GUS基(ji)因(yin)核(he)酸(suan)檢測(ce)試劑盒(he)（PCR-熒(ying)光探針(zhen)法）

訂(ding)購(gou)信(xin)息：
 產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：GUS基(ji)因(yin)核(he)酸(suan)檢測(ce)試劑盒(he)（PCR-熒(ying)光探針(zhen)法）
規格：48T  0.1PCR管(guan)
編號：BH-P97065
分類：PCR-熒(ying)光探針(zhen)法
儲存條件(jian)：-20℃避光保存，避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融。
運(yun)輸(shu)：低溫、避光，快遞免(mian)費送貨上(shang)門(men)。
產(chan)品(pin)特(te)點：
◇高特異(yi)性(xing)：與(yu)其他病毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反應(ying)，無(wu)非(fei)特異(yi)性(xing)擴增；
◇高靈敏(min)度(du)：檢(jian)測(ce)靈敏度(du)可(ke)達(da)10~100拷貝(bei)；
◇操作(zuo)簡(jian)便(bian)：該(gai)系(xi)列(lie)所(suo)有(you)試(shi)劑均采(cai)用相(xiang)同的(de)體系(xi)和(he)條件(jian)，可(ke)同時(shi)進行(xing)多(duo)個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高通量(liang)：多(duo)種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢測(ce)以(yi)及(ji)三重PCR檢測(ce)試劑盒(he)。

準備物(wu)品(pin)：
清理液（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染(ran)色(se)液（t B）                                   微(wei)升(sheng)
稀釋液（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶解(jie)液（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)                                   1份
使用及(ji)效(xiao)果：
PCR反應特(te)點
(1) 特異性(xing)強
PCR反應的(de)特(te)異(yi)性(xing)決(jue)定(ding)因素(su)為：
①引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)DNA特異正(zheng)確(que)的結(jie)合；
②堿基(ji)配對(dui)原則(ze)；
③Taq DNA聚合酶(mei)合(he)成反應的(de)忠(zhong)實性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因(yin)的特異(yi)性(xing)與(yu)保守(shou)性(xing)。
其中引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)的正確(que)結(jie)合是關鍵(jian)。引(yin)物(wu)與(yu)模(mo)板(ban)的結(jie)合及引(yin)物(wu)鏈的(de)延伸(shen)是遵(zun)循堿(jian)基(ji)配對(dui)原則(ze)的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合成反應的(de)忠(zhong)實性(xing)及Taq DNA聚合酶(mei)耐(nai)高(gao)溫性(xing)，使反(fan)應中(zhong)模(mo)板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的(de)結(jie)合(復(fu)性(xing))可(ke)以(yi)在(zai)較(jiao)高的(de)溫度下進行(xing)，結(jie)合的特(te)異(yi)性(xing)大大(da)增加(jia)，被(bei)擴增的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)片段也就能保持(chi)很(hen)高(gao)的(de)正(zheng)確(que)度。再(zai)通過選擇特(te)異(yi)性(xing)和(he)保守(shou)性(xing)高的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)區，其特(te)異性(xing)程度就更高。
(2) 靈敏度(du)高(gao)
PCR產(chan)物的(de)生(sheng)成量(liang)是(shi)以(yi)指(zhi)數(shu)方(fang)式增加(jia)的(de)，能(neng)將皮克(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始(shi)待測(ce)模(mo)板(ban)擴增到(dao)微(wei)克(ug=10-6g)水平。能(neng)從(cong)100萬個(ge)細胞(bao)中(zhong)檢出壹個(ge)靶(ba)細胞(bao)；在(zai)病毒(du)的(de)檢測(ce)中，PCR的靈敏(min)度(du)可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形(xing)成單(dan)位)；在細菌學中zui小檢(jian)出(chu)率(lv)為(wei)3個(ge)細菌。
(3) 簡(jian)便(bian)、快速(su)
PCR反應用耐(nai)高(gao)溫的Taq DNA聚合酶(mei)，壹次(ci)性(xing)地將反應(ying)液加(jia)好(hao)後(hou)，即在DNA擴增液和(he)水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進(jin)行(xing)變(bian)性(xing)-退火-延伸(shen)反應(ying)，壹般(ban)在2～4 小時(shi)完成擴增反(fan)應(ying)。擴(kuo)增產(chan)物壹般(ban)用電(dian)泳(yong)分析(xi)，不(bu)壹定(ding)要用同(tong)位素(su)，無(wu)放(fang)射性(xing)汙(wu)染(ran)、易(yi)推(tui)廣(guang)。
(4) 對標本的純(chun)度要(yao)求(qiu)低(di)
不需(xu)要(yao)分(fen)離(li)病毒(du)或細菌及(ji)培養細胞(bao)，DNA 粗制(zhi)品(pin)及(ji)總(zong)RNA均可(ke)作(zuo)為(wei)擴(kuo)增模(mo)板(ban)。可(ke)直接用臨床標(biao)本如血(xue)液、體腔(qiang)液、洗(xi)嗽(sou)液、毛發、細胞(bao)、活(huo)PCR技術概(gai)論。
CM-H029臍帶(dai)單(dan)核(he)細胞(bao)*培養基(ji)100mL糊精(jing);白糊精(jing)DextrinBR

DU145細胞(bao)，前(qian)列腺癌(ai)細胞(bao) 涎腺腺樣囊性(xing)癌(ai)細胞(bao),Acc-3細胞(bao) 整合SV40基(ji)因(yin)的上皮(pi)細胞(bao);HBL-100 [HBL100]鹽(yan)酸(suan)芐(bian)達(da)明Benzidamine HCl>98%,BR

