SNU-1544細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

壹(yi)、商品介紹(shao)：

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例進行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培養箱(xiang)中培養；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋培養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將懸液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將細胞凍(dong)存(cun)管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中進行(xing)長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程序降溫(wen)盒可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下細(xi)胞培養凍(dong)存(cun)處理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸液的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將所有(you)細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換液並檢(jian)查(zha)細(xi)胞密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸潤所有(you)細(xi)胞，將培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而定(ding)），然後(hou)在顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細胞(bao)大部分變(bian)圓並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液按(an)1:2比例分到新(xin)的(de)含8 mL培養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生長狀態(tai)良好(hao)時，可進行(xing)細胞(bao)凍存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細(xi)胞培養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

三、培養註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液(ye)是(shi)否有(you)漏液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上(shang)述現(xian)象 發生請及時和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細胞說明(ming)書(shu)，了解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用(yong)培養基(ji)、血清比(bi)例、所需 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細(xi)胞出現(xian)問題，責任由 客戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因運(yun)輸問題，部分細胞由於溫(wen)度 變(bian)化及劇(ju)烈碰亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培養基(ji)重懸 細胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的(de)培養瓶(ping)或培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶用(yong)相同條(tiao)件的(de)培養基(ji)用(yong)於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶收到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀(zhuang)態，便於和我司技術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細胞會(hui)出現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情(qing)況，請及時和我們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我們的(de)技術人員跟蹤回(hui)訪直至問題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供(gong)科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來培養細(xi)胞，請換用(yong)按照(zhao)說明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養基(ji)來培養細(xi)胞。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售(shou)的產(chan)品：

人D(IgD)免疫試劑(ji)盒(he) human Immunoglobulin D,IgD ELISA Kit

大鼠補(bu)體(ti)因子(zi)H(CFH)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組裝(zhuang)/原裝(zhuang)

MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit小(xiao)鼠血管(guan)內皮(pi)細(xi)胞生長因子(zi)受體(ti)2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑(ji)盒(he)規格(ge)：96T/48T

石蠟(la)切(qie)片(pian)組織(zhi)CASPASE-4蛋白(bai)表(biao)達NBT顯色光(guang)學顯微鏡檢測(ce)試劑(ji)盒(he)10/20次(ci)

HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑(ji)盒(he)人前(qian)列腺(xian)素(su)F2α(PGF2α)ELISA試劑(ji)盒(he)規格(ge)：96T/48T

人Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑(ji)盒(he) 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組裝(zhuang)/原裝(zhuang)

小(xiao)鼠細胞(bao)角蛋白(bai)21-1片(pian)段(duan)(CYFRA21-1)免疫試劑(ji)盒(he) Mouse cytokeratin fragme aigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA Kit

諾沃克病(bing)毒(NV)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)(PCR-熒光(guang)探(tan)針(zhen)法) 48T

HumanSerotonin,STELISA試劑(ji)盒(he)人血清素(su)/血清胺(an)(ST)ELISA試劑(ji)盒(he)規格(ge)：96T/48T

ELISAKitVIP小(xiao)鼠血管(guan)活性腸肽規格：48T/96T

ELISAKitSP-A大鼠肺(fei)表面活性物(wu)質(zhi)相關(guan)蛋(dan)白(bai)A規格(ge)：48T/96T

大鼠血漿過氧(yang)化物(wu)酶(mei)(GPX3)ELISA試劑(ji)盒(he) ，英(ying)文名： GPX3 ELISA Kit

Fish high sensitive C reactive protein (hs-CRP) ELISA Kit 魚(yu)類(lei)超敏(min)C反應(ying)蛋(dan)白(bai)(hs-CRP)ELISA試劑(ji)盒(he)

Mousesolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKIT 小(xiao)鼠可溶(rong)性腫瘤壞死(si)因子(zi)相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)(sAIL)ELISA試劑(ji)盒(he) 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanc-fosELISAKit人c-fos規格(ge)：48T/96T

腫瘤(liu)異(yi)常(chang)甲(jia)基(ji)化蛋白(bai)2抗(kang)體(ti)

廣譜(pu)細(xi)胞(bao)角蛋白(bai)PCK抗(kang)體(ti)

乳腺(xian)癌和卵巢(chao)癌易(yi)感基因RAD51C抗(kang)體(ti)

MYC結合(he)蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體(ti)

線(xian)粒(li)體(ti)核糖(tang)體(ti)蛋白(bai)L20抗(kang)體(ti)

白(bai)細(xi)胞(bao)介(jie)素(su)-7受體(ti)a（CD127）抗(kang)體(ti)

磷酸化SH3結構(gou)域結合(he)蛋白(bai)2抗(kang)體(ti)

SNU-1544細(xi)胞CERD4蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti)

亞(ya)甲(jia)基(ji)四(si)氫(qing)脫氫(qing)酶抗(kang)體(ti)