人(ren)GAPDH基(ji)因核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑盒（熒光PCR法）

產(chan)品特點：
◇高(gao)特異性(xing)：與(yu)其他(ta)病毒(du)無(wu)交叉(cha)反應，無(wu)非特異性(xing)擴(kuo)增；
◇高(gao)靈敏(min)度：檢測靈敏(min)度可達10~100拷貝；
◇操作簡便(bian)：該系(xi)列所(suo)有試劑(ji)均(jun)采(cai)用相同的(de)體系(xi)和條(tiao)件，可(ke)同時(shi)進行(xing)多(duo)個檢測；
◇高(gao)通量(liang)：多(duo)種雙重PCR檢測以(yi)及(ji)三重(zhong)PCR檢測試(shi)劑盒。

訂購(gou)信(xin)息：
 產(chan)品名稱：人(ren)GAPDH基(ji)因核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑盒（熒光PCR法）
規格(ge)：50T
編(bian)號：BH-P96713
分類(lei)：熒光PCR法
儲(chu)存(cun)條件：-20℃避光保存(cun)，避免反復凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸：低溫(wen)、避光，快遞免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上(shang)門。

準(zhun)備物品：
清(qing)理液（A）                                   毫(hao)升
染色液（t B）                                   微升(sheng)
稀(xi)釋液（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品說(shuo)明(ming)書                                   1份(fen)
使(shi)用及效果：
PCR反應特(te)點
(1) 特(te)異性(xing)強(qiang)
PCR反應的(de)特異性(xing)決(jue)定因素為(wei)：
①引(yin)物與(yu)模板DNA特(te)異正確(que)的(de)結合；
②堿(jian)基配對原(yuan)則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合酶合成(cheng)反應的(de)忠(zhong)實(shi)性；
④靶基因的(de)特異性(xing)與(yu)保守(shou)性(xing)。
其(qi)中引物與(yu)模板的(de)正確(que)結合是(shi)關鍵。引(yin)物與(yu)模板的(de)結合及(ji)引(yin)物鏈(lian)的(de)延伸(shen)是(shi)遵循堿(jian)基配(pei)對(dui)原(yuan)則(ze)的(de)。聚合酶合成(cheng)反應的(de)忠(zhong)實(shi)性及(ji)Taq DNA聚(ju)合酶耐高(gao)溫(wen)性，使(shi)反應中(zhong)模板與(yu)引物的(de)結合(復(fu)性)可(ke)以(yi)在較(jiao)高的(de)溫(wen)度下進行(xing)，結合的(de)特異性(xing)大(da)大(da)增加，被(bei)擴(kuo)增的(de)靶基因片(pian)段也(ye)就(jiu)能保持(chi)很高(gao)的(de)正確(que)度。再通過(guo)選(xuan)擇特(te)異性(xing)和(he)保(bao)守性高的(de)靶基因區，其(qi)特(te)異性(xing)程度就更高。
(2) 靈敏(min)度高
PCR產(chan)物的(de)生成(cheng)量是(shi)以(yi)指(zhi)數方(fang)式(shi)增加的(de)，能將皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始待測模板擴(kuo)增到微克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平。能從(cong)100萬(wan)個細(xi)胞中(zhong)檢出(chu)壹(yi)個靶細(xi)胞；在病毒的(de)檢測中(zhong)，PCR的(de)靈敏(min)度可達3個RFU(空(kong)斑形成(cheng)單(dan)位(wei))；在細(xi)菌學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢出(chu)率(lv)為(wei)3個細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快速
PCR反應用耐高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合酶，壹(yi)次(ci)性(xing)地將反應液(ye)加好後(hou)，即(ji)在DNA擴(kuo)增液和(he)水浴(yu)鍋上(shang)進(jin)行變性-退(tui)火-延伸(shen)反應，壹(yi)般(ban)在2～4 小(xiao)時完成擴(kuo)增反應。擴(kuo)增產物壹(yi)般(ban)用電泳(yong)分析(xi)，不壹(yi)定要用同位(wei)素，無(wu)放(fang)射性(xing)汙(wu)染、易(yi)推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標本的(de)純度要求低
不需(xu)要分離病毒(du)或(huo)細(xi)菌及(ji)培(pei)養(yang)細(xi)胞，DNA 粗制(zhi)品及總(zong)RNA均(jun)可作為(wei)擴(kuo)增模板。可直接用臨床標本(ben)如血(xue)液、體腔(qiang)液(ye)、洗(xi)嗽液、毛(mao)發(fa)、細(xi)胞、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概(gai)論(lun)。

