MOLM-16細胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷！

壹、商(shang)品(pin)介紹：

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察，待細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使之脫落，然後將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察，待細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使之脫落，然後將懸(xuan)液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先將細胞(bao)凍存(cun)管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中(zhong)進(jin)行(xing)長期保存(cun)。使用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫盒可(ke)直(zhi)接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅供(gong)參考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴中(zhong)迅速(su)搖晃解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並檢(jian)查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液浸潤所有(you)細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況而(er)定(ding)），然後在顯微(wei)鏡下觀察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫落，迅速(su)拿(na)回操作臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計數。

b、根據(ju)細胞(bao)數量(liang)加入(ru)無血清(qing)細胞(bao)凍存(cun)液，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做好標識(shi)。將凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿(na)取(qu)。

公司(si)正在出售的(de)產(chan)品：

真菌(jun)/酵母(mu)細胞(bao)鐵型亞(ya)鹽還(hai)原酶(mei)活性比(bi)色(se)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

體(ti)外RNA轉(zhuan)錄(lu)合成試劑(ji)盒

植物質粒菌化(hua)試劑(ji)盒

GSK-3BETA蛋白(bai)表達(da)西方雜交分(fen)析試劑(ji)盒

通用(yong)型羊(yang)弓(gong)形體(ti)剛地弓(gong)形蟲（Toxotest；Toxoplasma gondii）基因(yin)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)鈉離(li)子（Na）濃(nong)度化(hua)學比(bi)色(se)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

體(ti)液半乳糖總含量酶(mei)連(lian)續循(xun)環(huan)反應比(bi)色(se)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

冰凍(dong)切片(pian)氧(yang)化(hua)8-氧(yang)脫氧(yang)鳥苷（8-oxo-dG）熒光染(ran)色測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒

B5固著液(ye)

腸(chang)毒素C（Staphylococcus aureus : enterotoxin C）鑒定(ding)16S rDNA PCR擴增檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

石蠟(la)切片組(zu)織PDGF-A蛋白(bai)表達(da)NBT顯色光學(xue)顯微(wei)鏡檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

D-半乳糖待測(ce)樣品(pin)處(chu)理試(shi)劑(ji)盒

石蠟(la)切片組(zu)蛋(dan)白H3-K9甲(jia)基(ji)化(hua)免疫(yi)組(zu)化(hua)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

細胞(bao)MAPKAP KINASE2激酶(mei)活性定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒（A/B/C）

OXALATE（鈉鹽(yan)）血液抗凝(ning)液

脂肪(fang)細胞(bao)型脂肪(fang)酸結(jie)合蛋白(bai)單(dan)克隆抗體(ti)

睪丸(wan)特異表達(da)新基(ji)因(yin)5抗體(ti)

人血清(qing)型A抗體(ti)

LSM8蛋白(bai)抗體(ti)

細胞(bao)維(wei)甲(jia)酸(suan)結(jie)合蛋白(bai)2抗體(ti)

癌/睪丸(wan)抗原(yuan)58抗體(ti)

淋(lin)巴(ba)細胞(bao)特異性蛋(dan)白(bai)酪激酶(mei)單(dan)克隆抗體(ti)

MOLM-16細胞(bao)B淋(lin)巴(ba)細胞(bao)酪激酶(mei)抗體(ti)

嗅(xiu)覺(jiao)受(shou)體(ti)5F1抗體(ti)

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首(shou)先觀察細胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完(wan)好，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致，若由於(yu)培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致而導致細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任由 客戶自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下觀察細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎形成碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀察好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接種到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍幾(ji)張細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和(he)我司(si)技(ji)術部(bu)溝通(tong) 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸(shu)的原因，個(ge)別(bie)敏(min)感細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩定的(de)情況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以(yi)便我們(men)的(de)技(ji)術人員(yuan)跟蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第(di)壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。