PCR檢測試劑盒PCR反(fan)應引(yin)物設(she)計(ji)原(yuan)則(ze):
PCR反(fan)應中有(you)兩(liang)條引(yin)物，即5′端(duan)引(yin)物和3′引(yin)物。設(she)計(ji)引(yin)物時(shi)以壹(yi)條DNA單(dan)鏈(lian)為(wei)基準（常以信息(xi)鏈為(wei)基準），5′端(duan)引(yin)物與位(wei)於(yu)待(dai)擴增(zeng)片段5′端(duan)上(shang)的壹(yi)小段DNA序列相(xiang)同；3′端(duan)引(yin)物與位(wei)於(yu)待(dai)擴增(zeng)片段3′端(duan)的壹(yi)小段DNA序列互補(bu)。PCR檢測試劑盒PCR反(fan)應引(yin)物設(she)計(ji)的基(ji)本原(yuan)則(ze)如下(xia)：
（1）  引物(wu)長度：15-30 bp，常(chang)用為(wei)20 bp左右。
（2） 引物堿基(ji)：G+C含量(liang)以(yi)40-60%為(wei)宜，G+C太(tai)少(shao)擴增(zeng)效果(guo)不(bu)佳(jia)，G+C 過多易出現非特(te)異(yi)條帶。ATGC最好隨(sui)機分(fen)布，避(bi)免(mian)5個以(yi)上的嘌(piao)呤或(huo)嘧(mi)啶核(he)苷(gan)酸的成串(chuan)排列。
（3） 引(yin)物(wu)內部不(bu)應(ying)出現互補(bu)序列。

（4）兩個引(yin)物之(zhi)間不(bu)應(ying)存在互補(bu)序列，尤(you)其(qi)是避(bi)免(mian)3 ′端(duan)的互補(bu)重疊。

（5） 引物與(yu)非特(te)異(yi)擴增(zeng)區(qu)的序列的同源(yuan)性不(bu)要(yao)超過70%，引(yin)物(wu)3′末(mo)端(duan)連(lian)續8個(ge)堿基(ji)在待(dai)擴增(zeng)區(qu)以(yi)外(wai)不(bu)能(neng)有(you)全互補(bu)序列，否則(ze)易導致非特(te)異(yi)性擴增(zeng)。

（6）引(yin)物(wu)3‘端(duan)的堿基(ji)，特(te)別(bie)是最末(mo)及(ji)倒(dao)數第二(er)個堿基(ji)，應嚴格要(yao)求(qiu)配對，選擇(ze)是G和C。
（7） 引(yin)物(wu)的5 ′端(duan)可以修飾(shi)。如附(fu)加(jia)限(xian)制酶(mei)位(wei)點(dian)，引(yin)入突(tu)變(bian)位(wei)點(dian)，用生(sheng)物su、熒(ying)光物(wu)質(zhi)、di 高辛標記，加入其(qi)它短(duan)序列，包括起(qi)始(shi)密(mi)碼(ma)子、終止(zhi)密(mi)碼(ma)子等。