粉萆薢(薢)探針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒保(bao)存

儲存條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收集、處(chu)理(li)及保存方(fang)法(fa)
1. 血清：使(shi)用(yong)不(bu)含熱原(yuan)和(he)內(nei)毒(du)素的試(shi)管(guan)，操作(zuo)過程中避(bi)免(mian)任何(he)細(xi)胞刺(ci)激(ji)，收集血液後，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)將血清和(he)紅細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝素抗(kang)凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分鐘(zhong)取(qu)上清。
3. 細(xi)胞上清液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適量(liang)生理(li)鹽水搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保存：如(ru)果(guo)樣(yang)本收集後不及時檢測，請(qing)按(an)壹(yi)次用(yong)量(liang)分裝(zhuang)，凍存於-20℃，避免(mian)反(fan)復凍融，在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍並(bing)確保樣(yang)品均(jun)勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍。

特點(dian)：
1. 即開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶(hu)只(zhi)需要(yao)提供病(bing)毒(du)樣(yang)品。
2. 根據地(di)黃(huang)保(bao)守(shou)序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的(de)專壹性引(yin)物(wu)，與相關(guan)病(bing)毒(du)無交叉反(fan)應。
3. 靈敏度可以(yi)達到(dao)幾百拷貝/反(fan)應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測，避(bi)免(mian)後續(xu)汙染(ran)。
5. 本試(shi)劑(ji)盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應體系的(de)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只(zhi)適用(yong)於科(ke)研(yan)，不(bu)能用(yong)於臨床診斷(duan)。

使用(yong)方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品采(cai)集：
1、食品(pin)樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采集與預培(pei)養(yang)按(an)照樣(yang)品的(de)采集與預培(pei)養(yang)按(an)照《食品(pin)衛(wei)生微生(sheng)物(wu)學(xue)檢驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢驗(yan)要求(qiu)進(jin)行。
2、血液樣(yang)品：用(yong)無(wu)菌(jun)註射器(qi)抽取(qu)受(shou)檢者(zhe)靜(jing)脈(mai)血2mL，註入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即混(hun)勻(yun)。
3、糞便樣(yang)品：取(qu)糞便置(zhi)於滅(mie)菌(jun)的收集管(guan)中送(song)檢。
4、病(bing)竈(zao)部位(wei)樣(yang)品：取(qu)發病(bing)部位(wei)新(xin)鮮滲出(chu)物(wu)、粘液膿(nong)血送(song)檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註意：由於標準(zhun)品濃(nong)度非(fei)常高，因(yin)此下列稀釋(shi)操作(zuo)壹定(ding)要在(zai)獨立(li)的區域(yu)進行，千(qian)萬不能汙染(ran)樣(yang)品或(huo)本試(shi)劑(ji)盒的(de)其他成(cheng)分）。為(wei)增加(jia)產(chan)品穩(wen)定性和(he)避免擴散傳染(ran)性病(bing)原(yuan)，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提供活體樣(yang)品做陽性對(dui)照，只(zhi)提供可以(yi)直接(jie)使用(yong)的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽性對(dui)照。
2. 標記(ji) 6 個離(li)心(xin)管，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板(ban)稀釋(shi)液（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(dui)照，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(dui)照(上步稀釋(shi)所得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管(guan)中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(dui)照到 5 號管(guan)中，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的(de)操作(zuo)直到(dao)得(de)到 6 個稀釋(shi)度的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
註：上述樣(yang)品建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增菌(jun)後，收集培(pei)養(yang)物(wu)用(yong)於檢測。 
二、DNA提取(qu)：
可采用(yong)PCR試(shi)劑(ji)盒配(pei)備的DNA抽提液(ye)，按(an)以(yi)下說明(ming)進行DNA核(he)酸(suan)的(de)粗(cu)提。也(ye)可采購(gou)上海澤(ze)葉(ye)生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有(you)限(xian)公(gong)司生(sheng)產的DNA提取(qu)試(shi)劑(ji)盒(過柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配(pei)套)或(huo)其他合(he)適的(de)商業化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按(an)照相應試(shi)劑(ji)盒說(shuo)明(ming)進行操作(zuo)。
1、液體培養(yang)物(wu)：取(qu)液體培養(yang)物(wu)100μL加(jia)到(dao)1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡量(liang)吸棄(qi)上清，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進行PCR反(fan)應。
2、固體培養(yang)物(wu)：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上清5μL進行PCR反(fan)應。
3、糞便樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大小(xiao)糞便於滅(mie)菌(jun)離(li)心(xin)管中，加(jia)入(ru)0.5mL生理(li)鹽水，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進行PCR反(fan)應。
4、其他液(ye)體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄上清，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上清5μL進行PCR反(fan)應。
註：陽性對(dui)照和陰性對(dui)照為(wei)已(yi)經(jing)抽提好(hao)的(de)核(he)酸(suan)(無需提取(qu))，直接(jie)取(qu)5μL加(jia)入(ru)到反(fan)應體系中即(ji)可。由於陽性對(dui)照濃(nong)度較(jiao)高，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品制(zhi)備區(qu)域(yu)加(jia)入(ru)陽性對(dui)照。 
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 替尼泊(bo)甙(dai)，替(ti)尼泊(bo)苷(gan)Teniposide質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

