創傷弧(hu)菌核酸檢測(ce)試劑盒(he)（PCR-熒(ying)光探(tan)針(zhen)法(fa)）

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 產品(pin)名(ming)稱(cheng)：創傷弧(hu)菌核酸檢測(ce)試劑盒(he)（PCR-熒光探(tan)針(zhen)法(fa)）
規格(ge)：48T   0.2PCR管
編號(hao)：BH-P97146
分類：PCR-熒光探(tan)針(zhen)法(fa)
儲存條(tiao)件：-20℃避光保存，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
運輸(shu)：低(di)溫、避(bi)光，快(kuai)遞免費(fei)送貨(huo)上門(men)。

準備物品(pin)：
清理液（A）                                   毫升(sheng)
染色(se)液（t B）                                   微升(sheng)
稀釋(shi)液(ye)（C）                                   毫升(sheng)
溶解(jie)液（tD）                                   毫升(sheng)
產品(pin)說明(ming)書(shu)                                   1份
使(shi)用及(ji)效果(guo)：
產品(pin)特點(dian)：
◇高特(te)異(yi)性：與其他(ta)病(bing)毒(du)無交(jiao)叉(cha)反應(ying)，無非特異(yi)性擴增；
◇高靈敏(min)度：檢(jian)測(ce)靈敏(min)度可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝(bei)；
◇操作(zuo)簡便：該系(xi)列所(suo)有(you)試劑(ji)均采(cai)用相同的體系和(he)條(tiao)件(jian)，可同(tong)時進行多個(ge)檢測(ce)；
◇高通量(liang)：多種雙(shuang)重PCR檢測(ce)以(yi)及(ji)三(san)重PCR檢測(ce)試劑盒(he)。

PCR反應(ying)特點
(1) 特異(yi)性強(qiang)
PCR反應(ying)的特異(yi)性決(jue)定因素為：
①引物與模板(ban)DNA特異(yi)正(zheng)確(que)的結(jie)合(he)；
②堿基(ji)配(pei)對原則(ze)；
③Taq DNA聚合(he)酶合(he)成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性；
④靶(ba)基(ji)因的特異(yi)性與保守性。
其中引(yin)物與模板(ban)的正確(que)結(jie)合(he)是關鍵。引(yin)物與模板(ban)的結(jie)合(he)及(ji)引(yin)物鏈的延伸(shen)是遵(zun)循(xun)堿(jian)基(ji)配(pei)對原則(ze)的。聚合(he)酶合(he)成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性及(ji)Taq DNA聚合(he)酶耐(nai)高溫性，使(shi)反應(ying)中模(mo)板(ban)與引物的結(jie)合(he)(復性)可以(yi)在(zai)較高(gao)的溫度(du)下進(jin)行，結(jie)合(he)的特異(yi)性大(da)大(da)增加(jia)，被(bei)擴增的靶(ba)基(ji)因片(pian)段(duan)也就能(neng)保持很(hen)高的正確(que)度。再(zai)通過(guo)選擇特異(yi)性和(he)保守性高(gao)的靶(ba)基(ji)因區(qu)，其特(te)異(yi)性程度(du)就更(geng)高(gao)。
(2) 靈敏(min)度高(gao)
PCR產物的生成(cheng)量是以(yi)指(zhi)數(shu)方(fang)式(shi)增加(jia)的，能(neng)將(jiang)皮克(ke)(pg=10-12g)量級(ji)的起始待(dai)測(ce)模板(ban)擴增到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水平(ping)。能(neng)從(cong)100萬(wan)個(ge)細(xi)胞中檢(jian)出壹個(ge)靶(ba)細(xi)胞；在(zai)病毒(du)的檢測(ce)中，PCR的靈敏(min)度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑形(xing)成(cheng)單位(wei))；在(zai)細(xi)菌學中zui小檢(jian)出率為(wei)3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡便、快速(su)
PCR反應(ying)用耐(nai)高溫的Taq DNA聚合(he)酶，壹次(ci)性地(di)將(jiang)反應(ying)液加(jia)好(hao)後，即在(zai)DNA擴增液(ye)和水浴鍋上進行(xing)變性-退火-延伸(shen)反應(ying)，壹般(ban)在(zai)2～4 小時(shi)完(wan)成(cheng)擴增反應(ying)。擴增產物壹般(ban)用電(dian)泳(yong)分(fen)析，不(bu)壹(yi)定要用同(tong)位(wei)素，無放射(she)性汙染、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對標本的純度(du)要求(qiu)低(di)
不(bu)需(xu)要(yao)分(fen)離病毒(du)或細(xi)菌及(ji)培(pei)養細(xi)胞，DNA 粗(cu)制(zhi)品(pin)及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作(zuo)為(wei)擴增模(mo)板(ban)。可(ke)直接(jie)用臨床(chuang)標(biao)本(ben)如血液、體腔(qiang)液、洗(xi)嗽液(ye)、毛發、細(xi)胞、活(huo)PCR技術概論。

