAHRPEpiC NA鄰(lin)香(xiang)蘭素(su)(>98%,BR)o-Vanillin>98%，BR

ARG1 Others Human  Arginase-1 / ARG1 細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 草(>98%,BR)Oxalyldihydrazide>98%，BR

MG-63 成(cheng)骨(gu)肉(rou)瘤(liu)細胞(bao)惡唑(zuo)(>96%，BC)Oxazole>96%，BC

CL-0385MFC-GFP(小鼠前(qian)胃(wei)癌(ai)細胞(bao)(綠色熒(ying)光蛋白(bai)標(biao)記(ji)))5×106cells/瓶×2乙(yi)酸鈀(ba)Palladium (II) acetateBC

MLF, 小鼠成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)氯化鈀Palladium (II) chlorideBC
HA Others H10N3 甲型流感(gan) H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 8-羥基(ji)喹(kui)哪啶(>98%,BR)>98%,BR8-Hydroxyquinaldine

CL-0216SMMC-7721(肝癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶×29,10-二溴蒽(en)(>98%,BR)>98%,BR9,10-Dibromoanthracene

MST4 Others Human  MST4 桿狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照) 雙酚芴(>98%,BR)>98%,BR9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorine

成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)-胎(tai)兒(er)cDNAHDF-f cDNA酸性(xing)藍29(>50%，Ind Grade)>50%，Ind GradeAcid blue 29

5637細胞(bao)，膀胱(guang)癌(ai)細胞(bao) 胚肺成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao),CCC-HPF-1細胞(bao) 骨骼肌細胞(bao)Many types of cells　5 × 105方(1ml)7-(二甲基(ji)氨(an)基(ji))-4-三氟(fu)甲基(ji)(>97.0%(GC)(T))>97.0%(GC)(T)7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin
亨德(de)拉病毒核酸檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（熒(ying)光PCR法）腎透明(ming)細胞(bao)癌(ai);Caki-1明(ming)膠(jiao)蛋白(bai)腖(dong)shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：RT，避光25克

表皮(pi)角(jiao)質細胞(bao)-新(xin)生兒(er)(HEK-n)( 5×105 )啊(a)利(li)新(xin)皇 GXS clcicn Yqllow 61968-76-1

RGC-5, 小鼠視(shi)網膜神(shen)經(jing)節細胞(bao)環己(ji)1;1,2,3,4-四(si)輕化本(ben) Cyclohqxqnq 110-83-8

十二脂腸腺癌(ai);HuTu-80 大(da)鼠前(qian)列腺上(shang)皮(pi)細胞(bao)*培養(yang)基(ji) 100mL矽鎢酸10克2～8℃，避光

NFS-60 小鼠白血(xue)病細胞(bao)G-CSF依賴性Cytidine 5g/10g/25g/50g Amresco 0182
檢測(ce)步(bu)驟：
壹、 試(shi)劑(ji)的準(zhun)備(bei)
從試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)取(qu)出(chu)熒(ying)光PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混合物(wu)(Enzymes MIX)，冰上(shang)融(rong)化並振蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou)，10000rpm離心10s。
設所需要(yao)的PCR反應管(guan)管(guan)數為(wei)N(N=樣本(ben)數+1管陰性對(dui)照+1管陽性對(dui)照)，每(mei)個測(ce)試(shi)反應體(ti)系配(pei)制如(ru)下(xia)表：
試(shi)劑(ji) 每(mei)個反應加入(ru)的量(liang) N個反應加入(ru)的量(liang)
熒(ying)光PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混合物(wu) 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好(hao)各(ge)試(shi)劑(ji)的使(shi)用(yong)量(liang)，加入(ru)壹適(shi)當體(ti)積(ji)潔(jie)凈離心管(guan)中(zhong)，充(chong)分混勻(yun)，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管(guan)中(zhong)分(fen)別加入(ru)15μL熒(ying)光PCR反應液(ye)，向(xiang)每(mei)管中(zhong)加入(ru)處理後樣品(pin)或陰(yin)性對(dui)照(NTC)和陽性對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離心10秒。
7.2 qPCR反應條(tiao)件(jian)
將(jiang)各(ge)反應管(guan)放(fang)入(ru)定量(liang)PCR儀(yi)器(qi)的反應槽(cao)內(nei)。
循(xun)環(huan)條(tiao)件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變(bian)性 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增(zeng) 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shi)收(shou)集(ji)熒(ying)光信(xin)號。報(bao)告(gao)基(ji)團(tuan)：設(she)置(zhi)為(wei)FAM。淬滅基(ji)團(tuan)：NONE，請(qing)勿選擇ROX參(can)比(bi)熒(ying)光。