R5421 感受態(tai)細胞100ul*50

R5421 感受態(tai)細胞100ul*50 操作(zuo)方(fang)法（以(yi)下操作(zuo)均按無菌條(tiao)件(jian)的標準(zhun)進行）
1 取感(gan)受態(tai)細胞置於冰浴中，如需(xu)分裝(zhuang)可(ke)將剛(gang)融化(hua)細(xi)胞懸液(ye)分(fen)裝(zhuang)到無菌預冷(leng)的離(li)心管中，置於(yu)冰浴中。
●  壹次轉(zhuan)化(hua)感(gan)受態(tai)細胞的建議用量(liang)為(wei)50-100 μl，可(ke)以(yi)根據實際(ji)情況(kuang)分(fen)裝使(shi)用。應(ying)註(zhu)意所(suo)用DNA 體積(ji)不要超(chao)過感(gan)受態(tai)細胞懸液(ye)體(ti)積(ji)的十分(fen)之(zhi)壹。
以(yi)下實驗(yan)以100 μl感(gan)受態(tai)細胞為例(li)。
R5421 感受態(tai)細胞100ul*502 向(xiang)感受態(tai)細胞懸液(ye)中加(jia)入(ru)目(mu)的DNA（100 μl 的感受態(tai)細胞能夠被1 ng 超(chao)螺(luo)旋(xuan)質粒DNA 所(suo)飽和(he)），輕輕旋(xuan)轉(zhuan)離(li)心管以混勻(yun)內(nei)容(rong)物(wu)，在(zai)冰浴中靜(jing)置30 分鐘(zhong)。
3 將離(li)心管置於42℃水(shui)浴中放置(zhi)60-90 秒，然(ran)後(hou)快(kuai)速將管(guan)轉(zhuan)移到冰浴中，使細(xi)胞冷(leng)卻2-3 分(fen)鐘(zhong)，該過(guo)程不要搖動離(li)心管。
4 向(xiang)每個(ge)離(li)心管中加(jia)入(ru)900 μl 無菌的SOC 或(huo)LB 培(pei)養(yang)基(ji)（不含(han)抗(kang)生(sheng)素(su)）， 混勻(yun)後置(zhi)於37℃搖床振蕩培(pei)養(yang)1 小(xiao)時(shi)（160-220 轉(zhuan)/分鐘(zhong)），目(mu)的是使(shi)質粒上相關(guan)的抗(kang)性(xing)標記基因(yin)表達(da)，使菌體(ti)復蘇。
5 將離(li)心管內(nei)容(rong)物(wu)混(hun)勻，吸取100 μl 已(yi)轉(zhuan)化(hua)的感受態(tai)細胞加(jia)到含(han)相應(ying)抗(kang)生(sheng)素(su)的SOB 或(huo)LB 固(gu)體(ti)瓊脂培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)，用無菌的彎(wan)頭(tou)玻(bo)棒輕輕的將細(xi)胞均勻塗(tu)開(kai)。將平(ping)板(ban)置(zhi)於(yu)室溫直(zhi)至液(ye)體(ti)被吸收，倒(dao)置平板(ban)，37℃培(pei)養(yang)12-16 小(xiao)時(shi)。
R5421 感受態(tai)細胞100ul*50●  塗(tu)布用量(liang)可(ke)根據具體實驗(yan)來調整。如(ru)轉(zhuan)化(hua)的DNA 總量(liang)較(jiao)多(duo)，可取更(geng)少量(liang)轉(zhuan)化(hua)產(chan)物(wu)塗(tu)布平(ping)板；反(fan)之(zhi)，如轉(zhuan)化(hua)的DNA 總量(liang)較(jiao)少(shao)，可(ke)取200-300 μl 轉(zhuan)化(hua)產(chan)物(wu)塗(tu)布平(ping)板。如(ru)果(guo)預計(ji)的克隆較(jiao)少，可通過(guo)離(li)心（4,000 rpm, 2分鐘(zhong)）後(hou)吸除部分培(pei)養(yang)液(ye)，懸(xuan)浮(fu)菌體(ti)後將其(qi)塗(tu)布於(yu)壹個(ge)平板(ban)中。（塗(tu)布剩余的菌液(ye)可(ke)置(zhi)於4℃保(bao)存(cun)，如(ru)果(guo)次日(ri)的轉(zhuan)化(hua)菌落(luo)數過少(shao)可以(yi)將剩下的菌液(ye)再塗(tu)布新的培(pei)養(yang)板(ban)）
 註(zhu)意事項
1. 感(gan)受態(tai)細胞應(ying)保(bao)存(cun)在(zai) -70℃，不可多(duo)次凍(dong)融和(he)放(fang)置(zhi)時(shi)間過(guo)長，以避(bi)免降(jiang)低(di)感受態(tai)細胞的轉(zhuan)化(hua)效(xiao)率。
2. 進行轉(zhuan)化(hua)操作(zuo)時，應(ying)根據相(xiang)應(ying)溫(wen)度(du)及無菌條(tiao)件(jian)的要求進行。
3 為防止轉(zhuan)化(hua)實驗(yan)不成功，可以保(bao)留(liu)部分連(lian)接(jie)反(fan)應(ying)液(ye)，以(yi)重(zhong)新轉(zhuan)化(hua)，將損(sun)失(shi)降(jiang)到低(di)。
以(yi)下是的相關(guan)產(chan)品(pin)：