615小鼠(shu)癌(ai)瘤株;Ca761葡聚糖(tang)凝(ning)膠(jiao)G-50;交(jiao)聯(lian)葡聚(ju)糖G-50(中顆粒(li))Sephadex G-50分類範圍3×100000

HA Others H1N1 甲(jia)型(xing)流(liu)感(gan) H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照) 葡聚糖(tang)凝(ning)膠(jiao)G-50;交(jiao)聯(lian)葡聚(ju)糖G-50(粗顆粒(li))Sephadex G-50分類範圍3×100000

皮膚成纖(xian)維細胞(bao);CCC-HSF-1L-(+)-扁(bian)桃(tao)酸(suan);S-扁(bian)桃(tao)酸(suan)(S)-(+)-Mandelic acid>99.0%,BR
CL-0403NCI-H524(非(fei)小細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2偶(ou)氮(dan)磺(huang)III(>90.0%(HPLC))>90.0%(HPLC)Sulfonazo III

ACBD6 Others Human  ACBD6 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照) 2-(4-磺(huang)基(ji)苯(ben)偶(ou)氮(dan)）-1,8-二羥(qiang)基(ji)萘(nai)-3,6-二磺(huang)酸(suan)三鈉鹽(yan)水合物(wu)(>95.0%(HPLC))>95.0%(HPLC)3 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate

臍靜(jing)脈內(nei)皮(pi)細胞(bao)總(zong)RNAHUVEC NA2,2'-二羥(qiang)基(ji)偶(ou)氮(dan)苯(ben)(>98.0%(T))>98.0%(T)2,2'-Dihydroxyazobenzene

Jecket細胞(bao)，瘤細胞(bao) 肺腺癌(ai)細胞(bao),SPC-A1細胞(bao) EC109，食管(guan)癌(ai)細胞(bao)S-乙酰(xian)半(ban)鹽(yan)酸(suan)>98%,BRS-Acetamidomethyl-L-cysteine

貓(mao)星形(xing)腦(nao)膠(jiao)質(zhi)細胞(bao);PG-4(S+L-)O-叔(shu)丁(ding)基(ji)-L-甲(jia)酯鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)0.98O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester
GUS基(ji)因(yin)核(he)酸(suan)檢測(ce)試劑盒(he)（PCR-熒(ying)光探針(zhen)法）CSF2 Others Rat 大鼠(shu) GM-CSF / CSF2 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對照) N-苯(ben)甲(jia)酰(xian)-N-苯(ben)基(ji)羥(qiang)胺;鉭試劑(ji);BPHA>98%;ARN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon

侵(qin)襲性(xing)脈絡膜(mo)色(se)素(su)瘤細胞(bao);C9186-氯(lv)核(he)苷>98%,BR6-Chloroguanosine

HuH-7細胞(bao)，肝(gan)癌(ai)細胞(bao) 小鼠(shu)樣瘤細胞(bao),P388D1細胞(bao) 小型(xing)豬(zhu)腎(shen)細胞(bao);MPK-5'-三1酸(suan)三鈉鹽(yan)>95%,BRITP•Na3

MDA-MB-435S(導(dao)管(guan)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2鳥(niao)苷-5'-三1酸(suan)二鈉(na)鹽(yan)>95%,BRGTP.Na2

Promocell C-22121 Endothelial Cell GrowthMedium MV 2 KIT, 內(nei)皮(pi)細胞(bao)生(sheng)長培養基(ji)MV2套(tao)裝 500ml4,4'-二正辛氧(yang)基(ji)氧(yang)化偶(ou)氮(dan)苯(ben)(>95.0%(N))>95.0%(N)4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene
檢測(ce)步驟(zhou)：
壹、 試劑的(de)準備
從試劑(ji)盒(he)中取(qu)出(chu)熒(ying)光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合(he)物(wu)(Enzymes MIX)，冰上(shang)融(rong)化並(bing)振(zhen)蕩(dang)混勻(yun)後(hou)，10000rpm離心10s。
設(she)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)PCR反應管(guan)管(guan)數(shu)為(wei)N(N=樣本數(shu)+1管(guan)陰(yin)性(xing)對照+1管(guan)陽(yang)性(xing)對照)，每個(ge)測(ce)試反應(ying)體(ti)系(xi)配制(zhi)如下表：
試劑 每個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入的(de)量(liang) N個(ge)反(fan)應(ying)加(jia)入的(de)量(liang)
熒(ying)光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合(he)物(wu) 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計算好(hao)各(ge)試(shi)劑(ji)的(de)使(shi)用量(liang)，加(jia)入壹適(shi)當體積潔凈(jing)離(li)心管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)混勻(yun)，10000rpm離心10s，向設(she)定(ding)的N個(ge)PCR反應管(guan)中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)入15μL熒(ying)光PCR反應液，向每管(guan)中(zhong)加(jia)入處理(li)後(hou)樣品(pin)或陰性(xing)對照(NTC)和(he)陽性(xing)對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離心(xin)10秒(miao)。
7.2 qPCR反應條件(jian)
將各(ge)反(fan)應(ying)管(guan)放(fang)入定(ding)量(liang)PCR儀器的反應(ying)槽內(nei)。
循環(huan)條件(jian):
1循環(huan) 50℃ for 2 min
預變(bian)性(xing) 1循環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸(shen)時(shi)收集熒(ying)光信號。報告基(ji)團(tuan)：設(she)置為(wei)FAM。淬(cui)滅基(ji)團(tuan)：NONE，請勿(wu)選擇ROX參比熒(ying)光。