HCC1008細(xi)胞(bao)

公司(si)產品僅供科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不得(de)用於臨床(chuang)診斷！

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加入 5ml 培養

液終止(zhi)消(xiao)化，再輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加入培養液終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放置(zhi)於凍存管(guan)中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保存。使(shi)用程(cheng)序

降溫(wen)盒(he)可直接(jie)放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養凍存處(chu)理(li)僅供參(can)考(kao)，具體操(cao)作步驟(zhou)以(yi)隨貨產品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍存管(guan)在 37℃水浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培養基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上清液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後吹勻(yun)。然後將所有細(xi)胞(bao)懸液加入含適(shi)量(liang)培養基(ji)的培養瓶中培養過(guo)夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸液加入10 cm皿(min)中，加(jia)入約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天(tian)換液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培養上清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使消(xiao)化液浸(jin)潤(run)所有細(xi)胞(bao)，將培養瓶置於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然後在顯(xian)微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿回(hui)操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾下培養瓶後加2-3ml培養基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新的含8 mL培養基(ji)的新皿(min)中或(huo)者瓶中，置於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可進(jin)行細(xi)胞(bao)凍存。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養液，裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上清液，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計數。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量(liang)加(jia)入無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍存管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位置以(yi)便下(xia)次拿取(qu)。

公(gong)司(si)正在出(chu)售(shou)的產品：

組織半(ban)-12（CASPASE-12）活性熒光(guang)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

8%蛋(dan)白電(dian)泳(yong)分(fen)離(li)預制(zhi)膠(jiao)溶(rong)液(ye)

果蠅細(xi)胞(bao)培養基(ji)

HISTONE H3蛋(dan)白表(biao)達西方(fang)雜(za)交(jiao)分(fen)析試劑(ji)盒(he)

植物(wu)源性食品核桃（walnut）基(ji)因檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

10倍碳酸(suan)濃(nong)縮緩沖(chong)溶液(ye)

細(xi)胞(bao)糖原磷(lin)酸(suan)化酶a（GLYCOGEN PHOSPHORYLASE）活性

超氧化(hua)物(wu)歧化酶（SOD）標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)測(ce)定試劑(ji)盒(he)

石蠟切片澱粉樣(yang)蛋(dan)白（AMYLOID）染(ran)色(se)試劑(ji)盒(he)

HMMA高效液相(xiang)色(se)譜(pu)電(dian)化學(xue)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

?細(xi)胞(bao)COLLAGEN III蛋(dan)白表(biao)達比色(se)法定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

果菜U（S-Methylmethionine）比色(se)法定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

細(xi)胞(bao)COLLAGEN I蛋(dan)白表(biao)達流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

組織基(ji)質金屬（MMP-9）明(ming)膠(jiao)法比(bi)色(se)定量(liang)檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

動(dong)物(wu)細(xi)胞(bao)/組織活性(xing)線(xian)粒(li)體分離試劑(ji)盒(he)

粘(zhan)脂(zhi)蛋(dan)白2抗體

肝癌相(xiang)關抗原(yuan)hca25a

缺氧誘導基(ji)因1C蛋(dan)白抗體

KIAA0146蛋(dan)白抗體

細(xi)胞(bao)角蛋(dan)白4重(zhong)組(zu)兔單克(ke)隆抗體

α-L巖藻(zao)糖苷酶(mei)2抗體

辣椒素(su)受(shou)體抗體

HCC1008細(xi)胞(bao)ATP依賴RNA解(jie)旋(xuan)酶DDX39抗體

鋅(xin)指蛋(dan)白ZBTB5抗體

三、培養註意事(shi)項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培養液是(shi)否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所用(yong)培養基(ji)、血(xue)清比例、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因子等，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問題(ti)，責任(ren)由(you) 客戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸(shu)問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化及(ji)劇烈(lie)碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的培養瓶或培養皿(min)中，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請客戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議(yi)客(ke)戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍幾張細(xi)胞(bao)照片，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於和我司(si)技術部溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸(shu)的原因，個別敏(min)感細(xi)胞(bao)會出(chu)現不穩定的情況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和我們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體情況，以(yi)便我(wo)們(men)的技術人(ren)員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問(wen)題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。