檢測步(bu)驟(zhou)：
壹(yi)、 試(shi)劑的(de)準備(bei)
從(cong)試(shi)劑(ji)盒中(zhong)取出(chu)熒光PCR反應液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶混(hun)合物(Enzymes MIX)，冰上(shang)融(rong)化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻後，10000rpm離心10s。
設(she)所需(xu)要的(de)PCR反應管(guan)管數為(wei)N(N=樣(yang)本數+1管(guan)陰(yin)性對(dui)照(zhao)+1管(guan)陽性對(dui)照)，每(mei)個測試(shi)反應體(ti)系(xi)配制(zhi)如(ru)下表(biao)：
試(shi)劑 每(mei)個反應加(jia)入(ru)的(de)量 N個反應加(jia)入(ru)的(de)量
熒光PCR反應液(ye) 14µL N×14µL
酶混(hun)合物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好各(ge)試(shi)劑(ji)的(de)使用量，加入(ru)壹(yi)適(shi)當(dang)體積(ji)潔凈離心管(guan)中，充分混(hun)勻，10000rpm離心10s，向(xiang)設定的(de)N個PCR反應管(guan)中分別加入(ru)15μL熒光PCR反應液(ye)，向(xiang)每(mei)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)處理後樣(yang)品或(huo)陰(yin)性對(dui)照(zhao)(NTC)和(he)陽性對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離心10秒(miao)。
7.2 qPCR反應條(tiao)件
將各反應管(guan)放(fang)入(ru)定量PCR儀(yi)器(qi)的(de)反應槽(cao)內。
循(xun)環(huan)條(tiao)件:
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變性 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收集熒光信(xin)號。報(bao)告(gao)基團(tuan)：設(she)置(zhi)為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基團(tuan)：NONE，請(qing)勿選(xuan)擇ROX參(can)比熒光。
腎皮(pi)質近曲小(xiao)管上(shang)皮(pi)細(xi)胞;HK-2鹽(yan)酸(suan)()Clindamycin HCl>800μg/mg,含(han)量測定

HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan) H5N1 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) Verapamil HCl>99%,USP32,BR,可(ke)用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)

原(yuan)代(dai)肝實(shi)質細(xi)胞特(te)制(zhi)基(ji)礎(chu)無(wu)血清(qing)培養(yang)基Many types of cells　500/100ml（）Verapamil HClHPLC>98%,

RK1 Others Rat 大(da)鼠 kA / RK1 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 黴(mei)酚酸(suan); 麥考酚酸(suan);MPAMycophenolic acid>98%,BR

EB病(bing)毒轉(zhuan)化(hua)的(de)B細(xi)胞;KMY0904黴(mei)酚酸(suan); 麥考酚酸(suan)（）Mycophenolic acidHPLC>97%,
無(wu)色素睫狀(zhuang)上(shang)皮(pi)細(xi)胞裂解(jie)物HNPCEpiCL鹽(yan)酸(suan)苯(ben)乙雙胍/降(jiang)糖靈/鹽(yan)酸(suan)苯(ben)乙福明(ming)≥99.0%,BR,可(ke)用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)Phenformin

M453細(xi)胞，癌細(xi)胞 鼠(shu)肉瘤(liu)細(xi)胞,S-180-S2D9細(xi)胞 卵(luan)巢(chao)癌組(zu)織源(yuan)性原(yuan)代(dai)細(xi)胞Many types of cells　5 × 105方(fang)(1ml)/1ml鹽(yan)酸(suan)苯(ben)乙雙胍/降(jiang)糖靈/鹽(yan)酸(suan)苯(ben)乙福明(ming)()≥98.0%,用於(yu)含量(liang)測定Phenformin

B16-F10(小(xiao)鼠皮(pi)膚(fu)色素瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2鈉(na)870μg-1015μg /mg,USP,BRCefoperazone

NHEM M2 adult Pellet 正常表(biao)皮(pi)素細(xi)胞團(tuan)塊(kuai)(捐獻(xian)者(zhe))，培(pei)養在M2培(pei)養液中 > 1 mio.cells 腎小球(qiu)內皮(pi)細(xi)胞裂解(jie)物HRGECL鈉(na)()效(xiao)價(jia)測定Cefoperazone

CL-0170NG108-15(小(xiao)鼠神(shen)經細(xi)胞瘤(liu)與(yu)大鼠(shu)神(shen)經膠(jiao)質瘤(liu)之(zhi)融(rong)合細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×22-甲(jia)基吲(yin)哚(duo)(>97%，BR)>97%，BR2-Methylindole
人(ren)GAPDH基(ji)因核(he)酸(suan)檢測試(shi)劑盒（熒光PCR法）CM-H059頸(jing)上(shang)皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基(ji)100mL1-nitnoso-2-naphtholα-亞(ya)硝(xiao)基-β-奈酚100毫(hao)克(ke)IND

SGC-7901, 胃(wei)腺癌細(xi)胞系(xi)1,1,2,2-氘(dao)代(dai)四錄(lu)烷 1,1,2,2-TqTRcCHLOROqTHcNq-D2 33682-24-0

胰(yi)腺癌細(xi)胞;PANC-1 角(jiao)膜(mo)內皮(pi)細(xi)胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL麥芽糖醇(chun) Mcltitol; 282-88-6

神(shen)經束膜(mo)細(xi)胞cDNAHPC cDNAFmoc-Arg(Pbf)-OHFmoc-Pbf-精(jing)酸(suan)500克(ke)BR，98%

TIGIT Others Mouse 小(xiao)鼠 TIGIT / VSTM3 細(xi)胞裂解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 二異胺punum》98.0%Diisopropanolamine