兔(tu)腎(shen)細(xi)胞;RK-13替尼泊(bo)甙(dai)，替(ti)尼泊(bo)苷(gan)（標準(zhun)品）Teniposide質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標準(zhun)品

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 富馬(ma)酸(suan)酯;泰諾福韋(wei)酯Tenofovir disoproxil fumarate質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,富馬(ma)酸(suan)鹽,BR

Ishikawa 人內(nei)膜(mo)癌細(xi)胞富馬(ma)酸(suan)（標準(zhun)品）Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate質(zhi)量(liang)規格(ge)：≥98%，標準(zhun)品

T84人結(jie)腸腺癌肺轉(zhuan)移細(xi)胞 The cell T84 of human colon adenocarcinoma of lung metastasis D-MEM/F-12培養(yang)基(ji)+5%FBS替諾(nuo)昔(xi)康Tenoxicam質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,BP2007,EP5.
FSTL1 Others Human 人 FSL1 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 1,1'-亞甲(jia)基(ji)二-2-萘(nai)酚(>97.0%(GC))1,1'-Methylenedi-2-naphthol質(zhi)量(liang)規格(ge)：>97.0%(GC)

巨噬(shi)細(xi)胞培養基MaM2-萘(nai)基芐基(ji)(>98.0%(GC))Benzyl 2-Naphthyl Ether質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(GC)

SERPINB1 Others Human 人 SerpinB1 / ELANH2 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 5-溴(xiu)吲哚 5-Bromoindole 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%

人正(zheng)常細(xi)胞;Hs 578Bst依魯(lu)替尼(PCI32765)Ibrutinib,PCI-32765質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BTK抑制(zhi)劑(ji)

EB細(xi)胞，牛胚氣(qi)管細(xi)胞 人結(jie)腸癌細(xi)胞,Ls-174-T細(xi)胞 CM-H077人心(xin)室肌(ji)細(xi)胞*培養基100mL右(you)旋(標準(zhun)品)(R)-Lansoprazole質(zhi)量(liang)規格(ge)：含量(liang)測定(ding)，標準(zhun)品
RLE-6TN細(xi)胞，大鼠肺上皮(pi)Ⅱ型細(xi)胞 PC-3(人前(qian)列(lie)腺癌細(xi)胞) 大鼠肝(gan)細(xi)胞;BRL 3A別(bie)隱(yin)品堿(jian);A-別(bie)隱(yin)品堿(jian)(標準(zhun)品) Allocryptopine 質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC≥98%,標準(zhun)品

