TE-10細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅供科研研究使用(yong)、不(bu)得用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止(zhi)消化，再輕輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重懸，然(ran)後按 1:2 比例進行分瓶傳(chuan)代，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養液終

止(zhi)消化，輕輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進(jin)行長期(qi)保存(cun)。使(shi)用程(cheng)序降溫(wen)盒(he)可直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處理(li)僅供參(can)考(kao)，具體操作步驟以隨貨產(chan)品說明(ming)書為主。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養基後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量(liang)培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消化液(ye)浸潤(run)所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然(ran)後在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作臺(tai)，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基終止(zhi)消化。輕輕打勻(yun)後裝入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿中(zhong)或者瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀態良(liang)好(hao)時，可進行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存(cun)管(guan)位置以便(bian)下(xia)次(ci)拿取(qu)。

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培(pei)養液是(shi)否(fou)有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請及(ji)時和(he)我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說明(ming)書，了(le)解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用培(pei)養基、血(xue)清(qing)比例、所需 細胞(bao)因(yin)子等，確(que)保細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞(bao)出現問(wen)題，責(ze)任由 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀察好(hao)細胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可以消化，懸(xuan)浮細胞(bao)直接混(hun)勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基重懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養基用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於和(he)我司(si)技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況，請及(ji)時和(he)我們聯(lian)系，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具體情(qing)況，以便(bian)我們的(de)技術人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至問題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研使用。

8. 備註(zhu)：運輸用的(de)培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能再用(yong)來(lai)培(pei)養細胞(bao)，請換(huan)用按照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件新(xin)配制的(de)培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公司(si)正(zheng)在出售的(de)產(chan)品：

大鼠半乳(ru)凝(ning)素(su)4(GAL4)ELISA試劑盒(he) ，英文(wen)名： GAL4 ELISA Kit

Ratc-JunN-terminalkinases,JNKELISAKit大鼠c-Jun氨基末(mo)端(duan)激酶(JNK)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

Human alpha synuclein (alpha -SYN) ELISA Kit 人α突(tu)觸(chu)核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒(he)

NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit 裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒(he) 96T/48T 進口(kou)分裝(zhuang)

CLIAKitforColIIIELISAKit大鼠Ⅲ型(xing)膠原(yuan)規格(ge)：48T/96T

HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit人Bcl-2相關(guan)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

人苗(miao)條(tiao)素(su)受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒(he) 96T/48T 試劑盒(he) 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝

小(xiao)鼠胎(tai)盤生(sheng)長因(yin)子(PLGF)免疫(yi)試劑盒(he) Mouse placea growth factor,PLGF ELISA kit

羊特(te)定(ding)基因(yin)序列(lie)(Ovine)檢(jian)測(ce)試劑盒(he) 48T

HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISA試劑盒(he)人特異性(xing)巨噬(shi)細胞(bao)武(wu)裝因(yin)子(SMAF)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

HumanHyaluronicacid,HAELISA試劑盒(he)人透明(ming)質酸(HA)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

Humanmalondialchehyche，MDAELISAKit人二(er)(MDA)ELISA試劑盒(he)規(gui)格(ge)：96T/48T

大鼠血管(guan)內皮細胞(bao)生(sheng)長因(yin)子(VEGF)ELISA試劑盒(he) ，英文(wen)名： VEGF ELISA Kit

人阿米(mi)巴(ba)(Amebiasis)ELISA檢(jian)測(ce)試劑盒(he)HumanAmebiasisELISAKit 96T/48T

大鼠CXC趨(qu)化因(yin)子配(pei)體16(CXCL16)免疫(yi)試劑盒(he) Rat CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit

周(zhou)期(qi)素(su)D結合(he)蛋白1抗體

海棠(tang)(植物(wu)) 14-3-3蛋白抗體

基化組(zu)蛋白H3抗體

NDST1蛋白抗體

線粒體鈉(na)/氫交(jiao)換(huan)蛋白質2抗體

半乳(ru)糖神(shen)經酰胺(an)磺(huang)基(ji)轉移酶2抗體

磷酸化沈(chen)默調節(jie)蛋白1抗體

TE-10細(xi)胞(bao)CTDSPL蛋白抗體

氧(yang)固醇結合(he)蛋白樣6抗體