MOG-G-UVW細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品(pin)介紹：

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再輕輕(qing)吹打細胞使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細胞使之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其移入-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)中進(jin)行長期保存(cun)。使用(yong)程序

降溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以隨貨產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主。將含(han)有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混合均勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞懸液(ye)加入含適量(liang)培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或將細胞懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿(min)中，加入約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞傳代：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清，用(yong)不(bu)含鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所有細(xi)胞，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落，迅速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的新皿(min)中或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生長狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時(shi)，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細胞及細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細胞(bao)計數(shu)。

b、根據細(xi)胞數量(liang)加入無(wu)血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌儲存。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿取(qu)。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

植(zhi)物(wu)鐵(tie)型(xing)亞鹽(yan)還(hai)原酶活(huo)性(xing)比(bi)色法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

逆(ni)轉(zhuan)錄(lu)RT試劑(ji)盒(he)

植(zhi)物(wu)根瘤原生質細胞分離(li)試劑(ji)盒(he)

細胞(bao)GSK-3BETA蛋白(bai)表(biao)達(da)熒光(guang)定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

通用(yong)型羊(yang)Q熱（Q Fever）基因(yin)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

通用(yong)型鈉(na)離子(zi)（Na）濃度(du)化(hua)學(xue)比(bi)色法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

血(xue)濾紙(zhi)片樣(yang)品(pin)半乳糖總含量(liang)酶連(lian)續循(xun)環(huan)反(fan)應比(bi)色法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

氧(yang)化(hua)8-氧(yang)脫(tuo)氧(yang)鳥苷（8-oxo-dG）ELISA分析(xi)試劑(ji)盒(he)

Helly 固著液(ye)

腸毒(du)素B（Staphylococcus aureus : enterotoxin B）鑒定16S rDNA PCR擴增(zeng)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

冰凍(dong)切片組(zu)織(zhi)PDGF-A蛋白(bai)表(biao)達(da)NBT顯色光學(xue)顯(xian)微(wei)鏡(jing)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

食物(wu)D-半乳糖含量(liang)光譜(pu)法定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

冰凍(dong)切片組(zu)蛋(dan)白(bai)H3-K9甲基化(hua)免(mian)疫組(zu)化(hua)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

組織(zhi)JNK3激酶活(huo)性(xing)定量(liang)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)（A/B/C）

血(xue)液(ye)抗(kang)凝液(ye)

脂肪細(xi)胞(bao)型脂肪酸(suan)結(jie)合蛋白(bai)4重(zhong)組兔單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)

睪丸(wan)酸(suan)性(xing)磷(lin)酸(suan)酶抗(kang)體(ti)

人血(xue)清抗體(ti)

LSM6蛋白(bai)抗體(ti)

細胞(bao)維(wei)甲酸(suan)結(jie)合蛋白(bai)1抗體(ti)

癌/睪丸(wan)抗(kang)原128抗體(ti)

淋巴(ba)細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)抗(kang)體(ti)

MOG-G-UVW細胞(bao)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao)基因(yin)1抗(kang)體(ti)

嗅覺(jiao)受(shou)體(ti)5D3抗體(ti)

三、培(pei)養(yang)註意事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首先觀察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現象(xiang) 發生請及時和我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解(jie)細(xi)胞相關信(xin)息，如細(xi)胞(bao)形態、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清比(bi)例、所需 細(xi)胞因子(zi)等，確保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現問(wen)題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀察細(xi)胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇烈碰亡破(po)碎形成碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直接(jie)混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同條件(jian)的培(pei)養(yang)基用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術部溝通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運輸(shu)的原因(yin)，個別(bie)敏感細(xi)胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩定的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和我(wo)們聯系，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我們的(de)技術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪直至問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養(yang)基 (灌液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能再用(yong)來培(pei)養(yang)細胞，請換用(yong)按照說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基來培(pei)養(yang)細胞。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳代建議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。