MOG-G-CCM細(xi)胞

公司產(chan)品僅(jin)供科研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨床(chuang)診斷(duan)！

壹(yi)、商品(pin)介紹：

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱中培養(yang)；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至覆蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕(qing)輕吹(chui)打細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅供參考，具(ju)體操(cao)作步(bu)驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離心3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第二(er)天(tian)換液(ye)並檢查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如果細(xi)胞密(mi)度達 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代培養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所有(you)細(xi)胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕(qing)輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞生(sheng)長狀態良好時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿取(qu)。

公(gong)司正在(zai)出售(shou)的產(chan)品：

藻類細(xi)胞亞鹽還原酶(mei)總(zong)活(huo)性(xing)比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

兩(liang)步(bu)法(fa)RT－PCR熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he)

植(zhi)物(wu)花粉(fen)原(yuan)生(sheng)質(zhi)細(xi)胞分(fen)離試(shi)劑(ji)盒(he)

細(xi)胞GSK-3BETA蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

通(tong)用(yong)型(xing)羊犬(quan)新(xin)孢(bao)子(zi)蟲(chong)（Neospora caninum）基(ji)因(yin)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

酵母鉀離(li)子(zi)（K）濃(nong)度化學比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

組(zu)織半乳(ru)糖總(zong)含(han)量酶(mei)連(lian)續循環反應(ying)比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

細(xi)胞內(nei)氧(yang)化(hua)8-氧(yang)脫(tuo)氧(yang)鳥苷（8-oxo-dG）流(liu)式(shi)細(xi)胞分(fen)析試(shi)劑(ji)盒(he)

Orth固(gu)著(zhe)液(ye)

腸(chang)毒(du)素A（Staphylococcus aureus : enterotoxin A）鑒定(ding)16S rDNA PCR擴(kuo)增(zeng)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

載(zai)玻(bo)片細(xi)胞PDGF-A蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)NBT顯(xian)色光(guang)學(xue)顯(xian)微(wei)鏡(jing)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

乳(ru)制(zhi)品D-半乳(ru)糖含(han)量光(guang)譜(pu)法定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

細(xi)胞組(zu)蛋(dan)白(bai)H3-K9甲(jia)基(ji)化(hua)比色法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

細(xi)胞JNK3激酶(mei)活(huo)性(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)（A/B/C）

ACD血(xue)液(ye)抗(kang)凝液(ye)

脂肪(fang)細(xi)胞特(te)異(yi)性(xing)粘(zhan)附(fu)分(fen)子抗(kang)體

睪(gao)丸(wan)激素孤(gu)兒(er)受體相關蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

人血(xue)紅蛋(dan)白(bai)單(dan)克(ke)隆抗(kang)體

LSM5蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

細(xi)胞外(wai)信號調節(jie)激酶(mei)5重(zhong)組兔單(dan)克(ke)隆抗(kang)體

癌(ai)/睪(gao)丸(wan)抗(kang)原113抗(kang)體

淋巴(ba)細(xi)胞趨化因(yin)子CCL2抗(kang)體

MOG-G-CCM細(xi)胞B淋巴(ba)細(xi)胞成(cheng)熟(shu)因(yin)子（CD269）抗(kang)體

嗅(xiu)覺(jiao)受(shou)體(ti)5D16抗(kang)體

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先(xian)觀察細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞說(shuo)明書，了(le)解細(xi)胞相關信息，如(ru)細(xi)胞形(xing)態、所用(yong)培養(yang)基(ji)、血(xue)清比例(li)、所需 細(xi)胞因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養(yang)條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸(shu)問題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於溫度 變(bian)化及劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎形(xing)成碎片，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀察好細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並接種到新的培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培養(yang)箱中進行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相同條件的培養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便於和我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸(shu)的原因(yin)，個別(bie)敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定(ding)的情況，請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知細(xi)胞 的具(ju)體情(qing)況，以便我(wo)們的技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能再用(yong)來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養(yang)條件新(xin)配制(zhi)的培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。