SNU-16細胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研研(yan)究使(shi)用、不得用於(yu)臨床診斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入 5ml 培養(yang)

液終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再輕輕吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後放入 37℃，5%CO2細胞(bao)培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的(de)培養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加入培養(yang)液終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並放置於凍存管(guan)中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期保存。使(shi)用程(cheng)序(xu)降(jiang)溫(wen)盒可直(zhi)接放入-80℃。

壹、商(shang)品(pin)介(jie)紹(shao)：

二、細胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處理僅供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸液的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸液加入含適量(liang)培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液加入10 cm皿(min)中，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二天(tian)換液並檢查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用不含鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液浸潤(run)所有細胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而定），然(ran)後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞(bao)消化(hua)情況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部分(fen)變圓(yuan)並脫落(luo)，迅速拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打勻(yun)後裝入無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養(yang)液，裝入無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數。

b、根據細胞(bao)數量(liang)加(jia)入無血清(qing)細胞(bao)凍存液，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管(guan)凍存1mL細胞(bao)懸液，註意凍存管(guan)做(zuo)好標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄凍存管(guan)位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿取。

三、培養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首先觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液是否(fou)有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及時(shi)和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因子等，確保細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致而導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度 變化及(ji)劇烈碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成碎片(pian)，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消化，懸浮細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培養(yang)基用於(yu)細胞(bao)培養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我司(si)技術(shu)部溝(gou)通 交(jiao)流。由於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩定的情況(kuang)，請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系，告知細胞(bao) 的具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題解決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液培養(yang)基) 不能再用來(lai)培養(yang)細胞(bao)，請換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在(zai)出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

ELISAKitSCT鮭(gui)魚(yu)規格(ge)：48T/96T

通(tong)用型(xing)VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定性檢測(ce)試劑盒(he)20次

大(da)鼠(shu)補體因子B(CFB)ELISA試劑(ji)盒 ，英文名： CFB ELISA Kit

Human alpha L iduronidase (IDUA) ELISA Kit 人(ren)αL艾杜糖(tang)苷酸(suan)酶(mei)(IDUA)ELISA試劑(ji)盒

Ratcardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 大(da)鼠(shu)心肌(ji)轉(zhuan)錄因子GATA4ELISA試劑(ji)盒 96T/48T 進(jin)口(kou)分裝

ELISAKitBrdU小(xiao)鼠(shu)溴(xiu)脫氧(yang)核(he)苷(gan)規格(ge)：48T/96T

Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISAKit人(ren)血(xue)紅蛋白(bai)(HbCO)ELISA試劑盒規格(ge)：96T/48T

人(ren)Ⅷ(FⅧ)ELISA 試(shi)劑盒 96T/48T 試(shi)劑盒(he) 組裝/原(yuan)裝

小(xiao)鼠(shu)細胞(bao)角(jiao)蛋白(bai)18-M30(CK 18-M30)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒(he) Mouse Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA Kit

B組輪狀病毒(HRV-B)檢測(ce)試劑盒(he)(PCR-熒(ying)光探針(zhen)法(fa)) 48T

CLIAKitforSmad7(HumanMothersagainstdecapeaplegichomolog7)ELISAKit人(ren)Smad7規格(ge)：48T/96T

乳酸鏈球菌(Septococcus)噬(shi)菌體特(te)異(yi)性PCR擴增(zeng)檢測(ce)試劑盒(he)20次

ELISAKitHCBⅡ人(ren)膠(jiao)原(yuan)蛋白(bai)Ⅱ規格(ge)：48T/96T

大(da)鼠(shu)血漿α顆粒(li)膜(mo)蛋白(bai)(GMP-140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑(ji)盒(he) 組裝/原(yuan)裝

人(ren)纖(xian)連蛋白(bai)(FN)免疫(yi)試(shi)劑(ji)盒(he) Human Fibronectin,FN ELISA Kit

腫瘤抑(yi)制(zhi)蛋白(bai)18抗體

果(guo)膠(jiao)酶(mei)抑制(zhi)蛋白(bai)18抗體

乳腺癌抗(kang)雌激素(su)抵抗(kang)蛋白(bai)2抗體

MYC誘導線(xian)粒(li)體蛋白(bai)抗體(ti)

線(xian)粒(li)體核糖(tang)體蛋白(bai)L22抗體

白細胞(bao)介(jie)素(su)增(zeng)強子結合因子3抗體(ti)

磷酸(suan)化(hua)Smad2重組兔(tu)單克隆抗(kang)體

SNU-16細胞(bao)Cervical cancer oncogene 3/宮(gong)頸(jing)癌(ai)原(yuan)癌基因(yin)3抗(kang)體

亞硫(liu)酸鹽氧(yang)化(hua)酶(mei)抗體(ti)