PCR(聚合(he)酶(mei)鏈式(shi)反(fan)應(ying))是(shi)壹種用於(yu)放(fang)大擴(kuo)增特定的DNA片(pian)段(duan)的分子(zi)生(sheng)物(wu)學技術(shu)，它可(ke)看(kan)作(zuo)是(shi)生(sheng)物(wu)體外的特殊DNA復制，PCR的(de)最(zui)大特點(dian)，是(shi)能將(jiang)微(wei)量的DNA大幅增加(jia)。
 

　　PCR反(fan)應(ying)特異性(xing)主要決(jue)定因素(su)：
 

　　1、引(yin)物。引(yin)物的結(jie)構和(he)長(chang)度(du)是(shi)PCR特異性(xing)的(de)關鍵(jian)。此外，引(yin)物濃度(du)過高會增大(da)形(xing)成(cheng)引(yin)物二聚體(ti)的(de)概率(lv)，從(cong)而(er)降(jiang)低PCR特異性(xing)。
 

　　2、復性溫度。在Tm值允(yun)許範圍內(nei)，選(xuan)擇較(jiao)高的復性溫度可(ke)大(da)大(da)減(jian)少(shao)引(yin)物和(he)模板(ban)間的非特異性(xing)結(jie)合(he)，提(ti)高PCR反(fan)應(ying)的(de)特異性(xing)。
 

　　3、延(yan)伸時(shi)間。延伸時間過長會導(dao)致(zhi)非(fei)特異性(xing)擴(kuo)增帶(dai)的出(chu)現(xian)。
 

　　4、Mg2+濃度(du)。Mg2+濃度(du)對PCR擴(kuo)增的(de)特異性(xing)有顯(xian)著(zhu)影(ying)響。Mg2+濃(nong)度(du)過高時，容易出(chu)現(xian)非特異性(xing)擴(kuo)增，使(shi)反(fan)應(ying)特異性(xing)降(jiang)低。
 

　　5、DNA聚合(he)酶(mei)的種(zhong)類和(he)數(shu)量(liang)。不(bu)同種類的酶(mei)對PCR特異性(xing)的(de)影(ying)響程(cheng)度(du)不(bu)同；酶(mei)的量(liang)過多更(geng)容易引(yin)起(qi)非(fei)特異性(xing)擴(kuo)增。