 GHBP 人生(sheng)長激素(su)結合(he)蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 GROγ/CXCL3/MGSA 人生(sheng)長調節致癌基因(yin)γ 規(gui)格： 48T/96T

 GROβ/CXCL2/MGSA 人生(sheng)長調節致癌基因(yin)β 規(gui)格： 48T/96T

 GROα/CXCL1/MGSA 人生(sheng)長調節致癌基因(yin)α 規(gui)格： 48T/96T

 GTE-AGE 人腎(shen)小(xiao)球組(zu)織(zhi)糖(tang)基化(hua)終(zhong)末(mo)產(chan)物(wu) 規(gui)格： 48T/96T

 GTE-AGE 人腎(shen)小(xiao)球組(zu)織(zhi)糖(tang)基化(hua)終(zhong)末(mo)產(chan)物(wu) 規(gui)格： 48T/96T

 Kim-1 人腎(shen)損(sun)傷分(fen)子1 規(gui)格： 48T/96T

 Renin 人腎(shen)素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 ADM 人腎(shen)上(shang)腺髓質素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 ADRA1A 人腎(shen)上(shang)腺素(su)能a1A受體 規(gui)格： 48T/96T

 ADRA1A 人腎(shen)上(shang)腺素(su)能a1A受體 規(gui)格： 48T/96T

 EPI 人腎(shen)上(shang)腺素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 ACA 人腎(shen)上(shang)腺皮質抗(kang)體(ti) 規(gui)格： 48T/96T

 nephrin 人腎(shen)病(bing)蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 NAIP 人神(shen)經(jing)元雕亡(wang)抑(yi)制蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 NT-4 人神(shen)經(jing)營(ying)養(yang)因(yin)子4 規(gui)格： 48T/96T

 NT-3 人神(shen)經(jing)營(ying)養(yang)因(yin)子3 規(gui)格： 48T/96T

 NCAM-L1/CD171 人神(shen)經(jing)細胞粘附(fu)分(fen)子配(pei)體(ti)1 規(gui)格： 48T/96T

 NSE 人神(shen)經(jing)特異(yi)性(xing)烯醇化(hua)酶 規(gui)格： 48T/96T

 NP-Y 人神(shen)經(jing)肽Y 規(gui)格： 48T/96T

 p2 人神(shen)經(jing)髓鞘(qiao)蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 NF 人神(shen)經(jing)絲蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 NF 人神(shen)經(jing)絲蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

人神(shen)經(jing)生(sheng)長導向(xiang)因(yin)子Slit2 ELISA Kit，48T/96T 人神(shen)經(jing)生(sheng)長導向(xiang)因(yin)子Slit2 ELISA Kit，48T/96T 規(gui)格： 48T/96T

 fractalkine/CX3CL1 人神(shen)經(jing)趨化(hua)蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 GFAP 人神(shen)經(jing)膠(jiao)質纖維(wei)酸性(xing)蛋(dan)白 規(gui)格： 48T/96T

 NT 人神(shen)經(jing)降(jiang)壓素(su) 規(gui)格： 48T/96T

 NKB 人神(shen)經(jing)激肽(tai)B 規(gui)格： 48T/96T

 CVNPF 人神(shen)經(jing)保(bao)護(hu)因(yin)子 規(gui)格： 48T/96T

 NA 人神(shen)經(jing)氨酸(suan)酶 規(gui)格： 48T/96T

 ENA-78/CXCL5 人上(shang)皮(pi)中性粒細胞活化(hua)肽(tai)78 規(gui)格： 48T/96T

 Ep-CAM/CD362 人上(shang)皮(pi)細胞粘附(fu)分(fen)子 規(gui)格： 48T/96T

R5421 感(gan)受態(tai)細胞100ul*50 ESA 人上(shang)皮(pi)特異(yi)性(xing)抗(kang)原(yuan) 規(gui)格： 48T/96T

 EMA 人上(shang)皮(pi)膜抗(kang)原(yuan) 規(gui)格： 48T/96T

 St-Ag 人傷(shang)寒(han)抗(kang)原(yuan) 規(gui)格： 48T/96T