TE-14細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品僅(jin)供科研研究使用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終止消化(hua)，再輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重懸，然後按 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶傳(chuan)代，最後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養液(ye)終

止消化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中進行長(chang)期(qi)保存(cun)。使用(yong)程序降溫盒可(ke)直接(jie)放入-80℃。

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍存(cun)管在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後將所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換液並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中，使消化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而定），然後在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變圓並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終止消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝入無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液按1:2比(bi)例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中，置於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進行細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液，註意凍存(cun)管做(zuo)好標識(shi)。將凍存(cun)管放入-80℃冰箱，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

三(san)、培(pei)養註意事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完好，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生請及時(shi)和(he)我們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片，是(shi)正常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種到新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進行培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後前 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我司(si)技術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流。由於(yu)運輸(shu)的原因，個別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和(he)我們聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研使用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不能再用(yong)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公司正在出(chu)售(shou)的產(chan)品：

細(xi)胞(bao)乙酰(xian)化(hua)組蛋白(bai)H4染(ran)色質免(mian)疫沈澱分(fen)析(CHIP)試劑盒10次

CLIAKitforColIII(HumanCollageypeIII)ELISAKIT人Ⅲ型膠原規格：48T/96T

RatCiatesyhase,CSELISAKit大(da)鼠(shu)檸檬(meng)酸合(he)酶(mei)(CS)ELISA試劑盒規格：96T/48T

大(da)鼠(shu)半(ban)乳(ru)凝(ning)素2(GAL2)ELISA試劑盒 ，英文名(ming)： GAL2 ELISA Kit

Human alpha enolase (alpha -enolase) ELISA Kit 人α烯(xi)醇化(hua)酶(mei)(α-enolase)ELISA試劑盒

Humansphingomyelin,SMELISA試劑盒人鞘(qiao)0脂(SM)ELISA試劑盒規格：96T/48T

ELISAKitMBP小鼠(shu)髓0脂堿(jian)性蛋白(bai)規格：48T/96T

humanB-cellleukemia/lymphoma3，Bcl3ELISAKit人B細(xi)胞(bao)淋(lin)巴瘤(liu)因(yin)子3(Bcl3)ELISA試劑盒規格：96T/48T

人重鏈可變(bian)區(qu)(IgHV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠(shu)鎖(suo)鏈素免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒 Mouse Desmosine ELISA Kit

谷酰(xian)胺(an)酶(mei)(GLS)測試(shi)盒(he) 可見(jian)分(fen)光光度(du)法 50管/48樣

RatOrexinAELISA試劑盒大(da)鼠(shu)阿(e)立(li)新(xin)A(OrexinA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanHyaluronidase,HAaseELISA試劑盒人透明質酸酶(mei)(HAase)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit人雷帕(pa)靶蛋白(bai)(mTOR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

大(da)鼠(shu)血管內(nei)皮細(xi)胞(bao)生長因(yin)子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

周期(qi)素D相互作(zuo)用(yong)蛋白(bai)1抗體

海藻糖酶(mei)抗體

三(san)聚胺(an)單克(ke)隆(long)抗體

NDST3蛋白(bai)抗體

線粒體內膜(mo)蛋白(bai)抗體

半(ban)乳(ru)糖神經酰(xian)胺(an)酶(mei)抗體

磷酸化(hua)沈默調(tiao)節相(xiang)關蛋白(bai)6抗體

TE-14細(xi)胞(bao)CTR1抗體

氧(yang)固(gu)醇結合(he)蛋白(bai)樣9抗體