MOR/CPR細胞

公司產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨床(chuang)診斷(duan)！

壹(yi)、商品介紹(shao)：

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細胞回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕吹打細胞使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的培養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細胞回(hui)縮變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕吹打(da)細胞使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並(bing)放(fang)置於凍存管中；

4）先(xian)將細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中進行長(chang)期保(bao)存(cun)。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨產品說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻。然(ran)後(hou)將所有細胞懸液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜（或將細胞懸液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中，加入約8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離子的PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使消化液浸(jin)潤(run)所有細胞，將培養(yang)瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱(xiang)中消化1-2 min（視細胞情(qing)況(kuang)而定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞大部分變圓(yuan)並(bing)脫落，迅(xun)速拿回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕打勻後(hou)裝入(ru)無菌離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。

c、將細胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿(min)中或者(zhe)瓶(ping)中，置於培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無菌離心(xin)管中，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進行細胞計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞凍(dong)存液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註(zhu)意凍存管做好標(biao)識。將凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿取。

公司正在(zai)出(chu)售的(de)產品：

植物銅型(xing)亞鹽(yan)還(hai)原(yuan)酶活性(xing)比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

RNasin（核(he)糖酶抑制(zhi)劑(ji)）

植物組織(zhi)葉(ye)綠體DNA萃取試劑盒(he)

GSK-3BETA蛋白表達(da)ELISA定量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

通用(yong)型(xing)馬皰疹病毒（Equine Herpes Virus Type 1）基(ji)因檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

血液鈉(na)離(li)子（Na）濃度(du)化學(xue)比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

細胞鹽(yan)含量(liang)比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

氧化(hua)8-氧脫氧鳥苷（8-oxo-dG）高效(xiao)液相(xiang)色(se)譜（HPLC）分析試劑(ji)盒(he)

HARTMAN固(gu)著(zhe)液(ye)

腸毒素E（Staphylococcus aureus : enterotoxin E）鑒定(ding)16S rDNA PCR擴增(zeng)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

細胞PDGF-A蛋白表達(da)熒(ying)光定(ding)量檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

乳(ru)制(zhi)品(pin)蔗糖比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

海(hai)洋動物種系(xi)基(ji)因分析試劑(ji)專(zhuan)題

細胞MAPKAP KINASE3激酶活性(xing)定(ding)量檢(jian)測(ce)試劑盒(he)（A/B/C）

OXALATE（氨(an)鹽(yan)）血液抗(kang)凝(ning)液

脂肪細胞增(zeng)強結合蛋(dan)白1

睪丸特(te)異樣蛋白50抗(kang)體

人乙肝病毒pre S1蛋白/HBV pre S1 protein抗(kang)體

LUC7L2蛋白抗(kang)體

細胞纖(xian)毛內轉運(yun)同(tong)源蛋(dan)白140抗(kang)體

癌/睪丸抗(kang)原(yuan)83抗(kang)體

淋(lin)巴細胞特(te)異性(xing)接頭蛋白抗(kang)體

MOR/CPR細胞B淋(lin)巴細胞鏈接激活蛋白抗(kang)體

嗅覺受(shou)體5H1抗(kang)體

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血清比(bi)例、所需(xu) 細胞因子等，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培養(yang)條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細胞由(you)於溫度(du) 變化及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察好(hao)細胞狀(zhuang)態後，75%酒精消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消化，懸浮(fu)細胞直(zhi)接混(hun)勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重懸 細胞，並(bing)接種到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中，置於培養(yang)箱(xiang)中進行培養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件的(de)培養(yang)基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞後(hou)前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於和我司技(ji)術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個別敏(min)感細胞會出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知細胞 的(de)具體情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題解決。

7. 該細胞僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞培(pei) 養(yang)條件新配制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細胞。     收到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。