EFNB2 Protein Rat 重(zhong)組(zu)大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白(bai) (His 標簽)LGD-4033 LGD4033 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BR

16HBE(人支(zhi)氣(qi)管上皮(pi)樣(yang)細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B細(xi)胞雜交瘤細(xi)胞;SH35-溴(xiu)嘧(mi)啶(ding)5-Bromopyrimidine 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%

人喉癌(ai)上皮(pi)細(xi)胞;Hep-2阿(e)17-DMAG質(zhi)量(liang)規格(ge)：HSP90 抑制(zhi)劑(ji)，進(jin)分(fen)

LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 大豆(dou)異(yi)黃(huang)酮(tong)Soybean isoflavones質(zhi)量(liang)規格(ge)：染(ran)料木素17%-20%,異黃(huang)酮(tong)含量(liang)在(zai)40-50%
粉萆薢(薢)探針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒保(bao)存KIRREL3 Others Mouse 小鼠 KIRREL3 人細(xi)胞裂解(jie)液 (陽性對(dui)照) 紅細(xi)胞稀釋(shi)液(計數液)shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：1公(gong)斤

CWbRL 刺(ci)毛鼠肺成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細(xi)胞2.3-二錄-1-炳醇 2,3-DICHLORO-1-PROPcNOL 616-3-9

CM-M116小鼠視網膜(mo)色(se)素上皮(pi)細(xi)胞*培養基100mL司盤(pan)60shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：2～8℃25毫克(ke)

hDPSCs, 人前(qian)磨(mo)牙(ya)牙(ya)髓(sui)幹(gan)細(xi)胞腐草(cao)黴素shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：2～8℃1克(ke)

EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化(hua)的(de)人(ren)
實驗(yan)流(liu)程：
1. 整(zheng)個(ge)檢測過(guo)程應嚴(yan)格(ge)按(an)照本說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備區(qu)、樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)和PCR擴增區(qu)進(jin)行操作(zuo)，各(ge)區實(shi)驗服、儀器(qi) 、耗材(cai)應獨立(li)使用(yong)，不(bu)能混(hun)用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸(xi)頭(tou)采(cai)用(yong)帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本處(chu)理(li)區(qu)應配(pei)有生物(wu)安(an)全櫃，樣(yang)本處(chu)理(li)在(zai)生物(wu)安(an)全櫃中進(jin)行操作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配(pei)有紫外(wai)線殺(sha)菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為(wei)避免(mian)RNA降解(jie)，樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程應在(zai)0-4℃條件下操作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實驗後立(li)即上機檢測；樣(yang)本處(chu)理(li)過(guo)程中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具耗(hao)材應經(jing)過(guo)無核(he)酶處(chu)理(li)。

3. 每次(ci)實(shi)驗應該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽性對(dui)照。
4. 試(shi)劑(ji)盒所有(you)試(shi)劑(ji)在(zai)使用(yong)前(qian)應該(gai)在(zai)常溫下充分(fen)融(rong)化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬(shun)時離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒內(nei)所配(pei)陰性和(he)陽性對(dui)照在(zai)壹次(ci)使用(yong)前(qian)應全部轉(zhuan)移至(zhi)標本準(zhun)備區(qu)，並(bing)單獨存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾(rao)，應避(bi)免(mian)裸手直接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應管(guan)，並(bing)應避(bi)免(mian)在(zai)PCR反(fan)應管(guan)上進行任(ren)何標記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴增相(xiang)關(guan)參數應按(an)照本說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關要求(qiu)進(jin)行設(she)置(zhi)；不(bu)同批號試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用(yong)。
8. ABI系列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參數設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基(ji)因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實驗(yan)過(guo)程中產(chan)品(pin)的廢棄物(wu)應該(gai)進(jin)行無(wu)害(hai)化(hua)處(chu)理(li)後方可丟棄(qi)。