NCI-H1623細胞

公司產(chan)品(pin)僅供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得用(yong)於臨床診斷！

壹、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

1、細胞傳代：

1）細胞生長至覆蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓後加入(ru) 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比例進行(xing)分(fen)瓶傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長至覆蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變(bian)圓後加入(ru)培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打細胞使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮中(zhong)進行(xing)長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用程(cheng)序

降溫(wen)盒(he)可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅供參(can)考(kao)，具體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸液的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上清液，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸液加入(ru)含適(shi)量(liang)培養基的培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細胞密度。

2) 細胞傳代：如(ru)果(guo)細胞密度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養上清，用不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫落(luo)，迅速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕敲幾下(xia)培養瓶(ping)後加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上清液，補加1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸液按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養(yang)基的新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細胞生長狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進行(xing)細胞凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上清液，用PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細胞計數(shu)。

b、根據細胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血清細胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的產品(pin)：

植物(wu)多(duo)酚(fen)氧(yang)化(hua)酶（polyphenol oxidase；PPO）活(huo)性比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

北方雜交(jiao)試(shi)劑盒(he)

植物(wu)蔗(zhe)糖磷(lin)酸(suan)合成(cheng)酶（sucrose phosphate synthase）活(huo)性

PP2A蛋白(bai)表(biao)達(da)西(xi)方雜(za)交(jiao)分(fen)析(xi)試(shi)劑盒(he)

通用型馬鈴(ling)薯(shu)卷葉(ye)病毒(du)（Potato Leafroll Virus；PLRV）

唾(tuo)液酸(suan)（SA）比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

體液輔酶Q含量(liang)比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

細菌細胞趨(qu)化(hua)作用(yong)（chemotaxis）軟瓊脂檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

組織(zhi)過(guo)氧(yang)化(hua)氫酶（CATALASE）過氧(yang)化(hua)活(huo)性比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

細菌澱粉瓊(qiong)脂平(ping)板(ban)

石(shi)蠟切(qie)片組織(zhi)VEGF蛋(dan)白表達(da)NBT顯色(se)光學(xue)顯微(wei)鏡(jing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

食品(pin)添加劑阿糖醇比色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)

Borrelia burgdorferi RFLP基因分(fen)析(xi)試(shi)劑盒(he)

細胞PAK2激(ji)酶活(huo)性定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)（A/B/C）

通用型組織(zhi)/細胞β-半(ban)乳糖苷(gan)酶原位染色(se)試(shi)劑盒(he)

脂質運載蛋白(bai)抗(kang)體

宮(gong)頸癌原基因(yin)1/bri3結(jie)合蛋白抗(kang)體

絨毛(mao)膜特(te)異(yi)性轉錄(lu)因(yin)子GCM2抗(kang)體(ti)

L型(xing)氨基(ji)酸(suan)轉運蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體(ti)

細胞因(yin)子(zi)信(xin)號傳導抑(yi)制(zhi)蛋白3抗體

癌胚(pei)抗原(yuan)相關細胞粘附(fu)分(fen)子7抗(kang)體

磷(lin)酸(suan)二酯酶4A抗體(ti)

NCI-H1623細胞B細胞轉錄(lu)激(ji)活(huo)因子(zi)抗體

嗅覺受(shou)體(ti)6B2抗(kang)體(ti)

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細胞瓶(ping)是否完好(hao)，培養(yang)液(ye)是否有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象，若有(you)上述現象 發生請及(ji)時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說(shuo)明書(shu)，了解細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基、血(xue)清比例、所(suo)需 細胞因(yin)子(zi)等(deng)，確保細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件壹致(zhi)，若由於培養條(tiao)件不壹致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現問題，責(ze)任由 客戶自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問題，部(bu)分(fen)細胞由於溫(wen)度 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常現象。觀察(cha)好細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細胞直接混勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重懸 細胞，並接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培養。

5. 請客戶用相同(tong)條(tiao)件的培養(yang)基(ji)用於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流。由於運輸的原因(yin)，個別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不穩定的情(qing)況，請及(ji)時和(he)我(wo)們聯(lian)系(xi)，告知細胞 的具體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回訪(fang)直至問題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基) 不能(neng)再用來(lai)培養細胞，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的培養(yang)基(ji)來(lai)培養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。