SNU-1581細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅供科研研究(jiu)使(shi)用、不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品介(jie)紹：

1、細胞(bao)傳代：

1）細胞生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再輕輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比例進行(xing)分瓶(ping)傳代，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)培養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生(sheng)長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加入培養(yang)液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜，24h 後(hou)轉入液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序(xu)降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書為主。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄去上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻。然後(hou)將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸液加入含適量培養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或將細(xi)胞(bao)懸液加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜）。第二天(tian)換液(ye)並檢(jian)查細胞(bao)密度。

2) 細胞傳代：如果細(xi)胞密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代培養。

a、棄去培養上清(qing)，用不(bu)含鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細胞(bao)，將培養瓶置於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而定），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變圓並脫落，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上清(qing)液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻。

c、將細(xi)胞懸液按(an)1:2比例分到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養(yang)液，裝入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根據細胞數量(liang)加入無血清(qing)細胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍(dong)存(cun)管凍存(cun)1mL細胞懸液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管做好標識(shi)。將凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿取。

三、培(pei)養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶是否完(wan)好，培養液是否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說明(ming)書，了解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞形態(tai)、所用(yong)培(pei)養基、血清(qing)比例、所需 細(xi)胞因子等(deng)，確(que)保(bao)細(xi)胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條(tiao)件不壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變化(hua)及(ji)劇烈碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培(pei)養(yang)基重懸 細胞(bao)，並接種到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由(you)於運(yun)輸的(de)原因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞會出現(xian)不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便我(wo)們的(de)技術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請換用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收到細胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳代建議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。

公司(si)正在(zai)出售的(de)產品(pin)：

大(da)鼠補體(ti)因子D(adipsin)(CFD)ELISA試劑盒(he) ，英(ying)文(wen)名(ming)： CFD ELISA Kit

Humahymosinα1ELISAKit人肽(tai)α1(Thymosinα1)ELISA試劑盒(he)規格：96T/48T

Mouse substance P receptor (SP-R) ELISA Kit 小(xiao)鼠(shu)P物質(zhi)受體(ti)(SP-R)ELISA試劑盒(he)

ELISA 小(xiao)鼠(shu)D-二聚(ju)體(ti)(mouse D-Dimer) 48T/96T 進口分裝

CLIAKitforLAT(MouseLinkerforactivationofTcell)ELISAKit小(xiao)鼠(shu)T細胞(bao)活化(hua)連(lian)接蛋(dan)白(bai)規格：48T/96T

Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌(ai)胚(pei)抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒(he)規格：96T/48T

人Ⅷ相(xiang)關(guan)抗原(Ⅷ-Ag)ELISA 試劑盒(he) 96T/48T 試劑盒(he) 組(zu)裝/原裝

小(xiao)鼠(shu)細(xi)胞(bao)角蛋(dan)白(bai)18-M65(CK 18-M65)免疫(yi)試劑盒(he) Mouse Cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA Kit

A組(zu)輪(lun)狀病毒(HRV-A)檢(jian)測試劑盒(he)(PCR-熒(ying)光探(tan)針(zhen)法(fa)) 48T

HumanSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒(he)人(SAA)ELISA試劑盒(he)規格：96T/48T

細胞(bao)C-KIT激酶(mei)活性(xing)定(ding)量檢(jian)測試劑盒(he)(A/B/C)20次

ELISAKitDPPⅣ大(da)鼠二肽(tai)基肽(tai)酶Ⅳ規(gui)格：48T/96T

大(da)鼠血漿α顆粒膜(mo)蛋(dan)白(bai)(GMP-140)ELISA試劑盒(he) ，英(ying)文(wen)名(ming)： GMP-140 ELISA Kit

人結(jie)核菌桿(gan)抗體(ti)IgG(TB-AbIgG)ELISA檢(jian)測試劑盒(he)HumauberculosisaibodyIgG,TB-AbIgGELISAKit 96T/48T

大(da)鼠KiSS-1受體(ti)(KISS1R)免疫(yi)試劑盒(he) Rat KiSS-1 receptor,KISS1R ELISA kit

腫(zhong)瘤抗體(ti)

果膠(jiao)酶抗體(ti)

乳(ru)腺癌(ai)基因(yin)刪除(chu)蛋(dan)白(bai)2抗體(ti)

MYC啟(qi)動(dong)子結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)1抗體(ti)

線粒(li)體(ti)核糖(tang)體(ti)蛋(dan)白(bai)L21抗體(ti)

白(bai)細胞介(jie)素(su)增(zeng)強(qiang)子結(jie)合(he)因子2抗體(ti)

磷酸化(hua)Smad2抗體(ti)

SNU-1581細胞(bao)cereblon蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

亞精(jing)胺合(he)成酶抗體(ti)