檢測(ce)步驟：
壹、 試劑(ji)的準備
從試(shi)劑(ji)盒(he)中取出熒光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(Enzymes MIX)，冰上融化(hua)並振(zhen)蕩(dang)混勻後，10000rpm離心10s。
設所(suo)需要(yao)的PCR反應(ying)管管數(shu)為(wei)N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1管陰(yin)性對照+1管陽性對照)，每個(ge)測(ce)試反應(ying)體系配(pei)制(zhi)如下表：
試劑(ji) 每個(ge)反應(ying)加(jia)入(ru)的量 N個(ge)反應(ying)加(jia)入(ru)的量
熒光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶混合(he)物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算(suan)好(hao)各試劑的使(shi)用量(liang)，加(jia)入(ru)壹適當體積潔(jie)凈(jing)離心管中，充(chong)分(fen)混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(ge)PCR反應(ying)管中分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)15μL熒光PCR反應(ying)液，向每管(guan)中加(jia)入(ru)處理後樣(yang)品(pin)或陰(yin)性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離心10秒。
7.2 qPCR反應(ying)條件
將(jiang)各反應(ying)管放入(ru)定量PCR儀(yi)器(qi)的反應(ying)槽(cao)內(nei)。
循(xun)環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預變性 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸(shen)時(shi)收(shou)集(ji)熒光信(xin)號(hao)。報告(gao)基(ji)團：設置(zhi)為FAM。淬滅基團：NONE，請勿(wu)選擇ROX參比熒光。

C2C12, 小鼠(shu)肌(ji)原細(xi)胞胰(yi)多肽(tai)，大(da)鼠(shu)Pancreatic Polypeptide, rat>95%,BR

EB病毒(du)轉(zhuan)化(hua)的B細(xi)胞(傣族);KM9403 臍動脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞*培(pei)養基(ji) 100mL甲狀(zhuang)旁(pang)腺激素（1-38），Parathyroid Hormone (1-38),human>95%,BR

支氣(qi)管上(shang)皮細(xi)胞生(sheng)長(chang)添(tian)加(jia)物BEpiCGS五肽(tai)胃泌(mi)素Pentagastrin>95%,BR

FGFR2 Others Mouse 小鼠(shu) FGFR2 / CD332 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照) 肽(tai)YY，Peptide YY, Human>95%,BR

癌(ai)細(xi)胞;MCF7肽(tai)YY，犬(quan)，大(da)鼠(shu)，小(xiao)鼠，豬(zhu)Peptide YY (canine, mouse,porcine, rat)>95%,BR
小鼠(shu)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞MLF骨抑(yi)制(zhi)素（1-5）酰胺，，牛，狗，大(da)鼠(shu)，小(xiao)鼠，兔，馬>95%,BROsteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)

AXR1 Others Human  AXR1 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照) 骨抑(yi)制(zhi)素酰胺，>95%,BROsteostatin amide (human)

大(da)鼠(shu)上(shang)皮細(xi)胞*培(pei)養基(ji) 100mLp60 v-結(jie)構(gou)域（137-157）>95%,BRp60 v-src (137-157)

LTPA小鼠(shu)胰(yi)腺癌(ai)細(xi)胞 LTPA mouse pancreatic cancer cells 1640+10%FBSp60 C-結(jie)構(gou)域底物ⅠLys(*)>95%,BRp60c-src Substrate ILys(Biotin)

NRG1 Protein Human 重組 NRG1-beta 1 蛋(dan)白(bai) (EGF Domain, Fc 標簽(qian))構(gou)樹(shu)堿A（）HPLC≥98%， Broussonetine A
創傷弧(hu)菌核酸檢測(ce)試劑盒(he)（PCR-熒光探(tan)針(zhen)法(fa)）C2C12, 小鼠(shu)肌(ji)原細(xi)胞酸鋇shēng huà shì jì容量(liang)：RT500毫升(sheng)

RSC, 大(da)鼠(shu)雪(xue)旺細(xi)胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細(xi)胞 COS-7(SV40 轉(zhuan)化(hua)的非洲綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞)姆沙伯 W AW ChroMosorb W cW;

鼻(bi)咽癌(ai)細(xi)胞;CNE-2Z重蒸(zheng)酚(fen) () Phenol 108-95-2 250ML 通用試(shi)劑(ji)

DLL4 Others Mouse 小鼠(shu) DLL4 / Delta4 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽性對照) 氫-鉀ATP酶測(ce)試盒(he)50支/包(bao)RT

導管(guan)癌(ai)細(xi)胞;ZR-75-1(DNA高分(fen)子(zi)量(liang)標(biao)準(zhun))